医疗器械与血小板相互作用试验　第2部分：体外血小板激活产物(β-TG、PF4和TxB2)的测定 YYT 1649.2-2019.pdf

YY/T1649.2-20196试剂和材料6.1试剂6.1.1人3-TG、PF4和TxB2 ELISA试剂盒，应由有资质的供应商提供并经过验证。6.1.2新鲜健康抗凝人全血。注1：为了防止穿网时引起的血小板激活，采集的第一管血推荐弃之不用，建议采集的血液在4h之内使用。试验结束后按相关规定处理血液及血液接触后的物品。注2：为了排除溶血引起的干扰，可以考虑选择富血小板血浆(PP)进行试验，并对适宜性进行验证。6.2试验对照6.2.1阴性对照例如：高密度聚乙烯(HDPE)。6,22阳性对照（例如：胶原蛋白、凝血酶、壳聚糖、ADP等）。6.2.3空白对照（术接触材料的血液）。注1：一种材料或试剂往往并不能同时诱导所有颗粒蛋白产生阳性结果，因此各实验室可以根据实际情况选择适合的阳性对照。如胶原蛋白和凝血酶可能诱导PF4和Tx2的释放，壳聚糖及适当剂量的ADP可能诱导3TG的释放。本部分中的阴性对照和阳性对照仅为推荐，使用者对所选择试验对照的适用性进行确认后，可根据实验室实际情况选择适宜的对照。注2：如需要时，可选择已上市的同类医疗器械作为对照样品。7仪器和试验器具7.1酶标仪、恒温培养箱、水浴摇床、离心机和制冰机等。7.2带盖试管。如试管的材料是促血栓形灾的（如玻璃），则会对试验产生潜在的干扰。因此，推荐使用聚乙烯或聚丙烯材质试管。7.3血液采集管。含3.2%(0.109mol/L)枸橼酸钠或参照试剂盒要求选用合适的采血管。7,4移液管（非玻璃管）。8样品制备制备试验样品、阴性对照、阳性对照和对照样品（如选择），各平行3份。按GB/T16886.12的要求制备试验样品，将样品或材料剪成小块以保证血液能完全覆盖试验样品。空白对照同时平行制备3份。注：增加接触比例理论上会增加测试材料对血小板激活反应的敏感性，可采川其他接触比例如GB/T1688612推荐的接触比例的1.5倍或2.0倍。加以说明并阐述理由后.可采用其他模拟临床使用或能对潜在危害进行适当测定的比例。9试验步骤9.1抗凝人全血，颠倒混匀后室温保存备用。9,2将试验样品、阴性对照、阳性对照和对照样品（如选择）放入试管中，按比例在每支试管中加人全血。空白对照为术接触材料的血液。可选择在接触血液前，用相同比例的0.9%氯化钠注射液预湿每一试管中的材料，室温静置30s,加入血液前移除所有0.9%氯化钠注射液。每组平行3管。9.3所有试管在(37士1)的水浴中震荡孵育(60士5)min,适宜的转速为60r/min。9.4孵育1h后，每个试管中加入终浓度为5mmol/L的EDTA来终止反应。通常是在1.0mL的人2