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2023
年高
生物
25
细胞
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2—5 细胞工程自助式复习板块
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细胞工程是指应用_______和_______的原理和方法,通过某种_______手段,在_______水平或_______水平上,按照人们的意愿改变细胞内的_______或获得细胞产品的一门综合科学技术。
答案:细胞生物学 分子生物学 工程学 细胞整体 细胞器 遗传物质
一、植物细胞工程
1.植物细胞工程通常采用的技术手段有_______和_______等,这些技术的理论根底是_____。
答案:植物的组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性
2.植物细胞表现全能性,需要的条件是_______。
答案:植物体的器官或组织处于离体状态,有一定的营养物质、激素和其他外界条件
3.愈伤组织是指一种高度_______的呈_______状态的薄壁细胞。脱分化是指高度分化的植物器官、组织或细胞产生_______的过程。再分化是指_______进行培养,可以重新分化成根或芽等器官的过程。
答案:液泡化 无定形 愈伤组织 愈伤组织
4.人工种子可以解决某些作物品种_______差、_______困难或_______低等问题。
答案:繁殖能力 结子 发芽率
5.植物体细胞杂交是用两个来自不同_______融合成一个杂种细胞,并且把杂种细胞培育成新的_______的方法。
答案:植物的体细胞 植物体
6.植物细胞融合首先要去除细胞壁,我们常采用的方式是_______。植物体细胞融合实质上是不同植物体细胞的_______融合的过程。我们一般用物理法和化学法来促使其融合,物理方法有_____,化学方法有_____。
答案:酶解法 原生质体 离心、振动、电刺激等促使其融合 聚乙二醇作为诱导剂诱导融合
7.植物体细胞杂交的方法克服了______的障碍,在培育作物新品种方面取得了重大的突破。答案:远源杂交不亲和性
二、动物细胞工程
1.动物细胞工程常采用的技术手段有_______、_______、_______、_______、_______等。其中,_______技术是其他动物细胞工程技术的根底。
答案:动物细胞培养 动物细胞融合单克隆抗体 胚胎移植 核移植 动物细胞培养
2.动物细胞培养液中通常含有_______、_______、_______、_______和_______等。培养的动物细胞大都取自_______或出生不久的_______的器官或组织。
答案:葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素动物血清 动物胚胎 幼龄动物
3.原代培养〔1~10代〕:先用_______使组织器官分成单个细胞,再配成_______,然后放入培养瓶中培养。传到10代时,大局部细胞死亡,少数能存活的细胞称为_______。
答案:胰蛋白酶 一定浓度的细胞悬浮液细胞株
4.传代培养〔10~40、50代〕:到50代以后大局部细胞不能再传递下去了〔局部遗传物质_______且有_______特性,有可能在培养条件下无限制地传代下去的细胞叫做_______〕。
答案:改变 癌变 细胞系
5.动物组织培养可以用在有重要价值的蛋白质生物制品的生产,如烧伤病人的_______、有毒物质的检测等。
答案:皮肤移植
6.动物细胞融合与植物细胞原生质体融合的根本原理是相同的,诱导融合的方法类似,动物细胞的融合还常常采用_______作为诱导剂。
答案:灭活的病毒
7.单克隆抗体的制备:效应B淋巴细胞〔能产生特定的_______〕和_______细胞〔能大量_______〕在_______诱导下融合,得到的_______细胞可产生化学性质_______、特异性强的抗体。在单抗上连接抗癌药物制成“_______〞,可杀灭癌细胞。
答案:抗体 骨髓瘤 增殖 灭活的仙台病毒 杂交瘤 单一 生物导弹
8.单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,优点是_____________________。现在国外已有多种单克隆抗体实现商品化,制成_____________。
答案:特异性强,灵敏度高,优越性非常明显 单抗诊断盒
探究归纳
要点1 植物细胞工程
【例1】 新课标渗透
在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,以下哪一项条件是不需要的( )
解析:解答此题需要注意以下三点:
〔1〕由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织的过程要进行细胞的增殖和细胞的脱分化,这就必须要有适宜的养料和激素以及适宜的温度,才能保证细胞进行正常的新陈代谢。
〔2〕由离体的植物器官、组织形成愈伤组织必须是在无菌条件下,才能保证培养产生出的细胞是正常的细胞。
〔3〕由于此阶段形成的是愈伤组织,并没有形成具有根、茎、叶的植物体,因此不需要光照。
答案:C
归纳与迁移
植物细胞工程
〔1〕理论根底:植物细胞的全能性(含有发育成完整个体所需要的全部基因)。
〔2〕分化:基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。
〔3〕脱分化的条件:离体,一定的营养物质,激素及其他外界条件(如无菌、适宜的温度等)。
〔4〕植物细胞脱分化、再分化的关键因素。
影响脱分化的一个重要因素是植物激素。当细胞分裂素与生长素共同使用时,能强烈促进愈伤组织的形成,而两者不同的浓度配比在再分化过程中,分别对诱导根或芽的产生起关键作用。当细胞分裂素与生长素浓度比高时,有利于芽的发生;浓度比低时,有利于根的发生。
〔5〕植物体细胞杂交
①过程:
图2-5-1
②意义:克服远源杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。
要点2 细胞培养
【例2】 动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于( )
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能大量培养,而植物细胞只能培养成植株
解析:动物细胞培养所用的培养基不同于植物细胞培养所用的培养基,它是液体培养基,其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
答案:A
归纳与迁移
细胞培养
〔1〕植物细胞培养:植物细胞、组织培养要想获得成功,必须有效地防止细菌等的污染,保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。因为如果在培养基上有细菌等微小的生物存在,它们比植物细胞有更强的新陈代谢能力,它们比植物细胞生长、繁殖更快;而且它们会产生毒素,使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。
〔2〕动物细胞培养:除了也要求无菌操作外,首先要明确目的:获得有价值的蛋白质制品,检测有毒物质,医药研究等。其次应了解过程:①别离细胞;②原代培养;③传代培养。
在培养过程中要明确动物细胞所用的培养基的成分是不同的。动物细胞培养液中通常用含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
〔3〕植物组织培养和动物细胞培养的比拟
比拟工程
原理
培养基
结果
培养目的
植物组织培养
细胞的全能性
固体;营养物质,激素
培育成植株
快速繁殖,培育无病毒植株等
动物细胞培养
细胞的增殖
液体;营养物质,动物血清等
培育成细胞系或细胞株
获得细胞的产物或细胞等
要点3 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比拟
【例3】 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比拟中,正确的选项是〔 〕
解析:动物细胞融合和植物体细胞杂交这两项细胞工程技术中,都包含有细胞融合的过程。这个融合作用的技术根本上是相同的。对于诱导方法来说,除动物细胞的融合还常用灭活的病毒做诱导剂外,其他是根本相同的。但是,植物体细胞杂交在完成细胞融合后,还要将杂种细胞培育成植株,所以,他们所应用的技术手段是有差异的。至于所采用的原理,植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性,而动物细胞融合的原理只是细胞膜的流动性。
答案:D
归纳与迁移
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比拟
比拟工程
融合原理
融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性
去掉细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇等
克服远源杂交不亲和,获得杂种植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后诱导细胞融合
离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇、灭活的病毒诱导
制备单克隆抗体的技术之一
要点4 单克隆抗体的制备
【例4】 〔经典回放〕将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体,其依据是( )
A.B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖
C.骨髓瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体
D.骨髓瘤细胞可以产生抗体,但不能无限增殖
解析:B选项中的B淋巴细胞无论是否与骨髓瘤细胞融合都产生抗体,因此是错误的,D选项骨髓瘤细胞不能产生抗体,但可以无限增殖,因此是错误的。
答案:AC
归纳与迁移
1.概念:单个B淋巴细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆,形成细胞群,这样的细胞群就有可能产出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。
2.过程:在制备单克隆抗体时,科学家将抗原注射到小鼠体内,然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合,因为融合的细胞有三种类型,可能是效应B淋巴细胞融合,也可能是骨髓瘤细胞融合,也可能是效应B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,所以要在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞〔筛选方法:效应B淋巴细胞融合的细胞无需在意,因为效应B细胞不能增殖,会自然死亡。关键是如何区分骨髓瘤细胞融合体和杂交瘤细胞,一般是参加抑制骨髓瘤细胞复制的物质,使其停留在分裂间期〕。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质,因此,它不仅具有B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力,还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下所需抗体的细胞群,继续培养,以获得足够数量的细胞,在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。这样,从细胞培养液或小鼠的腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体。
3.优点:特异性强、灵敏度高。
4.应用:①临床诊断;②单克隆抗体还可以作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹〞治疗肿瘤。
汗老师讲方法
要明确植物体细胞杂交的开始和结束。植物体细胞杂交是用两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并且把杂种细胞培育成新植株的方法。从这句话可以看出,植物体细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成新的植物体结束。
明白克隆的含义。克隆可以分为广义和狭义,广义的克隆指所有的无性繁殖,包括分裂生殖、出芽生殖、孢子生殖、营养生殖、植物的组织培养;从细胞层面分析由局部细胞形成细胞团、某一器官也属于克隆;从DNA层面分析,DNA的扩增也属于克隆。狭义的克隆指动物通过核移植由重组细胞发育成新个体的过程。
进一步深入理解植物体细胞杂交。植物体细胞杂交是在原生质培养技术的根底上,借用动物细胞融合方法开展起来的一门新型生物技术。植物体细胞杂交的过程包括原生质体的制备,原生质体融合的诱导,杂种细胞的筛选和培养,以及杂种植株的再生与鉴定等环节。下面以烟草和大豆的体细胞杂交为例,简要介绍植物体细胞杂交的过程。
原生质体制备。选取烟草植株上的幼嫩叶片和培养好的大豆细胞,用酶解法制备原生质体。该原生质体在显微镜下观察,烟草的呈绿色,大豆的无色,很容易区别开来。
原生质体融合。取等量烟草和大豆的原生质体混合后,参加聚乙二醇溶液。在显微镜下观察,可以看到原生质相互粘集在一起。隔一段时间后,参加高钙、高pH的溶液,这时原生质体才开始融合。原生质体融合包括膜融合和核融合两个过程。诱导融合只能诱导细胞膜的融合,两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的。
杂交细胞的筛选和培养。烟草与大豆的原生质体融合后,将原生质体转移到适当的培养基上培养,使原生质体再生出细胞壁。这时,在细胞混合物中,不