MHC-Ⅰ类分子抗原呈递相关蛋白与乙肝相关性研究.pdf

1 2 4 新疆 医科大学学报J OUR N AI OF X I NJ I A NG ME D I C A L UNI VE R S I TY 2 0 1 0 F e b ，3 3(2)MHC I 类分子抗原呈递相关蛋 白与 乙肝相关性研究 海力曼 衣拉洪，海来提 居来提，伊力木努尔 甫拉提，徐 磊，海米提 阿布都力木(新疆医科大学基础医学院 病理学教研室，组织胚胎学教研室，新疆乌鲁木齐8 3 0 0 1 1)摘要：目的 探讨正常肝组织 与乙型肝炎 中 TA P 、T AP 、HS P 7 0、HS P 9 0、C N X、?2 一 MG蛋 白表达及相关 关 系。方 法 以 内源性生物 素阻 断 S-P法来 检测 3 2例 乙肝患 者和 l 6例 健康对 照者石蜡 包埋 肝组 织 的 T AP 、T A P z、HS P 7 0、Hs P g 0、C N X、p 2 一 MG蛋白表达情况。结 果p 2 一 MG、TA P 、HS P 7 0、HS P 9 0、C NX蛋 白在 乙肝组表 达高于正常组(P均O 0 5)；通过相关性分析发现，TA P 蛋 白与 HS P 7 0蛋 白在正常组 中呈相关性(Y z=1 6 0 0 0，P 0 0 0 8)。结论T AP 、TA P z、HS P 7 0、HS P 9 0、C N X、2 MG蛋 白均在乙肝组 表达高于正常组(PO 0 5)，提 示这些蛋 白均参与 MHC I 类分子的乙肝病毒抗原处理及提呈过程，并且可以做为诊断乙肝的临床指标。关键词：乙肝；MH C I 类分子；TA P l；T A P 2；HS P 7 0；HS P 9 0；C N X；B 2 一 MG 中盈分类号：R 3 4；R 5 7 5 1 文献标识码：A 文章编号：l O O 9 5 5 5 1(2 0 1 0)0 2 0 1 2 4 0 4 S t u d i e s o n t h e e x p r e s s i o n o f pr o t e i ns a s s o c i a t e d wi t h M HC c l a s s I a n t i g e n pr e s e n t a t i o n i n t h e l i v e r a nd t h e i r a s s o c i a t i o n wi t h he pa t i t i s B Hai l i ma n Yi l a ho n g，Ha i l a i t iJ u l a i t i，Yi l i mi nu e rPu l a t i e t a l (De p a r t me n t o f Pa t h o l o g y，Co l l e g e o f Pr e c l i n i c a l Me di c i n e，Xi n j i a n g Me di c a l Un i v e r s i t y，Ur u mq i 8 3 0 01 1，Chi n a)A b s t r a c t：Ob j e c t i v e T o e v a l u a t e t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f t h e MHC c l a s s I a n t i g e n p r e s e n t a t i o n-a s s o c i a t e d p r o t e i n s：t r a n s p o r t a s s o c i a t e d a n t i g e n p r o c e s s i n g p r o t e i n s TAPl a n d TAP 2，h e a t s h o c k p r o t e i n(HS P)7 0 a n d HS P9 0，c a l n e x i n(CNX)，a n d B 2 mi c r o g l o b u l i n(13 2 一 MG)，i n n o r ma l a n d h e p a t i t i s B l i v e r t i s s u e s，a n d i t s a s s o c i a t i on wi t h he pa t i t i s B M e t h o d s The e x pr e s s i o n of p r o t e i n s TAP】，TAP2，HSPT 0，H S P90，CNX，a n d 2 一 MG i n p a r a f f i n e mb e d d e d l i v e r t i s s u e s f r o m 3 2 p a t i e n t s wi t h h e p a t i t i s B(a s h e p a t i t i s B g r o u p)a n d 1 6 h e a l t h y i n d i v i d u a l s(a s c o n t r o l g r o u p)we r e d e t e c t e d b y s t r e p t o a v i d i n b i o t i n p e r o x i d a s e(S-P)b a s e d i mmun o hi s t o c he m i s t r y me t ho d wi t h b l o c k i ng e nd o ge no u s b i o t i nRe s u l t s Th e e xp r e s s i o n l e v e l of p 2 一 MG，T AP,，HS P 7 0，HS P 9 0 a n d C NX i n l i v e r t i s s u e s f r o m h e p a t i t i s p a t i e n t s w a s h i g h e r t h a n t h a t i n n o r ma l g r o u p(P 0 0 5)Th e c o r r e l a t i o n a n a l y s i s s u g g e s t e d a c o r r e l a t i v e r e l a t i o n s h i p b e t we e n e x p r e s s i o n o f TAP z a n d HS P 7 0 i n t h e n o r ma l l i v e r t i s s u e s(X 一 1 6 0 0 0，P O00 8)Co n c l u s i o n Th e e x pr e s s i o n 0 f T AP 1，T AP 2，HS P T 0，HS P 9 0，C NX，a n d p 2 MG p r o t e i n s w a s h i g h e r i n t h e h e p a t i t i s B g r o u p t h a n t h a t i n t h e n or ma l gr o u p(P O 0 5)Th i s r e s u l t s s ug g e s t t h a t t he s e pr o t e i ns a r e i n v ol v e d i n t he p r o c e s s a nd p r e s e n t a t i o n o f M HC c l a s s I a n t i g e n s o f h e p a t i t i s B v i r u s，a n d c o u l d b e u s e d a s ma r k e r s f o r c l i n i e a 1 d i a g n o s i s o f he p at i t i s B Ke y w o r d s：He p a t i t i s B；MHC c l a s s I；TAP 1；TAP 2；HS P T 0；HS P 9 0；CNX；p 2 一 MG 乙肝病毒(HB V)可感染人肝脏，导致肝炎、肝 硬化或肝癌。HB V感染为传染病发病率的第 2位，死亡率的第 3位，每年死于 HB V相关疾病 的人数 约 1 0 0万；全球 HB V携带者约 3 8 亿，我国约 1 3 基金项 目：国家 自然科学基金资助课题(3 0 4 6 0 0 4 6)作者简介：海力曼(1 9 6 3 一)，女(维吾尔族)，副教授，研究方向 分子病理学。通讯作者：海米提 阿布都力木(1 9 6 3 一)，男(乌孜别克族)，教授，硕士生导师，研究方 向：分子病理学。E-ma i l：h a i mi t i 1 6 3 c o m。新 疆医科 大学学报J OUR NA L OF XI N J I AN G ME D I C AL UNI VE R S I T Y 2 0 1 0 F e b ，3 3(2)1 2 5 亿。目前 已知 内源性抗 原通 过是 主要 组织 相容 性复 合体(MHC)，MHC I 类 分 子 提呈 给 细胞 毒 性 T 细 胞是 机体 细胞免 疫识别 的重要 阶段1 。抗 原处 理相 关转 运 蛋 白(T AP 、TAP。)负责 抗 原肽 从 细胞 浆 到 内质 网 的转 运，在 MHC I 类 分 子 的抗 原 处 理 及 提 呈过 程 中 除 了 T AP 、TAP 外，热 休 克 蛋 白 7 0 (HS P 7 0)、热 休 克 蛋 白 9 0(HS P 9 0)，钙 联 蛋 白 (C NX)、p 2 一 微球 蛋 白(I3 2 一 MG)也 发挥 重 要 作用。所 以 TAP 1、TAP 2、HS P 7 0、HS P 9 0、C NX、t7 2 一 MG 中 的任 何一样 或 几个 的结 构 和功 能障 碍将导 致细 胞表 面 MHC I 类分子 表达缺失，这成 为接种乙肝疫苗 不能 对此 产生 免疫 的一种 原 因。最 近发现 TAP 基 因 C o d o n 6 3 7位点 的多态性 对于 乙肝 的发 生 有着 显 著 的易患关 联，其杂合、纯 合形式 分别 增加 乙肝 患病 风 险 4 6 8倍和 6 3 4 倍。而具有 AG单倍 体 的个体 对 于乙肝 的发 生具 有 更 强 的易 感 关 联，其 增 加 乙肝 患 病 风 险 约 为 l 9 8 5 倍 。但 尚 未 见 TA P 1、T AP，、HS P T 0、HS P 9 0、C NX、1 7 2 一 MG 基 因表达 与 乙肝 关 系 的 报 道。因此 对 TAP 、TAP 、HS P 7 0、HS P 9 0、C N X、J3 2 一 MG 基 因 表 达 与 HB V 感 染 的关 联性 进行 研究，将有 助于认 识肝 细胞 免疫 逃逸 实质。l 材料和方法 1 1 材料 1 1 1 标 本 来源 收集 2 0 0 5 2 0 0 7年 间新疆 医科 大学 第一 附属 医 院病 理科 活检 经诊 断 的乙肝 的组织 标本 3 2例(乙肝组)和 新 疆 医科 大学 病 理 教研 室 提 供 的正常 肝组 织标本 1 6例(正 常组)。1 1 2实 验 试 剂TAP 、TAP 、8 2 一 MG、HS P 7 0、HS P 9 0、C N X兔抗人多克隆抗体分别购 自 Ab g e n t (美 国)、At l a s An t i b o d i e s(瑞 典)、D a k o C y t o ma t i o n (丹麦)、C e l l S i g n a l i n g(美 国)、C e l l S i g n a l i n g(美 国)和 P r o t e i n Te c h Gr o u p(美 国)，Hi s t o s t a i n p