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篮子
呼吸
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目的和意义目的和意义 呼吸作用是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。有氧呼吸的方程式:C6H12O6+6O2 6CO2+6H2O 测定CO2 释放量的方法:滴定法、红外线CO2分析仪法 测定 O2吸收量的方法:氧电极法 小篮子法测定呼吸速率的原理小篮子法测定呼吸速率的原理 在广口瓶中,放入一定量的Ba(OH)2溶液,用其吸收植物材料呼吸过程中释放的CO2。然后用草酸溶液滴定剩余碱量,由空白和样品二者消耗草酸溶液之差,计算出呼吸过程中释放的CO2量。反应如下:Ba(OH)2+CO2 BaCO3H2O (1)Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 BaC2O42H2O(2)实验材料:实验材料:萌发的小麦和大麦种子 主要实验仪器:主要实验仪器:1、广口瓶测呼吸装置:、广口瓶测呼吸装置:广口瓶一只,加一只三孔橡皮塞,一孔插入装有碱石灰的漏斗,漏斗口塞棉花,将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上,能吸收进入瓶中的CO2,另一小孔供滴定用,平时用一小橡皮塞塞紧;第三孔插入温度计,记录测定时的温度。瓶盖下面装一小钩,以悬挂小筐,供装植物材料用。2.酸式滴定管:装草酸酸式滴定管:装草酸 四、试剂四、试剂 Ba(OH)2溶液 1/44 mol/L草酸溶液:每ml溶液相当于1mg的CO2 0.05 mol/L-1Ba(OH)2溶液(密封保存),溶液配好后先过滤到试剂瓶中,塞紧试剂瓶,尽量减少溶液曝露在空气中的时间,以减少BaCO3 沉淀的产生 酚酞指示剂:1g 酚酞溶于100 ml 95%乙醇中 五、实验步骤五、实验步骤 1、空白滴定:、空白滴定:通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml,加入2滴酚酞试剂。塞紧小橡皮塞,摇动广口瓶几分钟,使瓶内CO2 充分吸收。待瓶内CO2吸收后,拔出小橡皮塞,把酸式滴定管插入小孔中,用草酸滴定,至红色刚刚消失为止。记下草酸溶液用量的毫升数,即为空白滴定值。2 2、准备植物材料:、准备植物材料:取待测小麦或大麦种子8 g(约100粒),在天平上称出重量,装在小篮中。3、正式滴定:、正式滴定:3.1 萌发的种子 倒出废液,用蒸馏水洗凈广口瓶,重加20 ml Ba(OH)2溶液于瓶内,将装有待测种子的小篮迅速挂在小钩上,塞紧瓶塞。3.2 煮熟的种子 方法同上。开始记录时间,30分钟后,小心打开瓶塞,迅速取出小篮,立即重新盖紧瓶塞,充分摇动2分钟,使瓶内CO2的完全被吸收,从滴定孔中滴入2滴酚酞。其余操作如前,记下草酸用量,即为样品滴定值。六、计算呼吸速率六、计算呼吸速率 (空白滴定值-样品滴定值)mg CO2 呼吸速率=植物组织鲜重 时间 呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2)g-1 FW h-1,mg CO2 ml-1草酸1 七、注意事项七、注意事项 操作时勿使口中呼出的气体进入瓶中。测定期间轻轻地摇动广口瓶,破坏溶液表面的BaCO3薄膜,以利CO2的吸收。将滴定管轻轻插入橡皮塞中,摇动广口瓶时握住滴定管,以免折断滴定管。