SN∕T 5448-2022 出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物的测定 气相色谱-质谱_质谱法.pdf

I C S6 7.0 5 0C C SX 0 4中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 4 4 82 0 2 2 出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法D e t e r m i n a t i o n o f n i t r a p y r i n p e s t i c i d e a n d m e t a b o l i t e s r e s i d u e s i n f o o d s o f p l a n t o r i g i n f o r e x p o r t G a s c h r o m a t o g r a p h y-t a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y m e t h o d2 0 2 2-0 3-1 4发布2 0 2 2-1 0-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准前言请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本 文件按照 G B/T 1.12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国广州海关。本文件主要起草人:韩世鹤、陈捷、杨洋、孙灵慧、李立、庄嘉、何曼莉。S N/T5 4 4 82 0 2 2以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法1 范围 本文件规定了出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物6-氯吡啶-2-羧酸的气相色谱-质谱/质谱测定方法。本文件适用于小麦、高粱、大米、玉米、生菜、柑橘、甜玉米、开心果仁和爆谷中三氯甲基吡啶及其代谢物6-氯吡啶-2-羧酸的定性定量测定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B/T 6 6 8 2 分析实验用水规格和试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理 试样中的残留物采用酸性乙腈提取,Q u E C h E R S方法净化后经甲酯化衍生,气相色谱-质谱/质谱仪测定,基质匹配内标法定量。5 试剂和材料 所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为G B/T 6 6 8 22 0 0 8规定的一级水。5.1 乙腈:色谱纯。5.2 乙酸乙酯:色谱纯。5.3 甲醇:色谱纯。5.4 海砂:颗粒度0.5 mm1 mm。5.5 氯化钠。5.6 无水硫酸镁。5.7 无水硫酸钠:经6 5 0 烧灼4 h,在干燥器内冷却至室温后储于密封容器中备用。5.8 浓硫酸。5.9 甲酸。5.1 0 饱和氯化钠溶液:称取3 6 g氯化钠,溶于1 0 0 m L水中。5.1 1 2%硫酸钠溶液:称取2 g硫酸钠,溶于1 0 0 m L水中。1S N/T5 4 4 82 0 2 2以正式出版文本为准5.1 2 标准物质:5.1 2.1 三氯甲基吡啶(N i t r a p y r i n),C A S号1 9 2 9-8 2-4,分子式:C6H3C l4N,纯度大于或等于9 9%,6-氯吡啶-2-羧酸(6-C h l o r o-2-p y r i d i n e c a r b o x y l i c A c i d),C A S号4 6 8 4-9 4-0,分子式:C6H4C l NO2,纯度大于或等于9 9%。5.1 2.2 内标物:2-吡啶甲酸甲酯(M e t h y l p i c o l i n a t e),C A S号2 4 5 9-0 7-6,分子式:C7H7NO2,纯度大于或等于9 8%。5.1 3 空白基质溶液:用不含三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸残留的样品,除不加内标外,按照8.1、8.2和8.3中规定进行操作制备空白基质溶液。5.1 4 标准溶液5.1 4.1 标准储备液(1 0 0 0 m g/L):分别准确称取1 0 m g(精确到0.1 m g)三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸标准物质,用甲醇溶解并定容至1 0 m L,避光-1 8 冰箱内保存。5.1 4.2 中间标准储备液(4 0 m g/L):分别准确吸取适量标准储备液,用甲醇稀释配制成4 0 m g/L的中间标准储备液,避光-1 8 冰箱内保存。5.1 4.3 衍生混合标准使用液(2 0 m g/L):分别准确移取0.5 0 m L三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸(5.1 4.2)于具塞比色管中,除不加内标外,按照8.3步骤衍生,用空白基质液(5.1 3)定容至1.0 m L,此衍生混合标准浓度为2 0 m g/L,现用现配。5.1 5 内标溶液(1 0 m g/L):准确称取1 0 m g(精确至0.1 m g)2-吡啶甲酸甲酯,用乙酸乙酯溶解并至1 0 m L,混匀为内标储备液。内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至1 0 m g/L为内标溶液。5.1 6 材料5.1 6.1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(P S A):4 0m6 0m。5.1 6.2 十八烷基硅烷键合硅胶(C 1 8):4 0m6 0m。5.1 6.3 石墨化炭黑(G C B):4 0m1 2 0m。5.1 6.4 微孔滤膜:1 3 mm0.2 2 m,有机相。6 仪器和设备6.1 气相色谱-三重四极杆质谱联用仪:配有电子轰击源(E I)。6.2 分析天平:感量分别为0.0 0 0 1 g和0.0 1 g。6.3 离心机:转速不低于4 5 0 0 r/m i n。6.4 组织捣碎机。6.5 水平振荡器:振荡频次不低于4 0 0 r/m i n。6.6 旋涡混匀器。6.7 加热水浴摇床。6.8 氮吹仪:可控温。7 试样制备与保存7.1 试样的制备7.1.1 生菜、柑橘、甜玉米(鲜食玉米)、爆谷(爆米花)、开心果仁 取代表性样品约5 0 0 g,放入组织捣碎机中捣碎,装入聚乙烯瓶或袋中,密封并标明标记。7.1.2 小麦、高粱、大米、玉米(干)取代表性样品约5 0 0 g,粉碎后使其全部可通过4 2 5 m的标准网筛,放入聚乙烯瓶或袋中,密封并2S N/T5 4 4 82 0 2 2以正式出版文本为准标明标记。7.2 试样的保存 将试样按照测试和备用分别存放。于-1 8 条件下保存。在抽样及制样的操作过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。8 测定步骤8.1 提取8.1.1 生菜、柑橘、甜玉米(鲜食玉米)称取样品1 0 g(精确至0.0 1 g)至5 0 m L离心管中,加入1 0 m L乙腈、0.1 m L甲酸,涡旋1 m i n,于振荡器(震荡频次约3 0 0 r/m i n)震摇提取1 5 m i n,加入3 g氯化钠,再震摇5 m i n后,4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,取上清液4 m L,待净化。8.1.2 小麦、高粱、大米、玉米(干)、爆谷(爆米花)、开心果仁 称取样品5 g(精确至0.0 1 g)至5 0 m L离心管中,加入1 5 g海砂、5 m L水涡旋混匀,静置3 0 m i n,加入1 0 m L乙腈、0.1 m L甲酸,涡旋1 m i n,于振荡器震摇提取1 5 m i n,加入3 g氯化钠后再震摇5 m i n后,4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,取上清液4 m L,待净化。8.2 净化 将4 m L待净化样液加入到内含5 0 m g P S A,1 0 0 m g C 1 8,1 0 0 m g G C B,M g S O4 2 0 0 m g的1 0 m L塑料离心管中,涡旋混匀1 m i n,4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,准确吸取2 m L净化液于1 0 m L试管中,于4 0 水浴中氮气吹干后迅速加入1 m L甲醇震荡溶解残渣,待衍生。8.3 衍生 将1 m L待衍生液(8.2)置于冰水浴中,缓慢加入2 0 0 L浓硫酸,5 5 下衍生3 0 m i n,衍生溶液在5 0 水浴吹氮至近干,加5 m L饱和氯化钠溶液(5.1 0)振荡溶解,转移至5 0 m L离心管中;衍生试管再用5 m L乙酸乙酯进行洗涤后倒入同一离心管中振荡提取3 m i n,于4 5 0 0 r/m i n离心5 m i n,取上清液置于干净的5 0 m L另一离心管中,用乙酸乙酯再重复提取两次,每次加乙酸乙酯3 m L,合并提取液后用2 m L 2%硫酸钠溶液洗涤,静置分层。取乙酸乙酯层过装有无水硫酸钠的漏斗,收集全部滤液。在4 0 2 下氮吹浓缩至约1 m L,转移至2 m L刻度试管,加入4 0 L内标溶液(5.1 5)(相当于2-吡啶甲酸甲酯4 0 0 n g),用乙酸乙酯溶解并定容至2 m L,过0.2 m微孔滤膜,待G C-M S/M S分析。8.4 测定8.4.1 仪器参考条件8.4.1.1 色谱柱:3 5%-苯基-聚硅氧烷石英毛细管柱;3 0 m0.2 5 mm0.2 5 m,或相当者。8.4.1.2 升温程序:7 0 保持1.5 m i n,然后以2 0/m i n程序升温至1 8 0,再以5/m i n升温至2 1 0,再以2 5/m i n升温至2 8 0,保持5 m i n。8.4.1.3 载气:氦气,纯度9 9.9 9 9%,流速1.2 m L/m i n。8.4.1.4 进样口温度:2 5 0。8.4.1.5 进样量:1 L。3S N/T5 4 4 82 0 2 2以正式出版文本为准8.4.1.6 进样方式:不分流进样,2 m i n后开阀。8.4.1.7 电子轰击源:7 0 e V。8.4.1.8 离子源温度:2 3 0。8.4.1.9 传输线温度:2 8 0。8.4.1.1 0 溶剂延迟:3 m i n。8.4.1.1 1 多反应监测:保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞能量,参见附录A。8.4.2 标准工作曲线 精确吸取一定量的衍生混合标准溶液(5.1 4.3)及内标溶液(5.1 5),用过滤后的空白基质溶液(5.1 3)稀 释 配 制 成 终 浓 度 为0.0 m g/L、0.0 2 5 m g/L、0.0 5 0 m g/L、0.1 0 m g/L、0.2 0 m g/L和0.4 0 m g/L的标准工作溶液,标准工作液中内标浓度为0.2 0 m g/L,供气相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量离子峰面积和内标物定量离子峰面积的比值为纵坐标,农药标准溶液质量浓度和内标物浓度的比值为横坐标,绘制标准曲线。8.4.3 气相色谱-质谱/质谱测定8.4.3.1 定性测定 按照上述条件测定样品和基质混合标准工作溶液,如果待测物质的色谱峰保留时间与基质标准工作液的保留时间偏差在0.5%之内;定性离子对的相对丰度与浓度相近的基质标准工作液的相对丰度一致,偏差不超过表1规定的范围,则可判定为样品中存在对应的待测物。表1 定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%5 02 05 01 02 01 0允许相对偏差/%2 02 53 05 08.4.3.2 定量测定 本方法中采用内标校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响,定量用标准曲线应采用基质标准工作溶液绘制的标准曲线,并且保证所测样品中待测物的响应值均在线性范围以内。在上述色谱条件下三氯甲基吡啶、6-氯吡啶-2-羧酸的参考保留时间分别约为7.3 2 m i n、7.9 7 m i n。基质标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图参见图B.1。8.5 空白试验 除不称取试样外,均按上述步骤进行。9 结果计算与表述 用气相色谱数据处理软件或按照式(1)计算试样中三氯甲基吡啶或6-氯吡啶-2-羧酸的含量:X=AciV1 0 0 0Asm1 0 0 0(1)式中:X 试样中待测化合物的含量,单位为毫克每千克(m g/k g);A 样液中待测化合物峰面积与