化妆品中10种糖皮质激素的液质检测方法_梁静文.pdf

第 卷第 期 年 月广 州 化 工 .化妆品中 种糖皮质激素的液质检测方法梁静文（广东省药品检验所，广东 广州）摘 要：样品经乙腈超声提取，过滤，色谱柱（.，.），以乙腈水为流动相，流速：.，柱温：，梯度洗脱，在多反应监测（）模式下进行定性定量分析。该方法平均回收率为.，相对标准偏差为.（）。方法检出限为.。在 线性范围内，相关系数大于.。本方法专属性强，灵敏度高，适用于水剂、膏霜类化妆品中的 种糖皮质激素的检测分析。关键词：化妆品；液质检测；糖皮质激素中图分类号：文献标志码：文章编号：（）作者简介：梁静文（），女，本科，主管药师，主要研究方向为药物及化妆品分析技术。（，）：（:），.（.，.），.，.，.（）.，.，.：；糖皮质激素是具有环戊烷多氢菲核的一类化合物，该类物质可以抑制纤维细胞增生，减少 羟色胺形成，从而对皮肤有一定的嫩白作用，但长期使用糖皮质激素会引发激素依赖性皮炎、色素沉着、痤疮等不良反应，我国 化妆品安全技术规范、欧盟化妆品规程（）均将其列为化妆品中的禁用组分。近年来，化妆品中非法添加糖皮质激素的现象普遍，而法定检测方法主要是 .中涵盖的 种糖皮质激素和 化妆品安全技术规范 中覆盖的 种糖皮质激素。糖皮质激素的种类繁多，不法商家往往钻标避规，添加标准检验方法以外的激素成分，因此，不断更新检测组分，对打击非法添加有重要意义。目前，化妆品中糖皮质激素的检测方法包括了分光光度法、薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱质谱法和液相色谱质谱法，等。其中，液质方法因定性准确、快速，检测种类多，是目前糖皮质激素的主要检测方法。本文建立了标准检验方法以外的 种糖皮质激素的液质检测方法，检测组分包括二氟拉松、醋丙氢可的松、甲羟松、特戊酸硫氢可的松、甲基泼尼松龙乙丙酸酯、帕拉米松乙酸酯、去羟米松、羟基泼尼松龙、氟氢可的松、倍他米松 丁酸脂，为发现化妆品中激素类物质的非法添加提供检测依据。实 验.仪器与试剂 高效液相色谱 质谱联用仪；超声波清洗器；型高速离心机；型涡旋混合器；型超纯水发生器。乙腈，色谱纯；实验用水为超纯水。对照品：二 氟 拉 松（麦 克 林，批 号，含 量.）、醋丙 氢 可 的 松（毕 得 医 药，批 号，含 量）、甲羟松（，批号，含量.）、特戊酸硫氢可的松（，批号，含量.）、甲基泼尼松龙乙丙酸酯（毕得医药，批号，含量）、帕拉米松乙酸酯（，批号，含量）、去羟米松（毕得医药，批号，含量.）、羟基泼尼松龙（毕得医药，批号，含量）、氟氢可的松（，批号，含量）、倍他米松 丁酸脂第 卷第 期梁静文：化妆品中 种糖皮质激素的液质检测方法（，批号，含量）。.分析条件.色谱条件色谱柱：（.，.）；柱温：；进样量：；流速：.；流动相：水；流动相：乙腈，流动相比例见表。表 流动相梯度条件 时间 流动相 流动相 .质谱条件电喷雾离子源（）；扫描方式：正离子扫描；采集方式：多反应监测（）模式；雾化气压力：.；干燥气流量：；干燥气温度：；毛细管电压：.；采集时间窗口：。其他质谱参数见表。表 质谱参数 物质名称保留时间 母离子（）子离子（）碰撞能 二氟拉松.醋丙氢可的松.甲羟松.特戊酸硫氢可的松.甲基泼尼松龙乙丙酸酯.帕拉米松乙酸酯.去羟米松.羟基泼尼松龙.氟氢可的松.倍他米松丁酸脂.标准溶液的配制标准贮备溶液：分别准确称取标准物质各.，用乙腈分别溶解定容至.，于 下冷冻存。混合标准溶液：分别吸取标准贮备液各.至 容量瓶中，乙腈定容至刻度，制成浓度为 的标准混合储备溶液，于 下冷冻保存（该工作溶液现配现用）。系列混合标准溶液的制备：分别精密吸取.、.、.、.、新配的 混合标准溶液于、容量瓶中，用 乙腈溶液配制，得到 、的系列混合标准溶液。.样品前处理称取样品.（精确到.），置于 具塞比色管中，加入少量乙腈，在涡旋混合仪上振荡 至试样与提取溶剂混合均匀，然后加入乙腈至近刻度，超声提取 ，静置至室温，用乙腈定容至刻度，摇匀，以 离心，准确移取上层清液 于 离心管中，准确加入乙腈溶液 稀释，摇匀，经.滤膜过滤，滤液作为待测溶液。结果和讨论.色谱和质谱测定条件的优化采用液相色谱质谱法的多反应监测模式进行化妆品中糖皮质激素的检测，具有选择性好、灵敏度高的优点。采用梯度洗脱的方法能更好的实现分离。考察了不同的流动相体系：乙腈水和乙腈（含.乙酸）水（含.乙酸），经过实验，对比两组流动相体系的洗脱效果，最终选择乙腈水作为流动相，更加方便，易操作。.样品前处理方法的优化对比加入饱和氯化钠分散后再用乙腈提取和乙腈提取这两种处理方法，发现前者回收率偏低，后者回收率较高，故采用乙腈提取的处理方法。.色谱柱的选择比较了 （.，.）和 （.，.）两款色谱柱的分离效果，经过多次实验，结果表明，使用 （.，.）色谱柱时，各化合物的分离度和峰形更好，最终选用 （.，.）色谱柱。.标准曲线及方法检出浓度在优化的色谱质谱条件下，对 个水平的系列混合标准溶液（）进行测定，记录色谱图，多反应监测（）扫描方式下的 图谱见图。以色谱峰面积对其质量浓度进行线性回归，以定量离子信噪比（）大于 确定样品的检出限（）。种糖皮质激素的方法检出限为.，在 线性范围内，相关系数大于.，表明各化合物均具有良好的线性关系。线性回归方程、相关系数、方法检出浓度如表 所示。广 州 化 工 年 月图 种对照品 图谱.表 种糖皮质激素的线性回归方程、相关系数和方法检出浓度 ，（）化合物线性方程相关系数（）方法检出浓度（）二氟拉松.醋丙氢可的松.甲羟松.特戊酸硫氢可的松.甲基泼尼松龙乙丙酸酯.帕拉米松乙酸酯.去羟米松.羟基泼尼松龙.氟氢可的松.倍他米松丁酸脂.方法精密度和回收率选取水剂、膏霜两种化妆品常见剂型进行回收率和精密度试验。添加浓度为 ，按.方法处理，回收率和精密度结果如表 所示，结果表明，精密度结果为.；方法回收率为.，相对标准偏差为.。表 回收率和精密度测定结果 化合物精密度（）基质类型加标量（）回收率（）二氟拉松.水剂.膏霜.醋丙氢可的松.水剂.膏霜.甲羟松.水剂.膏霜.特戊酸硫氢可的松.水剂.膏霜.甲基泼尼松龙乙丙酸酯.水剂.膏霜.帕拉米松乙酸酯.水剂.膏霜.去羟米松.水剂.膏霜.羟基泼尼松龙.水剂.膏霜.氟氢可的松.水剂.膏霜.倍他米松丁酸脂.水剂.膏霜.结 论建立了高效液相色谱串联质谱法同时检测化妆品中 种糖皮质激素的检测方法，扩充了激素法定检测方法的测定种类，方法结果准确快速，能够作为化妆品中的激素非法添加的检验依据。参考文献 田媛，冯舒丹，黄美花，等.化妆品中糖皮质激素类非法添加物的 分析中国药科大学学报，（）：.国家食品药品监督管理总局化妆品标准专家委员会.化妆品安全技术规范北京：人民卫生出版社，：.吴大南，郑和辉，王萍，等.超高效液相色谱法检测化妆品中 种糖皮质激素中国卫生检验杂志，（）：.中华人民共和国国家质量监督检验检疫局 中国国家标准化管理委员会.化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱 串联质谱法和薄层层析法北京：中国标准出版社，.刘军.分光光度法测定化妆品中甾体激素含量中国卫生检验杂志，（）：.王敏荣，单琴.薄层层析法检测化妆品中部分雌性激素中国公共卫生，（）：.马强，王超，王星，等.超高效液相色谱法同时测定化妆品中的 种激素色谱，（）：.吴维群，沈朝烨，杨玉林，等.联用技术检测水性化妆品中性激素成分的方法研究环境与职业医学，（）：.王伟萍，张明玥，蔺娟，等.超高效液相色谱串联质谱法同时测定化妆品中 种糖皮质激药物分析杂志，（）：.