ABO血型试验(正反定型)一原理利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定ABO血型。二试剂和材料1．抗-A（B型血），抗-B（A型血）及抗-A+B（O型血）分型血清。2．5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。3．受检者血清。4．受检者5%红细胞盐水悬液。三操作（玻片法）1．取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A+B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内，再加受检者2%红细胞悬液1滴，混合。2．另取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。3．将玻片轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集反应。也可用低倍镜观察结果。四结果判定：见表1表1ABO血型正反定型结果分型血清+受检者红细胞受检者受检者血清+试剂红细胞抗-A抗-B抗A+B血型A细胞B细胞O细胞+—+A—+——++B+—————O++—+++AB———注：+=凝集；-=不凝集五注意事项1．试管、滴管和玻片必需清洁干燥，防止溶血。2．操作中应先加血清后加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。3．为防止冷凝集现象的干扰，一般在室温内进行试验。4．标准抗血清必须符合标准，不要长期放在室温，以免污染和孳长细菌，等渗生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。5．观察结果要仔细，微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本，要用显微镜观察。注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。六血型鉴定中常见的假阳性反应1．红细胞串钱形成：红细胞相互重叠，连接成串，象一串重叠的钱币，称为串钱形成，又称假凝集。可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中温度过高，作用时间过长，致水分蒸发，血清浓缩。可在观察结果前，再加等渗盐水1滴，彻底混匀，串钱状红细胞因血液稀释而散开。也可用高倍镜仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。2．寒冷凝集：在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。多数正常人的血清在0~2ºC时能凝集本人的红细胞，又称自家凝集。这种凝集是可逆的，在0-2ºC时作用最强，20ºC时可消失。但在支原体肺炎、自免溶贫、肝硬化、系统性红斑狼疮等患者血清中，可以出现高效价的病理性自身冷凝集抗体，能与本人及其它各型人的红细胞发生凝集。其最适反应温度是低温，一般在25-30ºC凝集作用即减弱。克服方法：被检红细胞在配制悬液前，先用37ºC等渗生理盐水洗涤，必要时试验操作可在37ºC条件下进行，或在37ºC水浴中反复观...
