第41卷第3期2011年06月工业微生物IndustrialMicrobiologyVol.41No.3Jun.2011作者简介:廖德芳(1985~),女,硕士,E-mail:liao_defang@126.com。倡通讯作者:0510-85918229;传真:0510-85815339;E-mail:gyshi@jiangnan.edu.cn。doi:10.3969桙j.issn.1001-6678.2011.04.012产耐热β-葡萄糖苷酶细菌的筛选与鉴定廖德芳,陈献忠,张梁,王正祥,石贵阳倡(江南大学生物资源与能源研究中心,无锡214122)摘要:从中国高校工业微生物资源和信息中心(CICIM-CU)菌种库的1323株细菌保藏物中筛选出20株产β-葡萄糖苷酶能力较高的细菌。通过16SrDNA序列鉴定,初步确定其中有5株为嗜热溶胞土芽孢杆菌(Geobacillussp.),其余为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。对其中编号为F157043A的地衣芽孢杆菌和编号为170-28-2的嗜热溶胞土芽孢杆菌进行了粗酶液酶学性质分析,发现地衣芽孢杆菌最适反应温度为55℃,最适反应pH值为9.0,该条件下测得粗酶液比酶活为0.66U桙mg;嗜热溶胞土芽孢杆菌最适反应温度为53℃,最适反应pH值为8.0,该条件下测得粗酶液比酶活为0.36U桙mg。通过菌体和菌落形态观察以及生理生化特征分析,进一步鉴定编号为F157043A的菌株为地衣芽孢杆菌。关键词:耐热β-葡萄糖苷酶;细菌;筛选;鉴定β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,EC.3.2.1.21)又称β-D-葡萄糖苷水解酶,是纤维素酶系中一类重要的水解酶,它能够催化水解结合于纤维二糖和纤维寡糖末端非还原性的β-D-糖苷键,同时释放出配基与葡萄糖[1]。但是天然的纤维素酶普遍存在β-葡萄糖苷酶活力低的缺陷,致使纤维素降解过程中纤维二糖积累,影响酶解效率。为了提高纤维素酶的整体活力,使其更好的应用于纤维素酒精等工业中,国内外对各种不同来源的β-葡萄糖苷酶都进行了广泛的研究。已有报道过的β-葡萄糖苷酶来源多为霉菌[2,3,4]和酵母[5,6,7],而来源于细菌的报道较少。由于酶的热稳定性在工业上具有很多优势[8],近年来从嗜热细菌中分离β-葡萄糖苷酶逐渐引起了人们的兴趣。在以木薯等淀粉质原料生产酒精的过程中,原料中含有的纤维杂质经液化、糖化阶段会生成部分纤维二糖。耐热性的β-葡萄糖苷酶与糖化酶(最适作用温度57℃~63℃)协同作用可有效地将纤维二糖降解为葡萄糖,从而...