附录XIIB支原体检查法主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床治疗用细胞进行支原体检查时，应同时进行培养法和指示细胞法（DNA染色法）。病毒类疫苗的病毒收获液、原液采用培养法检查支原体，必要时，亦可采用指示细胞法筛选培养基。也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法。第一法培养法推荐培养基及其处方（1）支原体肉汤培养基猪胃消化液500ml氯化钠2.5g牛肉浸液（1：2）500ml葡萄糖5.0g酵母浸粉5.0g酚红0.02gPH值7.6±0.2，于121℃灭菌15分钟（2）精氨酸支原体肉汤培养基猪胃消化液500ml氯化钠2.5g牛肉浸液（1：2）500ml葡萄糖1.0g酵母浸粉5.0g酚红0.02gL精氨酸2.0gPH值7.1±0.2，于121℃灭菌15分钟（3）支原体半流体培养基按液体培养基处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂2.5~3g（4）支原体琼脂培养基按液体培养基处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂13.0~15.0g培养基灵敏度检查（变色单位实验法）(1)菌种肺炎支原体（ATCC15531）、口腔支原体（ATCC23714）,由国家药品检定机构分发。(2)操作将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36±1℃℃培养至培养基变色，盲传2代后，将培养物接种到待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7~10-9，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3~10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基内。每个稀释度接种3支试管，置36±1℃℃培养7～14天观察培养基变色结果。(3)结果判定以接种后培养基管数的2/3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。液体培养基的灵敏度：肺炎支原体(ATCC15531株)应达到10-8，口腔支原体(ATCC23714株)应达到10-4。检查法（1）供试品如在分装后24小时以内进行支原体检查者可贮存于2～8℃；超过24小时应置-20℃以下贮存。（2）检查支原体采用支原体液体培养基和支原体半流体培养基（或支原体琼脂培养基）。半流体培养基（或琼脂培养基）在使用前应煮沸10～15分钟，冷却至56℃左右，然后加入灭能新生牛血清（培养基∶血清为82∶），并可酌情加入适量青霉素，充分摇匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。取每支装量为10ml的支原体液体培养基各4支、相应的支原体半流体培养基各2支(已冷至36±1),℃℃每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36±1℃℃培养21天。于接种后的第7天从4支支原体液体培养基中各取2支进行次代培养，每一支培养基分别转种相应的支原体半流体培养基及支原体液体培养基各2支，置36±1℃℃培养21天，每隔3天观察...
