细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用.doc

华 南 师 范 大 学 实 验 报 告 学生姓名 何茂辉 学号 20062501302 专 业 生物科学 年级、班级 06科三 课程名称 细胞生物学实验 实验项目 实验类型 □验证 □设计 □综合 实验时间 09 年 5 月 19 日 实验指导老师 尤蓉、周仁超 实验评分 细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用 实验目的： 1. 通过红细胞的溶血过程的观察,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜的速度。 2. 通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质的内吞作用。 实验原理： 1. 红细胞在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。 2. 高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬作用，为非持异免疫功能的重要组成部分。 3. 小鼠腹腔注射淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性。 实验步骤： 细胞膜的渗透性(兔红细胞) 1. 取1mL兔的抗凝全血于50mL小烧杯中，再加入10mL0.17 mol/L氯化钠，稀释兔血制成兔的红细胞悬液，观察它的特点为一种不透明的红色浑浊液体。 2. 取1支试管加入10ml蒸馏水，再加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，可见溶液由不透明的红色迅速变成红色澄清液 3. 取6支试管贴上标签，依次加入下列等渗溶液10ml：①0.32M 甲醇、②0.32M 乙醇、③0.32M 丙醇、④0.32M 乙二醇、⑤0.32M 甘油、⑥0.32M 葡萄糖 4. 向每支试管加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，观察是否有溶血现象发生，记下溶血时间并给予分析 小鼠巨噬细胞的吞噬作用观察 1. 实验前一天向小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含台盼蓝)1ml 2. 鸡红细胞悬液制备：取抗凝全血1mL，移入10mL离心管,加入4mL生理盐水混匀, 1500rpm离心5 min。洗涤2次,最后按压积红细胞体积加生理盐水配成1%鸡红细胞悬液 3. 小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹部使鸡红细胞分散 4. 20～30min后,颈椎脱臼法处死小鼠 5. 将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推向一侧，加适量生理盐水与腹腔液混匀,用吸管吸取腹腔液于试管或小烧杯中备用 6. 吸取腹腔液1～2滴，制作临时装片 7. 镜检 结果与分析： 1、 编号 溶液种类 是否溶血 溶血时间 结果分析 1 0.17M 氯化钠 否 离子不能通过质膜 2 水 是 1s 低渗溶液，红细胞吸水破裂 3 0.32M 甲醇 是 15s 溶质分子进入细胞膜的速度 与溶质分子的极性、分子大小有关；同时细胞膜对进入溶质分子的选择性也对溶血现象的发生起重要作用。 4 0.32M 乙醇 是 7s 5 0.32M 丙醇 是 6s 6 0.32M 乙二醇 是 7s 7 0.32M 甘油 是 147s 8 0.32M 葡萄糖 否 大分子不能通过质膜 2、 思考题 1、溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压? 溶液的渗透压主要与溶液中溶质颗粒总数有关。 渗透压=ciRT或n/VRT(ci是解离常数、R是气体常数、T是绝对温度)，可以通过这两个公式粗略计算出简单盐溶液的渗透压。 2、实验前一天向小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是什么? 注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性