虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病的防治研究_王巧.pdf

Research paper 研究论文 22 January 2023,42(1):290-296 菌物学报 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q Doi:10.13346/j.mycosystema.220391 资助项目：山东省重大科技创新工程项目(2019JZZY010714-1)；国家大学生创新计划(202110435038)；青岛市现代农业产业技术体系项目(6622316110)This work was supported by the Major Science and Technology Innovation Project in Shandong Province(2019JZZY010714-1),the National College Students Innovation Plan(202110435038),and the Project of Qingdao Modern Agricultural Technology and Industry System(6622316110).*Corresponding author.E-mail: ORCID:WANG Qiao(0000-0001-9416-6527),LIANG Chen(0000-0002-0139-8140)Received:2022-10-09;Accepted:2022-11-04 菌物学报 Copyright 2023 Institute of Microbiology,CAS.All rights reserved.| Http:/journals- Tel:+86-10-64807521 290 梁晨 青岛农业大学教授，菌物学报和菌物研究编委，山东省植物病理学会理事，山东省科技特派员和青岛市科普专家，从事植物菌物病害及其植物病害综合防控研究 20 多年。虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病的防治研究 王巧1，李守望1，沈莲花1，梁晨1,2*1 青岛农业大学植物医学学院 山东省高校植物病虫害绿色防控工程研究中心，山东 青岛 266109 2 山东省应用真菌重点实验室，山东 青岛 266109 摘 要：明确虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病菌无性阶段的抑制作用及对黄瓜霜霉病的防治效果。采用凹玻片法和离体叶五点接种法分别测定该提取物对游动孢子的释放和游动、休止孢的萌发和芽管伸长以及菌丝生长和孢子囊产生的抑制作用，采用离体叶五点接种法测定该提取物的保护作用、治疗作用和持效期，并采用盆栽试验测定该提取物的保护作用和治疗作用。一系列试验结果显示，虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病菌游动孢子的释放和游动，休止孢的萌发和芽管伸长以及菌丝生长和孢子囊产生的 EC50值分别为 1.19、0.77、0.70、2.13、9.09和 13.15 mg/mL。在离体叶片条件下，虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病的保护和治疗作用的 EC50值分别为 3.69 和 14.57 mg/mL，持效期达 14 d以上。盆栽条件下，该提取物对黄瓜霜霉病保护作用和治疗作用的防效分别为 68.38%和 21.33%。虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病具有很好的保护作用和较长的持效期。关键词：虎尾兰；黄瓜霜霉病；水提取物；作用方式；持效期 引用本文 王巧，李守望，沈莲花，梁晨，2023.虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病的防治研究.菌物学报，42(1):290-296 Wang Q,Li SW,Shen LH,Liang C,2023.A study of snake plant water extract against cucumber downy mildew.Mycosystema,42(1):290-296 Research paper 22 January 2023,42(1):290-296 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q 菌物学报 291A study of snake plant water extract against cucumber downy mildew WANG Qiao1,LI Shouwang1,SHEN Lianhua1,LIANG Chen1,2*1 Shandong Engineering Research Center for Environment-friendly Agricultural Pest Management,College of Plant Health and Medicine,Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,Shandong,China 2 Shandong Provincial Key Laboratory of Applied Mycology,Qingdao 266109,Shandong,China Abstract:The inhibitory effects on the asexual stage of Pseudoperonospora cubensis and the control effects on cucumber downy mildew of snake plant(Sansevieria trifasciata)water extract were clarified.The inhibitory effects of the water extract on the release and swimming of zoospores,germination and germ tube elongation of cystospores,hyphal growth and sporangium production were observed through concave slide method and in vitro leaf five-point inoculation method.The preventive effect,curative effect and effective duration of this extract were determined using the method of in vitro leaf five-point inoculation,and the preventive and curative effects of this extract were further verified by potted trial.The results showed that the EC50 values of snake plant water extract to the release and swimming of zoospores,germination and germ tube elongation of cystospores,and hyphal growth and sporangium production were 1.19,0.77,0.70,2.13,9.09 and 13.15 mg/mL,respectively.Under the leaf in vitro conditions,snake plant water extract manifest preventive and curative effect with the EC50 values of 3.69 and 14.57 mg/mL,respectively.The effective duration was more than 14 days.Under potted conditions,the protective and therapeutic effects of this extract were 68.38%and 21.33%,respectively.The experiments proves that snake plant water extract has a good preventive effect with a long effective duration on cucumber downy mildew.Keywords:Sansevieria trifasciata;cucumber downy mildew;water extract;action mode;effective duration 黄 瓜 霜 霉 病 是 由 古 巴 假 霜 霉Pseudoperonospora cubensis 引起的一种重要病害，该病周年发生，流行性强、传播快，常年造成减产 20%40%，流行年份减产高达 70%以上，甚至绝收(Cohen et al.2008)。生产上主要通过选育抗性品种和喷施化学药剂来防治黄瓜霜霉病；然而大多数优质品种抗性不高及农药的“3R”问题限制了 2 种措施的防效；20 世纪前后生物防治措施受到国内外研究者的持续关注，除了利用生防菌(Fan et al.2019；肖倩等 2021)，植物源农药也是植物病害生物防治的重要手段(吴文君等 2021)，从 2003 年开始，国内外关于防治黄瓜霜霉病植物提取物的相关报道不断涌现(郭庆港 2003；Rohner et al.2004；赵杰等 2005；Schuster et al.2010；Schuster&Schmitt 2015)。虎尾兰 Sansevieria trifasciata，又名虎皮兰，隶属龙舌兰科虎尾兰属，多年生草本植物，喜温暖潮湿，耐旱。除具有大量的粗蛋白、多糖和粗纤维之外，还含有钙、镁、钾等多种微量元素，可以用于加工饲料，属于营养保健型的植物资源(李泽鸿等 2008)。在龙舌兰植物中提取的甾体皂苷元是产生甾体激素药物的重要原料，具有抑癌作用；虎尾兰及其水或乙醇提取物具有治疗糖尿病、消炎镇痛、抗氧化、止泻及抗过敏等作用(刘莹等 2016)。但目前尚未有虎尾兰防治黄瓜霜霉病的研究报道，为进一步探讨其在黄瓜霜霉 王巧 等/虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病的防治研究 研究论文 菌物学报 292 病上的开发应用价值，本研究开展了虎尾兰水提取物对黄瓜霜霉病菌无性阶段的抑制活性及对黄瓜霜霉病作用方式和持效期的试验，为该提取物防治黄瓜霜霉病的应用提供理论依据。1 材料与方法材料与方法 1.1 供试材料 1.1.1 供试寄主植物和病原菌 参照肖倩等(2021)的方法采集改良鲁黄瓜三号的叶片用于离体叶片试验、菌株扩繁和保藏。采用傅淑云等(1984)的分离、培养和接种方法，以保藏和制备古巴假霜霉 HMQAU190287。1.1.2 供试药剂 25%吡唑醚菌酯悬浮剂，山东康乔生物科技股份有限公司生产。用移液枪定量吸取 25%吡唑醚菌酯悬浮剂，然后用无菌水逐步稀释有效成分质量浓度至 0.33 mg/mL 和 0.17 mg/mL 备用。1.2 虎尾兰水提取物的制备 采用水提法制备虎尾兰水提取物。用灭菌剪刀裁剪新鲜虎尾兰叶片，自来水清洗后滤纸擦干，称取 10 g 于 75%乙醇浸泡 15 s，之后用无菌水漂洗 3 次，用灭菌剪刀剪成 5 mm 左右小碎块置于无菌研钵，加入无菌水 23 mL 研磨成匀浆，用无菌擦镜纸过滤后，3 000 r/min 离心20 min，上清液转入表面皿中，60 烘干后称重，加入 10 mL无菌水将干物质定容为 36 mg/mL的虎尾兰水提取物，于 4 冰箱保存备用。1.3 对游动孢子释放及游动的影响 采用凹玻片法观察虎尾兰水提取物对游动孢子释放及游动的影响。设置 7 个处理，分别为7.20、3.60、1.80、1.08 和 0.36 mg/mL 5 个浓度梯度的虎尾兰叶片水提取物，以及 0.33 mg/mL吡唑醚菌酯的药剂对照和灭菌自来水的空白对照，将上述试验组分别与 2105 CFU/mL 孢子囊悬浮液