【摘要】目的：采用固相抗体包被方法，建立血管紧张素ⅰ放射免疫分析方法。方法：通过对抗体包被步骤、抗体稀释浓度、反应时间、反应体积等条件进行选择，建立新的分析方法，并进行方法学鉴定。结果：本项工作所建立的分析方法测量范围为100-7800pg/ml，灵敏度为42.2pg/ml。批内、批间变异均小于10%，回收率为90.3%―102.2%。结论：本项工作所建立的固相抗体方法与原有分离试剂分析方法相比，具有操作步骤少、反应时间短等优点，更加方便临床检测。【关键词】血管紧张素ⅰ固相抗体法放射免疫分析1引言采用固相抗体包被聚苯乙烯试管，并对抗体包被条件进行了研究，建立了血管紧张素ⅰ放射免疫分析法。结果表明在2―8℃下过夜包被，抗体滴度在1：9万时，制备的包被管用于血管紧张素ⅰ放射免疫分析，结合达到最大；不同滴度下包被，包被温度和时间对制备的包被管的影响不同；不同的反应时间以及125i―ai和标准品加样量的不同也会对包被管的结合产生影响。血管紧张素ⅰ包被管法放射免疫分析灵敏度为（42.2pg/ml）；回收率为（90.3%―102.2%）；批内、批间变异系数分别为（5.1%―9.0%）和（8.3%―10.2%）。2实验材料血管紧张素ⅰ多克隆抗体由原子高科医学二部提供；聚苯乙烯六角试管（mm×mm）为（哪个）塑料厂产品；125i―ai及ai药盒标准品由原子高科医学二部提供；蛋白g填料亲合层析柱由美国进口；牛血清白蛋白（bsa）为上海生物制品厂产品。对照药盒由原子高科股份有限公司生产（国药准字：）。其他试剂均为分析纯。3实验方法3.1兔igg的纯化采用蛋白―g柱进行亲合层析纯化，纯化后igg浓度由紫外分光光度法测定。用包被缓冲液（0.1mph9.5碳酸缓冲液）将兔igg配制10μg/ml。混合均匀后250？l/管包被，然后放2―8℃过夜，弃去包被管中第一层包被液，各管用500？l洗涤液（0.02mol/l，ph7.4磷酸缓冲液）清洗1次。待包被第二层（兔二抗）用。3.2用驴抗兔二抗进行第二层包被用0.05mol/l，ph7.4磷酸缓冲液（含1%bsa）将兔二抗配成合适的浓度后250？l/管包被，然后放2―8℃过夜，弃去包被管中第二层包被液，各管用500？l洗涤液（0.02mol/l，ph7.4磷酸缓冲液）清洗1次。待包被第三层（兔一抗）用。3.3不同滴度兔抗（一抗）包被实验将兔抗用封闭液配制成1：2万，1：4万，1：6万，1：8万，1：9万，1：12万，1：14万，1：16万不同的滴度，分别加250？l于已经包有兔二抗的包被管中，每个滴度做双复管，之后在每管中加入100？l125i―ai，然后放2―8℃静置过夜；弃去...
