血凝仪SOP文件CA1500...doc

全自动血凝分析系统标准操作规程 SOP编码： 页数：页 制定人签名： 日期： 审核人签名： 日期： 批准人签名： 日期： 生效日期： 颁发日期： 周期性审查： 年一次 修订登记： 编码 页码 修订内容 修订依据 签名/日期 审查登记： 审查日期 签名 修订依据 签名/日期 文件編號：Lab.SOP-COA-0001 版 次：01 标准作业程序 ——全自动血凝仪CA1500 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共頁 使用单位： 编 写： 1 .设备基本技术参数 1．1 原理——CA1500凝血仪仪器具有三种检测原理方法：凝固法、发色底物法、免疫法 1.1.1 凝固法：基本测试原理是光学法的散射光检测（用660nm光电二极管检测散射光强度的变化），还并用了百分比方式的测定原理：当试剂加入标本后，凝血开始启动，随之光学出现变化，仪器把这种光学的变化描绘成凝固曲线：把开始出现凝集的起始点作为0%、把完全凝固的终点作为100%、把50%变化点处作为凝固时间（报告点），当测定含有干扰物（黄疸、溶血、高脂血症等）或低纤维蛋白原血症的特殊标本时，其作为起始点的0%的基线会随之上移或下移,相当于扣除本底干扰. 以上凝固法检测原理所测定的项目包括了最常用的如PT、APTT、FIB、TT、内源凝血因子（F VIII、XI、XI、XII），外源凝血因子（F II、V、VII、X）等 1.1.2. 发色底物法的检测原理：是通过测定产色物质的吸光度变化，以推算待测物的含量，这种方法属生物化学法，其基本原理是：试剂中为人工合成的含某种酶裂解位点的短肽，与产色物质如对硝基苯胺(pNA)连接，待检物品中含有活性酶或无活性的酶原被加入的激活剂活化，在检测过程中产色物质被解离下来，使被检物品出现颜色变化，其与被检物含量呈一定的数量关系。此方法以酶学方法为基础，可检测项目包括如：AT-III、Plg、PC、PS、FM、PAI，Tpa，α2-AP等。 1.1.3. 免疫法： 以被检物作为抗原，制备相应的多克隆抗体，利用抗原抗体的特异结合反应来对被检物进行定性和定量检测，在凝血仪上多采用免疫比浊法测定，其基本原理是当一定波长的光线通过反应混合液时，被其中抗原抗体反应形成的免疫复合物吸收而减弱，在一定范围内，其吸光度与复合物量呈正相关，因此当抗体量固定时，根据复合物的吸光度值，即可推算出待测抗原含量，可测定项目如D-二聚体、vWF因子、FDP等 1．2 检测环境要求: 1.2.1 温度: 10° - 30° C；湿度: 20 - 80% (无冷凝) 1.2.2 电源: 交流电100-240V，50/60Hz；功率：720VA 1.2.3 请勿将仪器直接置于水、直射阳光、冷凝或大风的环境中,这样会导致不正确的检测结果并导致仪器工作不正常而损坏 1.2.4 仪器的背面和墙之间要始终保持20厘米以上的距离。否则，仪器会过热，连接导管和连接负载过大而可能引发火灾。 1．3 主要项目检测指标: 1.3.1 检测范围： PT，TT——5~180sec（最宽可设置到600秒） APTT —— 5~300sec （最宽可设置到600秒） Fbg —— 0.25~10 g/L（＜0.5g/L或＞10g/L建议使用重稀释重检模式） D-Dimer Plus 50~16000 ug/L（＞2000ug/L需使用重稀释重检模式） 1.3.2 重复性： PT, APTT ≤ CV 2 % Fbg ≤CV 4 % 因子 ≤CV 5 % TT CV ≤10 % AT-III CV ≤ 5 % D-Dimer Plus CV ≤ 10 % 1.3.3 检测速度： 单项测试时最快180T/h， 组合时约120~140T/h； 2. 标本 l 使用3.8%或3.2%(W/V)拘橼酸钠溶液作为抗凝剂； l 血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数，按比例重抽血检验； l 血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）； ——采样后60分钟内进行； ——分离血浆应在3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除； l 盛血浆容器应加塞，防止PH改变； l 血浆存放时间不能太久： 温度 有效时间 室温 ≤2hr 2—8℃ ≤4hr -20℃ ≤2Weeks -70℃ ≤6months l 低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。 3 试剂及配套消耗品 3.1试剂 3.1.1反应试剂: 采用CA1500血凝仪配套Siemens试剂，具体见相应项目要求 3.1.2 系统清洁液:厂家配套Sysmex Clean I清洁液,用于检测过程中样品针、试剂针的冲洗； 3.1.3 系统冲洗液：蒸馏水，实验室自制，用于检测过程中系统管路的冲洗 3.1.4 :稀释液：配套Siemens的Owern’s Veronal Buffer 和CA System Buffer，用于检测过程中样本的稀释或定标曲线制定中标准血浆的稀释； 3.2 其它消耗品 3.2.1 反应杯：厂家配套Sysmex Reaction Tube反应杯 ,货号：SU-400 4 校准 4.1定期进行光学通道灵敏度校准检测 （半年一次，由厂家工程师进行） 4.2 定期进行温度检测校准 （半年一次，或有相应温度错误报警时进行，由厂家工程师执行） 4.3 定期进行机械位置检查调校 （半年一次，或有相应定位错误报警时进行，由厂家工程师执行） 5 质控 5.1质控液种类：Siemens Citrol I，II，III 5.2质控液的准备 5.2.1准备方式依照质控血浆配制要求：每瓶用1ml蒸馏水溶解，置室温15分钟后方可使用，室温下4小时内使用完； 5.2.2溶解后未使用完的质控血浆注明开瓶日期，分装保存于—20℃，3周内使用完。 5.3质控血浆使用时机 5.3.1每天做检体之前 5.3.2做完仪器校正之后 5.3.3重要的维修之后 5.3.5怀疑病患的报告有异常时 5.4质控血浆注意事项 5.4.1当作一般检体操作。 5.4.2接受范围(阀值)：按质控血浆说明书标注。 5.5超阀值之补救措施 5.5.1检查质控血浆是否过期、失效 5.5.2检查所使用的试剂、清洁、冲洗液、缓冲液等是否过期、失效 5.5.3若解决上述因素仍无法改善质控结果，必须考虑进行仪器校准及调校，联系厂家工程师进行。 6 操作步骤 6.1测试前准备：检查试剂、清洁液、冲洗液、反应杯等足够当日使用，仪器开机自检OK无报警； 6.2开机：电源开关位于仪器左侧，打开到“ON”状态，开机后仪器自检……约5分钟,屏幕上方 "Not Ready " 变为 " Ready ",提示可进行检测； 6.3每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗 6.4标本上机操作步骤： 6.4.1常规标本检测： 从主菜单 选 [ Work List ]---->出现第一架样本工作清单输入画面,选 [ ID. No. Entry ], 输入第一个样本编号------>按相应实验项目名称键 (如 [ PT ]、[APTT]…), 输入此标本每项要 测试项目……则选中项目相应位置标记为" ○", --> 用↑↓键,同样输入其他病人的编号、项目, 全部输入完, 仪器接受所输入的工作任务, 按键[NEXT] 为下一样本架 ,继续输入….... 将检体按编号顺序摆入普通样本架，放置好在进样器上，在仪器Ready状态下，按<START> 即可 6.4.2急诊标本检测：在检测过程中如有紧急检体插入，按 [STAT] ，选择[ STAT Holder ] ，当提示 是否要设置急诊标本，选择 [ OK ]，中间5个急诊专用位置设置画面出现，确认急诊位置处指 示灯为绿色，向内推打开急诊小门，按顺序放置好急诊标本，按一下急诊小门左侧门按纽，门 关闭。用[ ID No. Entry]输入相应急诊样本标号，如6.3.1一样按项目名称键为每标本选择要测 试的项目，确认，按<START>，开始急诊检测。 6.4.3 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下“Stored Data”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“Graph”，查看凝 集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测 6.4.4关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute” 6.4.5关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。 7 维护保养 7.1 每日维护： 7.1.1 清空已用过的反应杯:,从仪器左侧取出废杯箱--->倒空废杯--->清洁废杯箱并放回 清洁试剂位：打开遮光盖--->把试剂架取出. 将试剂架连同试剂放入冰箱，--->用棉纱 布擦干净试剂位冷凝水--->盖好遮光盖 7.2 每周维护 7.2.1 液路冲洗:仪器在"Ready"状态下,从主菜单按[Special Menu]--->按[Maintain]键--->按[Rinse&Prepare]键--->按[Execute]键,运行此程序--->完成后按[Return]键返回 7.2.2 清洁仪器:定期用纱布、棉纤等擦干净仪器内外;包括放试剂位置、放反应杯位置、检测通 道和各处表面位置…. 7.3 需要时维护： 7.3.1 当有压力报警时，调整压力:仪器在"Ready"状态下,从主菜单按[Special Menu]--->按 [Maintain]键--->按[Pressure Adjust.] 键,显示压力是否在其调整范围内？（1.0Kg和2.2Kg压力 可调，负压不可调）若否, 则打开仪器右侧相应的压力调整旋钮(开锁),旋动调整至允许范围--->锁紧 旋钮 7.3.2 当提示“Replace Lamp Unit”，提示亮度不够（≈2000小时寿命），需更换灯泡:关机--->从 仪器右侧取下灯泡外盖及内盖--->更换好的灯泡--->装上内外盖--->从主菜单按Special Menu]---> 再按[Maintain] --->再按[Calib. Lamp]--->确认关上遮光盖,按[Execute]键运行调整程序 8 健康和安全操作指南 所有操作维护需注意以下： 9 参考附件 9.1《CA1500 OPERATOR’S MANUAL》 9.2 《CA1500常规操作流程》 9.3 《CA1500日常维护及常见故障处理》