http://www.paper.edu.cn产志贺样毒素大肠埃希菌1类整合子的鉴定和分析1李咏梅,李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室长春,130021Email:mayflower380@163.com摘要:本文通过常规分离出大肠埃希菌、血清学分型,PCR法鉴定产stx1-2毒素性菌株;纸片扩散法对17种抗生素进行耐药性监测和分析;PCR法鉴定1类整合子阳性株;PCR产物测序并对结果进行分析,以了解1类整合子在产志贺样毒素大肠埃希菌中的分布,阐明整合子中耐药基因盒的种类及相互关系。结果表明各种标本中共鉴定出46株产志贺样毒素大肠埃希菌,其中23株为O157:H7;全部STEC对复方新诺明耐药,对链霉素耐药率为28.3%,氨苄西林为30.4%,而且有5株对至少4种以上抗生素多重耐药,耐药谱为复方新诺明-链霉素-氨苄西林。46分离株中有11株(23.9%)鉴定出1类整合子,PCR产物测序得知9株携带aadA1基因盒,2株携带aadA2基因盒,传递对氨基糖苷类抗生素的耐药性。结果证实产志贺样毒素大肠埃希菌存在1类整合子及其相关的基因盒,而且与氨基糖苷类抗生素的耐药性可能有关。关键词:志贺样毒素;大肠埃希菌;整合子1.引言细菌耐药性的迅速蔓延及扩散,给临床感染性疾病的治疗带来了巨大的副作用。已经证实的两种参与耐药基因扩散的机制,即耐药性质粒及转座子在其中起着重要的作用[1]。近年来,第三种耐药基因的扩散机制已被发现,即整合子(integron),一种通过特异重组位点介导耐药基因整合的DNA元件。这种重组系统依赖两个决定子,一是编码特异位点DNA整合酶(integrase)的int基因[2];二是被整合酶识别,并作为插入基因接受者的相邻位点,即attI(integronattach)位点。而插入的基因包含着被叫做基因盒(genecassette)的可移动元件,大多数都表达耐药性。迄今为止,根据int基因的不同,已有4类整合子得到了鉴定,大多数临床分离株及革兰阴性杆菌中存在着1类整合子[3]。其由两个保守片段组成,5’-CS包含int基因,attI位点和共同的启动子Pant,而3’-CS包含一个耐杀菌剂的基因(qacE△1),一个磺胺基因(sul1)和一个未知功能的开放读码框(orf5)。中央可变区域包含不同的基因盒组合,至少70种不同的耐药基因盒已被发现,它们在种内及种间转移,使宿主菌成为广谱耐药性细菌[4]。产志贺样毒素大肠埃希菌(Shigatoxin-producingE.coli,STEC)是引起大规模食源性食物中毒的主要病原菌[5]。STEC中有100余个血清型的致病性大肠杆菌可以致病,主要血清型是O157:H7,可引起非出血性腹泻,出血性结肠炎...