膀胱癌细胞相关染色体及基因异常检测试剂盒(荧光原位杂交法) YYT 1224-2014.pdf

YY/T1224-2014前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准中国家食品药品监督管理总局提出。本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会(SAC/T136)归口。本标准起草单位：中国食品药品检定研究院。本标准主要起草人：黄颖、沈舒、张春涛、高尚先。YY/T1224-2014膀胱癌细胞相关染色体及基因异常检测试剂盒（荧光原位杂交法）1范围本标准规定了膀胱癌细胞相关染色体及基因异常检测试剂盒（荧光原位杂交法）的定义、组成、要求、试验方法、标识、标签、使用说明书、包装、运输和贮存。本标准适用于中CSP3,CSP7、CSP17、GLP9相应位点4种荧光原位杂交探针和复染剂组成，通过检测样本（通常是尿液脱落细胞涂片）上3号、7号、17号染色体非整倍体增加和9号染色体P16基因位点缺失，从而辅助诊断膀胱癌的试剂盒。本标准不适用于：)以免疫组织化学染色诊断方法为基本原理，用于膀胱癌辅助诊断的试剂盒：b)以酶联免疫吸附分析等标记免疫分析为基本原理，用于膀胱癌辅助诊断的试剂盒。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1荧光原位杂交法fluorescent in situ hybridization;FSH根据碱基互补配对的原则，在与目标DNA配对的核酸片断（探针）上标记荧光染料，该探针与待检材料中相应的核酸片断在一定条件下特异结合（杂交），形成双链核酸，件助于荧光显微镜观察并记录形成杂交双链的类型、数量，从而判断待检样本中目标DNA正常与否的检测方法。3.2膀胱癌细胞相关染色体及基因异常检测试剂盒（荧光原位杂交法）detection kit for analysis ofrelated chromosome and gene abnormalities in bladder cancer(fluorescent in situ hybridization)由CSP3、CSP7、CSP17和GLP9相应位点共4种荧光原位杂交探针（以下简称：探针）以及复染剂和其他辅助试剂组成，通过检测待检样本中3号、7号、17号染色体非整倍体增加和9号染色体P16基因位点缺失，用于膀胱癌辅助诊断的试剂盒（以下简称：试剂盒）。4要求4.1外观试剂盒外包装应完整，无破损，标示齐全，清楚：各液体试剂应标示清晰，无泄漏，颜色应符合制造商1YY/T1224-2014示1个特定的荧光信号。4.4探针有效性判断4.4.1总则在尿液脱落细胞涂片上进行。4.4.2阴性符合率检测4例（至少）非膀胱癌患者尿液脱落细胞涂片分析每例3号、7号、9号、17号染色体荧光信号数目，均应符合正常结果判断标准，判为阴性。注：制造商应根据各自产品特点，建立合理、有效的正常结果判断标准。4.4.3阳性符合率检测4例（至少）膀胱癌患者尿液脱落细胞涂片，分析每例3号、7号、9号、17号染色体荧光信号数目，应至少有3例符合异常结果判断标准，判为阳性。注：制造商应根据各自产品特点，建立合理、有效的异常结果判断标准。4.5稳定性4.5.1效期末稳定性试剂盒按照规定的条件保存至有效期末检验结果应符合4.1、4.2、4.3和4.4.2规定。4.5.2热稳定性试剂盒置37条件下保存7d.检验结里应符合4.1、4.2、4.3和4.4.2规定。注1：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。注2：根据产品特性可选择以上方法之一进行验证，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产品性能符合标准要求。5试验方法5.1外观目测检查，应符合4.1规定。5.2荧光信号强度探针在与外周血淋巴细胞（或其培养液细胞）或尿液脱落细胞（或其培养液细胞）杂交后，在配有相应滤片组的荧光显微镜(100倍物镜，10倍目镜)下观察，均应发出可被肉眼识别的荧光信号。5.3探针质量判断5.3.1探针敏感性探针与外周血（或其培养液）淋巴细胞涂片杂交后，镜下观察（条件同上，下同），分析50个中期分裂相细胞，结果应符合4.3.2.14.3.2.4规定。注：3号染色体为较大、中央着丝粒染色体：7号和9号染色体为中等大小，亚中央着丝粒染色体、7号染色体着丝粒略靠近中央，短臂相对较长，9号染色体着丝粒偏离中央，短臂相对较短，P16基因位于9号染色体短臂2区1带：17号染色体为较小，亚中央着丝粒染色体，短臂较短。3