人毛发ABO血型检测　解离法 GA 655-2006.pdf

GA655-20065操作方法5.1取待检毛发，用洗涤剂清洗，然后用无水乙醇浸泡20min30min脱水，无水乙醚浸泡10min脱脂。5.2用压毛机（也可用其他方法）将毛发压扁，使其暴露出毛发髓质，压后其直径约为压前的3倍4倍。5.3用洁净的眼科剪剪取压好的毛发两段，每段约0.4cm,分别置于凹玻板对应的上下两凹内，并分别标记A与B。5.4按标记，分别在两凹内滴加相应的标准抗A、标准抗B抗体试剂各1滴2滴，使毛发完全浸在抗体试剂中。将凹玻板置于保湿盒内，在负压760mmHg下，吸收20mi,取出保湿盒，将其置于4C冰箱中，吸收3h4h或吸收过夜。5.5取出毛发后，用滤纸轻轻吸去标准A、B血清液体，然后将毛发分别置于另一冷的凹玻板上下两凹内，用冷生理盐水洗涤4次6次，最后，用吸管将洗涤用生理盐水液吸去，用洁净的眼科摄将毛发分别置于载玻片两端，并分别标记A与B。5.6在A、B两段的毛发上，分别滴加4.1b)中相应的指示红细胞悬液1滴，分别加盖玻片，并置56C恒温箱中5minl0min。5.7从恒温箱中取出并置于室温保湿盒内，10min20min后，取出载玻片，显微镜下观察凝集情况，记录凝集情况，结果判定。6结果判定结果判定见表1。表1解离法检测人毛发ABO血型结果判定毛发检材编号A朗I3侧结果判定()2A3B4+AB7注意事项7,1检验的同时应取已知血型的毛发检材做对照，并只有当已知对照毛发结果正确时，样木的检验结果才能采信。7.2指示红细胞应新鲜配置，并在显微镜下检查有无自凝集现象，隔天使用应进行洗涤。另外，指示细胞为同型多人份混合血液制备的较好。7.3抗体的效价不应低于1：128倍。7.4毛发压扁的程度，以暴露髓质而又不使毛十分离为宜。7.5抗体吸收时间不应少于3h4h。7.6若无条件负压吸收，则应放于4C冰箱，适当延长吸收时间，使之充分吸收。7,7吸收后的洗涤次数应根据洗涤的手法、轻重而相应调整。7.8加盖玻片时，应避免出现气泡。7.9在判断结果时，除了应考虑阳性和阴性对照外，还要注意A、B抗原性的不均衡性，有时需要适当调高标准抗A抗体试剂效价。GA655-2006附录A(规范性附录)指示红细胞配制A,1配制材料a)新鲜A型、B型人红细胞；b)生理盐水；c)离心机、离心管、吸管；d)加样器、加样器吸头；e)记号笔。A.2操作步骤A.2.1在3个10mL离心管上分别标记上A型、B型字样，并分别加人5mL8mL生理盐水，然后分别加人约0.5mL新鲜A型、B型、()型人红细胞。A.2.2将以上3个离心管离心，800r/min1000r/min,5min。A2.3轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色淡红，则要重复A.2.1和A.2.2步骤，直至其颜色为无色透明。A2.4用生理盐水将A,2.3洗涤后的红细胞分别配成G.%A型、B型红细胞悬液。