SN∕T 5446-2022 出口植物源性食品中喹啉铜残留量的测定 液相色谱-质谱_质谱法.pdf

I C S6 7.0 5 0C C SC 5 3中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 4 4 62 0 2 2 出口植物源性食品中喹啉铜残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法D e t e r m i n a t i o n o f r e s i d u e o f o x i n e c o p p e r i n p l a n t-o r i g i n f o o d s t u f f s f o r e x p o r tL C-M S/M S m e t h o d2 0 2 2-0 3-1 4发布2 0 2 2-1 0-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布前 言本文件按照G B/T 1.12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国广州海关、中华人民共和国黄埔海关。本文件主要起草人:徐娟、谢守新、邵琳智、李敏青、孙灵慧、庄嘉。S N/T5 4 4 62 0 2 2出口植物源性食品中喹啉铜残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法1 范围本文件规定了出口植物源性食品中喹啉铜残留量的液相色谱-质谱/质谱测定和确证方法。本文件适用于番茄、梨、苹果、黄瓜、柿子和山核桃中喹啉铜残留量的测定和确证。2 规范性文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B 2 7 6 3 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法3 术语与定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法提要 采用1%乙酸超声提取试样中的喹啉铜,以N-丙基乙二胺固相吸附剂(P S A)和C 1 8粉末净化,稀释、过滤后供液相色谱-质谱/质谱测定和确证,外标法定量。5 试剂和材料除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为G B/T 6 6 8 2 规定的一级水。5.1 乙腈:色谱纯。5.2 甲醇:色谱纯。5.3 乙酸:色谱纯。5.4 甲酸:色谱纯。5.5 0.2 5%甲酸溶液:量取2.5 m L甲酸(5.4),用水定容至1 L。5.6 1%乙酸溶液:量取1 0 m L乙酸(5.3),用水定容至1 L。5.7 喹啉铜标准物质(O x i n e C o p p e r):C1 8H1 2C u N2O2,C A S 号1 0 3 8 0-2 8-6,纯度9 9.0%。5.8 喹啉铜标准储备液:准确称取喹啉铜标准品1 0 m g(精确到0.1 m g)于1 0 0 m L容量瓶中,用甲醇(5.2)溶解并定容至刻度,配制成浓度为0.1 m g/m L的标准储备液,于-1 8 以下避光保存,有效期6个月。5.9 喹啉铜标准溶液:准确吸取喹啉铜标准储备液1 m L于1 0 0 m L容量瓶中,用甲醇(5.2)定容至刻度,此标准溶液1 m L相当于1 g喹啉铜标准品,于 0 4 冰箱内储存,有效期3周。1S N/T5 4 4 62 0 2 25.1 0 喹啉铜标准曲线:吸取适量的上述标准溶液(5.9),用空白样品基质配制成喹啉铜浓度分别为0 m g/L、0.0 1 m g/L、0.0 5 m g/L、0.1 m g/L、0.2 m g/L、0.4 m g/L的系列标准曲线,现用现配。5.1 1 微孔滤膜:0.2 2 m,有机型。6 仪器和设备6.1 液相色谱-质谱/质谱仪,配电喷雾离子源(E S I)。6.2 电子天平:感量为 0.0 0 0 1 g 和 0.0 1 g。6.3 组织捣碎机。6.4 离心机:4 0 0 0 r/m i n,1 2 0 0 0 r/m i n。6.5 超声波清洗器。6.6 涡旋混合器。7 试样制备与保存7.1 蔬菜和水果 蔬菜和水果的取样部位按照 G B 2 7 6 3 的规定执行,取样品 5 0 0 g,用组织捣碎机均质,充分混匀,均分为 2 份,密封并标明标记,于-1 8 条件下保存。7.2 坚果 坚果样品去壳取全果 5 0 0 g,用组织捣碎机均质,充分混匀,均分为 2 份,密封并标明标记,于 0 -4 条件下保存。8 测定步骤8.1 提取 称取约5 g试样(精确至0.0 1 g)于5 0 m L具塞离心管中,加入1 0 m L 1%乙酸(5.6),超声1 5 m i n,4 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,收集提取液于2 5 m L塑料容量瓶中;再加入1 0 m L上述提取液,再次超声提取 1 5 m i n后,以4 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,合并上清液并以1%乙酸定容至2 5 m L。8.2 净化 取1 m L提取液加入装有P S A粉末5 0 m g和C 1 8粉末5 0 m g的高速离心管里,涡旋1 m i n后以1 2 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,取0.5 m L净化后的提取液与0.5 m L 0.2 5%甲酸(5.5)混合均匀,经0.2 2 m微孔膜过滤后装瓶,供L C-M S/M S测定。8.3 测定8.3.1 液相色谱条件8.3.1.1 色谱柱:O D S-4色谱柱,1 5 0 mm2.1 mm(内径),粒径 3 m 或相当者。8.3.1.2 柱温:4 0。8.3.1.3 流动相:乙腈(5.1)-0.2 5%甲酸溶液(5.5),梯度见表1。2S N/T5 4 4 62 0 2 2表1 流动相梯度洗脱程序时间/m i n流速/(m L/m i n)0.2 5%甲酸/%乙腈/%0.0 00.29 555.0 00.27 03 05.0 10.29 551 0.0 00.29 558.3.1.4 流速:0.2 m L/m i n。8.3.1.5 进样量:5 L。8.3.2 质谱条件 8.3.2.1 离子源:电喷雾离子源。8.3.2.2 扫描方式:正离子扫描。8.3.2.3 检测方式:多反应监测模式(MRM)。8.3.2.4 监测离子对、定量离子对见表 2。表2 喹啉铜的监测离子对和定量离子对被测物监测离子对/(m/z)定量离子对/(m/z)喹啉铜1 4 6.0 7/7 5.0 51 4 6.0 7/9 1.0 01 4 6.0 7/1 1 8.0 51 4 6.0 7/1 1 8.0 58.3.2.5 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体,使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求,喷雾电压、去簇电压、碰撞气能量等参数值应优化至最佳灵敏度,其他参考质谱参数参见附录 A。8.3.3 液相色谱-质谱/质谱检测和确证8.3.3.1 定性测定 按照液相色谱-质谱/质谱条件测定试样和标准工作液,试样中目标化合物的保留时间与标准工作液中对应化合物的保留时间偏差在 2.5%之内;定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作液的相对丰度一致,相对丰度偏差不超过表3的规定,且每个离子的信噪比均3,则可判断试样中存在相应的被测物。表3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%5 02 05 0(含)1 02 0(含)1 0允许的相对偏差/%2 02 53 05 08.3.3.2 定量测定 将标准工作液和试样溶液依次注入液相色谱-质谱/质谱仪中,测得定量离子峰面积。标准工作液和待测液中,喹啉铜的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内。在上述仪器条件下,喹啉铜的提取离3S N/T5 4 4 62 0 2 2子色谱图参见附录 B。8.4 空白试验除不加试样外,均按上述测定条件和步骤进行。9 结果计算和表述 试样中喹啉铜的含量由液相色谱-质谱/质谱仪的数据处理软件或按式(1)计算,计算结果应扣除空白值。X=CV1 0 0 0m1 0 0 0(1)式中:X 试样中被测组分含量,单位为毫克每千克(m g/k g);C 从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度,单位为毫克每升(m g/L);V 试样溶液定容体积,单位为毫升(m L);m 最终定容体积试样溶液所代表试样的质量,单位为克(g)。注:当浓度小于1 m g/k g,结果保留 2 位有效数字;当浓度大于1 m g/k g,结果保留 3 位有效数字。1 0 定量限与回收率1 0.1 定量限 喹啉铜的定量限为0.1 m g/k g。1 0.2 回收率 番茄、苹果、梨、黄瓜、柿子和山核桃中喹啉铜的添加水平及回收率数据参见附录C。4S N/T5 4 4 62 0 2 2附 录 A(资料性)质谱仪器参考条件1)参考质谱条件a)扫描方式:E S I+;b)检测方式:多反应监测(MRM);c)电喷雾电压(V):3 5 0 0 V;d)鞘气(S h e a t h G a s):6 L/m i n;e)辅助气(A u x G a s):8 L/m i n;f)吹扫气(S w e e p G a s):1 L/m i n;g)离子源温度(T EM):3 5 0;h)传输管温度(T EM):3 5 0;i)监测离子对、定量离子对、碰撞能量见表A.1。1)非商业性声明:附录A所列参考质谱条件是在T h e r m o Q u a n t i v a液相色谱-质谱/质谱仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅为提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。表A.1 喹啉铜的监测离子对和定量离子对化合物母离子/(m/z)子离子/(m/z)碰撞能量/e V喹啉铜1 4 6.0 77 5.0 54 4.2 89 1.0 03 0.0 01 1 8.0 5*2 2.2 8 *表示定量离子对。5S N/T5 4 4 62 0 2 2附 录 B(资料性)标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图图B.1 标准溶液(0.0 1 m g/L)色谱图6S N/T5 4 4 62 0 2 2附 录 C(资料性)添加水平及回收率数据表C.1 喹啉铜在典型基质中的添加水平及其回收率化合物基质添加浓度/(m g/k g)回收率范围/%相对标准偏差/%喹啉铜番茄梨子苹果青瓜柿子山核桃0.1 0 08 0.29 5.15.6 31.0 08 9.21 0 98.4 62.0 08 2.51 1 21 0.84.0 09 1.09 8.83.4 20.1 0 09 0.41 1 51 0.51.0 08 5.49 3.53.7 22.0 08 0.59 9.07.7 44.0 08 5.09 8.85.4 90.1 0 08 3.79 1.13.1 41.0 08 6.01 0 36.9 92.0 08 3.09 3.54.2 04.0 09 0.51 0 03.2 70.1 0 08 5.19 9.55.4 21.0 08 2.89 5.55.9 12.0 08 3.09 3.04.5 04.0 08 3.09 0.03.9 00.1 0 08 3.31 0 91 2.11.0 08 4.69 2.32.9 02.0 08 2.59 9.07.9 64.0 08 1.38 6.32.6 50.1 0 08 7.11 0 88.5 21.0 08 1.49 2.92.9 02.0 08 0.51 0 77.9 64.0 08 5.39 3.82.6 57S N/T5 4 4 62 0 2 222026445 T/NS中华人民共和国出入境检验检疫行 业 标 准出口植物源性食品中喹啉铜残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法S N/T 5 4 4 62 0 2 2*中国海关出版社有限公司出版发行北京市朝阳区东四环南路甲1号(1 0 0 0 2 3)编辑部:(0 1 0)6 5 1 9 4 2 4 2-7 5 3 0网址 w ww.c u s t o m s k b.c o m/b o o k中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本8 8 01 2 3 0 1/1 6 印张0.7 5 字数1 9千字2 0 2 2年9月第一版 2 0 2 2年9月第一次印刷