微量青霉素试验方法 YYT 0251-1997.pdf

中华人民共和国医药行业标准微量青霉素试验方法YY/T 0251-1997Test methods of penicillin1范围本标准规定了用微生物法测定微量青霉素的试验方法。本标准适用于成品、清场后环境、设备及空气中微量青霉素的测定。最小检出量0.008u/mL。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。中华人民共和国药典1995年版二部3方法提要利用抗生素的抗菌性质及在琼脂培养基内的扩散渗透作，将被检物放入摊布高度敏感检定菌的培养基上，产生抑菌圈，根据抑菌圈直径判断青霉素污染，根据标准曲线或数学公式计算出污染青霉素的量。4试剂和溶液本试验所用试剂除特殊注明外均为分析纯，所用水均为蒸馏水。4.1青霉素标准品。4.2乙酸正戊酯。4.3培养基:中华人民共和国药典1995年版二部（或培养基1：美国药典XXI版）。4.4营养琼脂培养基：中华人民共和国药典1995年版二部。4.510g/L磷酸盐冲液：pH=6.0称取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g,加蒸馏水至1000mL,滤过，在115灭菌30min。4.6100g/L磷酸盐冲液：pH=2.5称取100g磷酸二氢钾，溶于800mL蒸馏水中，加0.2mL浓盐酸，再加蒸馏水至1000ml,用磷酸溶液c(H,PO4)=6mol/L调节pH值,使灭菌后pH为2.22.5,备用。4.710g/L磷酸盐液：pH=2.5将磷酸盐缓冲液(4.6)稀释10倍。4.8青霉素酶溶液用鲜肉汤将浓的青霉素酶溶液稀释到1000u/mL,37恒温培养5天，5以下冰箱保存备用。4.9磷酸溶液：c(H3POn)=6 mol/L取85%磷酸12.3mL加蒸馏水17.7mL。4.10检定菌液国家医药管理局1997-06-09批准1997-10-01实施1