GB 23200.113-2018 食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法.pdf

ICS65.100G25中华人民共和国国家标准GB23200.113-2018食品安全国家标准植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法National food safety standard-Determination of 208 pesticides and metabolitesresidues in foods of plant origin-Gas chromatography-tandem mass spectrometry method2018-06-21发布201812-21实施中华人民共和国国家卫生健康委员会中华人民共和国农业农村部发布国家市场监督管理总局GB23200.113-2018食品安全国家标准植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法1范围本标准规定了植物源性食品中208种农药及其代谢物（参见附录A)残留量的气相色谱-质谱联用测定方法。PUBL本标准适用于植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的应用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样用乙腈提取，提取液经固相萃取或分散固相萃取净化，植物油试样经凝胶渗透色谱净化，气相色谱-质谱联用仪检测，内标法或外标法定量4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水4.1试剂4.1.1 乙(CHCNCAS号：75-05-8)I3 H4.1.2乙酸乙酯(CHCOOC2H,CAS号：141-78-6)：色谱纯4.1.3甲苯(CHg,CAS号：108-88-3)：色谱纯。4.1.4环已烷(CH12,CAS号：110-82-7)：色谱纯4.1.5氯化钠(NaCl,CAS号：7647-14-5)。4.1.6醋酸钠(CH3COONa,CAS号：6131-90-4)4.1.7醋酸(CHCOOH,CAS号：55896-93-0)。4.1.8硫酸镁(MgSO4,CAS号：7487-88-9)。4.1.9柠檬酸钠(NaCH5O7,CAS号：6132-04-3)。4.1.10柠檬酸二钠(CHNa2O,CAS号：6132-05-4)。4.2溶液配制4.2.1乙腈-醋酸溶液(99+1，体积比)：量取10mL醋酸加入990mL乙腈中，混匀。4.2.2乙腈-甲苯溶液(3+1，体积比)：量取100mL甲苯加人300mL乙腈中，混匀。4.2.3GPC流动相：环己烷-乙酸乙酯溶液(1+1，体积比)：量取500mL环已烷加入500mL乙酸乙酯中，混匀。1GB23200.113-20184.3标准品环氧七氯B内标和208种农药及其代谢物标准品，参见附录A,纯度95%。4.4标准溶液配制4.4.1标准储备溶液(1000mg/L):准确称取10mg(精确至0.1mg)各农药标准品，根据标准品的溶解性和测定的需要选丙酮或正已烷等溶剂溶解并定容至10mL,避光-18保存，有效期1年。4.4.2混合标准溶液（混合标准溶液A和B):按照农药的性质和保留时间，将208种农药及其代谢物分成A、B两个组。吸取一定量的农药标准储备溶液于250mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度。混合标准溶液避光04保存，有效期1个月。4.4.3内标溶液：准确称取10mg环氧七氯B(精确至0.1mg)用乙酸乙酯溶解后转移至10mL容量瓶中，定容混匀为内标储备液。内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至5mg/L为内标溶液。4.4.4基质混合标准工作溶液：空白基质溶液氮气吹干，加入20L内标溶液，加入1mL相应质量浓度的混合标准溶液复溶，过微孔滤膜(4.5.6)。基质混合标准工作溶液应现用现配。注：空白基质溶液取样量应与相应的试样处理取样量一致。4.5材料4.5.1固相萃取柱：石墨化炭黑-氨基复合柱，500mg/500mg,容积6mL。4.5.2乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA):40m60m。4.5.3十八烷基硅烷键合硅胶(C1s):40m60m。4.5.4石墨化黑(GCB):40m120m。4.5.5陶瓷均质子：2cm(长)1cm(外径)。4.5.6膜()：13 mm0.22 m。5仪器5.1气相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电子轰击源(EI)。5.2胶透色谱仪装置：配有25mm(内径)500mm,内装Bio-BeadsSX-3填料或相当的净化柱。5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.4高速浆：转速不低于15000r/min。5.5离心机：转速不低于4200r/min。5.6组织捣碎机。5.7旋转蒸发仪。5.8氮吹仪：可控温。5.9涡旋振荡器。6试样制备6.1试样制备蔬菜和水果的取样量按照相关标准的规定执行，食用菌样品随机取样1kg。样品取样部位按照GB2763的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放人组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中。取谷类样品500g,粉碎后使其全部可通过425m的标准网筛，放入聚乙烯瓶或袋中。取油料作2GB 23200.113-2018物、茶叶、坚果和香辛料各500g,粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中。植物油类搅拌均匀，放入聚乙烯瓶中。6.2试样储存将试样按照测试和备用分别存放。于一18条件下保存。7分析步骤7.1QuEChERS前理7.1.1蔬菜、水果和食用菌称取10g试样（精确至0.01g)于50mL塑料离心管中，加入10mL乙腈、4g硫酸镁、1g氯化钠、1g柠檬酸钠、0.5g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡1min后4200r/min离心5min。吸取6mL上清液加到内含900mg硫酸镁及150mgPSA的15mL塑料离心管中；对于颜色较深的试样，15mL塑料离心管中加入885mg硫酸镁、150mgPSA及15mgGCB,涡旋混匀1 min。4200r/min离心5min,准确吸取2mL上清液于10mL试管中.40水浴中氮气吹至近干。加入20L的内标溶液，加入1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜(4.5.6)，用于测定7.1.2谷物、油料和坚果称取5g试样（精确至0.01g)于50mL塑料离心管中，加10mL水涡旋混匀，静置30min。加入15mL乙腈-醋酸溶液(4.2.1)、6g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡1min后4200r/min离心5min。吸取8ml上清液加到内含1200mg硫酸镁400mg PSA及400 mg Cis的15 mL塑料离心管中，涡旋混匀 1 min。4 200 r/min离心 5 min,准确吸取 2 mL上清液于10mL试管中，40水浴中氮气吹至近干。加入20L的内标溶液，加入1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜(4.5.6)，用于测定。7.1.3茶叶和香辛料称取2g试样（精确至0.01g)于50mL塑料离心管中，加10mL水涡旋混匀，静置30min。加入15mL乙腈-醋酸溶液(4.2.1)、6g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡1min后4200r/min离心5 min。吸取8mL上清液加到内含1200mg硫酸镁、400mg PSA、400mgCs及200 mg GCB的15 mL塑料离心管中，涡旋混匀1 min。4200 r/min离心5 min,准确吸取2 mL上清液于10mL试管中，40水浴中氮气吹至近干。加入20L的内标溶液，加入1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜(4.5.6)，用于测定注：上述处理中净化前的上清液吸取量可根据需要调整，净化材料（无水硫酸镁、PSA、C、GCB)用量按比例增减。7.2固相萃取前处理7.2.1提取7.2.1.1蔬菜、水果和食用菌称取20g试样（精确至0.01g)于100mL塑料离心管中，加入40mL乙腈，用高速匀浆机15000r/min匀浆2min,加入5g7g氯化钠剧烈振荡数次，4200r/min离心5min。准确吸取10mL上清液于100mL茄型瓶中。40水浴旋转蒸发至1mL左右，氮气吹至近干，待净化。7.2.1.2谷物、油料、坚果、茶叶和香辛料称取5g试样（精确至0.01g)于100mL塑料离心管中，加10mL水涡旋混匀，静置30min。加入20mL乙腈，用高速匀浆机15000r/min匀浆2min,加入5g7g氯化钠剧烈振荡数次，4200r/min离心5min。准确吸取5mL上清液于100mL茄型瓶中，40水浴旋转蒸发至1mL左右，氮气吹至近干，待净化。7.2.2净化用5mL乙腈-甲苯溶液(4.2.2)预洗固相萃取柱(4.5.1)，弃去流出液。下接150mL鸡心瓶，放入3GB23200.113-2018固定架上。将上述待净化试样用3mL乙腈-甲苯溶液(4.2.2)洗涤至固相萃取柱中，再用2L乙腈-甲苯溶液(4.2.2)洗涤，并将洗涤液移入柱中，重复2次。在柱上加上50L储液器，用25mL乙腈-甲苯溶液淋洗小柱，收集上述所有流出液于150L鸡心瓶中，40水浴中旋转浓缩至近干。加入50L内标溶液，加人2.5mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜(4.5.6)，用于测定。7.3GPC前处理称取1g食用油试样（精确至0.01g)于10mL样品瓶中，加入GP流动相(4.2.3）7mL混匀，将试样溶液置于GPC仪上净化，上样体积为5mL,流速为5mL/min,收集1000s2700s时间段的洗脱液。将流出液浓缩至5mL,准确吸取4mL于10mL玻璃离心管中，40水浴中氮气吹至近干。加入20L的内标溶液，加入1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜(4.5.6)，用于测定。7.4测定7.4.1仪器参考条件a)色谱柱：14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱；30m0.25mm0.25m,或相当者；b)色谱柱温度：40保持1min,然后以40/min程序升温至120，再以5/min升温至240，再以12/min升温至300，保持6min;c)载气：氮气，纯度99.999%，流速1.0mL/min;d)进样口温度：280；e)进样量：lL;)进样方式：不分流进样；g)电子轰击源：70eV;h)离子源温度：280；iD传输线温度：280；j)溶剂延迟：3min;k)多反应监测：每种农药分别选择一对定量离子、一对定性离子。每组所有需要检测离子对按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压，参见附录B。7.4.2标准工作曲线精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用乙酸乙酯释成质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L和0.5mg/L的标准工作溶液。空白基质溶液氮气吹干，加入20L内标溶液，分别加入1L上述标准工作溶液复溶，过微孔滤膜(4.5.6)配制成系列基质混合标准工作溶液，供气相色谱质谱联用仪测定。以农药定量离子峰面积和内标物定量离子峰面积的比值为纵坐标、农药标准溶液质量浓度和内标物质量浓度的比值为横坐标，绘制标准曲线。7.4.3定性及定量7.4.3.1保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在士2.5%之内。7.4.3.2定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在目标农药。