2023年分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析 肉制品中亚硝酸盐含量的测定.docx

天道酬勤 分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析 肉制品中亚硝酸盐含量的测定 　　[]目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。结果：检出限其检测限为3.68x10-3g/ml。结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析工程之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。 　　[关键词]分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析 　　[中图分类号]R155.5　[文献标识码]B　[文章编号]1674-4721(2023)01(b)－116-02 　　亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重成效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供平安食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析工程之一。 　　目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。利用重氮化反响测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化复原光度法也因干扰因素较多不常被使用。为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下： 　　1　材料与方法 　　1.1　材料 　　试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。试验药品均为分析纯。 　　1.2　方法 　　1.2.1　样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。此溶液经标定后，配制成0，500 0 z／L储藏液。用时逐级稀释至所需浓度rq。②样品溶液的制备：称取已绞碎混合均匀的肉制样品5 s，置500 ml烧杯中，加硼砂饱和溶液12，5 ml，搅拌均匀，用70~C的蒸馏水150 nd将其冲人250 1d容量瓶中，置沸水浴中加热15 min。取出后冷至室温，然后一边转动，一边滴加亚铁一氰化钾溶液5，0 ml摇匀，再参加乙酸锌溶液5，0 m1，加水至刻度摇匀以沉淀蛋白质，放置半小时，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30 rnlt~，收集滤液作分析测定备用r4)。 　　1.2.2　含量测定取两支比色管25 Id，分别参加1，0 mol／L磷酸2，50 ld，1 mol／L氯酸钠溶液5，00 ml，并用蒸馏水稀释至10 m1，向其中一支比色管中参加0，1 mol／L依文思蓝溶液3 1d，另一支那么参加一定量的标准溶液，摇匀并立即人恒温水浴中加热，待取出后迅速用流水冷却rq。在598 nm处，用2 cm比色皿，以水为参比，分别测量试剂空白吸光度A。和试样吸光度A，并求出相应的AA=A。-A和ls(A。／A)的值。 　　2　结果 　　结果说明，亚硝酸钠浓度在0--40~g／50ml范围内遵守比耳定律。标准曲线的相关系数为0，999 5。1 mol／L磷酸用量在1，00-3，00 ml之间吸光度波动较小。测定波长为598 llm、比色池2 0121，检出限其检测限为：3，68xl旷矽m1。 　　亚硝酸盐对人的中毒量为0，3~0，5 s，致死量为3，0 s。联合国公布的ADI值即“每日允许摄取量〞亚硝酸钠为0―0，2 m旷吨(体重)，亚硝酸钠在午餐肉中的最大使用量为125 mg(添加剂)／kg(制品)。我国政府对亚硝酸盐的监测十分重视，在环保监测、海水养殖、食品加工等领域中，亚硝酸盐是例行检测工程。 　　3　讨论 　　3.1　波长的选择 　　准确吸取一定量亚硝酸钠标准液于50真d棕色容量瓶中，按试验方法显色并于WFZ800-D分光光度计下作波长扫描，测定依文思蓝溶液(0，1 mol刀L)在不同波长下的吸光度，绘制成曲线。结果在598／lm处其有最大吸收，选�定波长为598nm。 　　3.2　标准曲线 　　按试验方法进行操作，结果说明，亚硝酸钠浓度在。一40~v，／50 ml范围内遵守比耳定律。标准曲线的相关系数为0，999 5，摩尔吸光系数E598=1，31x1(P U(m01，cm)。 　　3.3　试验条件选择 　　3.3.1　介质酸度对反响体系的影响：试验结果说明，1 mol／L磷酸用量在1.00-3.00 ml之间吸光度波动较小，AA值较大且稳定，故本法选用l mol／L磷酸作亚硝化反响的酸度介质。 　　3.3.2　反响温度和时间的影响：按上述最正确试剂用量，进行反响。试验结果说明，反响温度为75"E时，lg(A。／A)到达最大值，且反响在5min内已趋完成，以后2h吸光度根本恒定。在75℃下，反响速度随反响时间的增加而增大，超过反而减慢。 　　3.3.3　共存离子的影响：按试验方法，在40弘s亚硝酸钠存在的条件下，当相对误差为i3％时，2 500倍的Ni-h+、Cl一、Nax、SO广，625倍的M广、As5x，500倍的C户、A产、pb2+和250倍的NOf不干扰测定o。常见离子Cab、Alx允许量较小。可用EDTA消除经试验参加0，1 mol／L EDTA溶液0，1 ml对吸光度无影响。 　　3.4　线性范围和检出限 　　重复进行10次试剂空白的测定，s=O，014 1，其检测限为：3，68x10-3 g／ml。在最正确试验条件下，参加不同量的NOr标准溶液，分别测定吸光度。线性范围为0~3，2 txg／25 ml。 　　3.5　灵敏度 　　由工作曲线斜率得到，每10〞c的NAN02产生的吸光度为0，688，其表观摩尔吸光系数为0，688x69，0x50／1，0x10―6)