MTT细胞增殖检测方法.pdf

产品说明书 本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 产品组成：产品组成：产品编号产品编号 BB-4201-1 BB-4201-2 规格 250 assays 500 assays MTT 溶液 2.5ml 5ml 溶解液 30ml 60ml 产品简介：产品简介：MTT 法细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。活细胞的线粒体中存在与 NADP 相关的脱氢酶，可将黄色的 MTT 还原生成结晶状的蓝紫色的Formazan，死细胞无此酶，MTT 不被还原。在特定溶剂存在的情况下，Formazan 可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定 460-630nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。本试剂盒灵敏度高，线性范围宽，使用方便。使用方法：使用方法：贴壁细胞：1、收集对数期细胞，每孔加入 100ul 细胞悬液,使待测细胞调密度约 2000-10000 孔。2、5%CO2，37孵育，至细胞单层铺满孔底（96 孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，也可两小时，或半天时间后加药，一般 5-7 个梯度,每孔 100ul,设 3-5 个复孔。3、5%CO2，37孵育 16-48 小时，倒置显微镜下观察。4、每孔加入 10ulMTT 溶液，继续培养 4h。若药物与 MTT 能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用 PBS 冲 2-3 遍后，再加入含 MTT 的培养液。5、终止培养，小心吸去孔内培养液。6、每孔加入 150ul 溶解液，置摇床上低速振荡 10min，使结晶物充分溶解。在酶标仪490nm 或 550nm 或 570nm 处测量各孔的吸光值。7、同时设置调零孔（培养基、MTT、溶解液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液）悬浮细胞：1、收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度 1106/ml，按次序将补足的无血清培养基 40ul、需检测药物 10ul、细胞悬液 50ul（即 5104细胞/孔），共 100ul 加入到 96 孔板（边缘孔用无菌水或 PBS 填充）。每板设对照（加 100l 培养基）。2、置 37，5%CO2 孵育 16-48 小时，倒置显微镜下观察。3、每孔加入 10 ul MTT 溶液，继续培养 4 h。4、离心（1000 转 x10min），小心吸掉上清，每孔加入 100 ul 溶解液，置摇床上低速振荡 10 min，使结晶物充分溶解。490nm 或 550nm 或 570nm 处测量各孔的吸光值。5、同时设置调零孔（培养基、MTT、溶解液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液），每组设定 3-5 复孔。产品说明书 本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！结果分析：结果分析：细胞的存活率：将各测试孔的 OD 值减去调零孔 OD 值或对照孔 OD 值。各重复孔的 OD值取均数SD。细胞的存活率以 T/C%表示，T 为加药细胞的 OD 值，C 为对照细胞的 OD 值。细胞存活率%=（加药细胞 OD/对照细胞 OD）100 相关产品：相关产品：产品 产品号 产品 产品号 产品 产品号 产品 产品号 Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 BB-4101 细胞周期检测试剂盒 BB-4104 Annexin V-EGFP/PI 凋亡试剂盒 BB-4102 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 BB-4105 MTT 细胞增殖及毒性检测试剂盒 BB-4201 Caspase 3 活性检测试剂盒 BB-4106 CCK-8 细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4202 Caspase 8 活性检测试剂盒 BB-4107 WST-1 细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4203 Caspase 9 活性检测试剂盒 BB-4108 MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 BB-4204 Caspase 10 活性检测试剂盒 BB-4112 Hoechst33342/PI 双染试剂盒 BB-4131 细胞凋亡形态学检测试剂盒 BB-4123 DAPI 染色试剂盒 BB-4133 Rhodamine 123 染色试剂盒 BB-4137 细胞存活率检测试剂盒 BB-4122 AO/EB 双染试剂盒 BB-4132