中华中医药杂志(原中国医药学报)2023年2月第38卷第2期CJTCMP,February2023,Vol.38,No.2•805•黄芪汤基于miR-93和miR-140-5p介导的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对12C6+辐射下丘脑损伤的防护机制蒋国凤1，颜春鲁1,2，安方玉1,3，刘永琦1，石瑶1，吕栋辉1，袁灵青1，李孟翰1，王嘉玉1（1甘肃中医药大学，兰州730101；2甘肃省中医药研究中心，兰州730000；3甘肃省中医药防治慢性疾病重点实验室，兰州730000）摘要：目的：观察黄芪汤对12C6+辐射脑损伤大鼠下丘脑组织中miRNA的基因表达及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响，初步探讨黄芪汤对重离子辐射损伤的防护机制。方法：SPF级Wistar大鼠50只随机分为正常对照组，辐射模型组，黄芪汤高、中、低剂量组（18、9、4.5g·kg-1·d-1），灌胃2周。干预7d后除正常对照组外，其余各组脑组织给予4Gy12C6+离子束单次照射，辐射后7d处死各组大鼠。HE染色观察垂体组织的病理形态学改变；ELISA检测下丘脑组织IL-1β、IL-6的分泌情况；RT-PCR法检测下丘脑中miRNA与TLR4的基因表达；Westernblot法检测下丘脑中TLR4、MyD88、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达。结果：与辐射模型组比较，黄芪汤高剂量组IL-1β水平显著降低（P<0.01），中、高剂量组IL-6水平及miR-93、TLR4的基因表达显著降低（P<0.01），miR-140-5p的基因表达显著增加（P<0.01），黄芪汤各剂量组中TLR4、MyD88、NF-κBp65以及p-NF-κBp65蛋白表达显著降低（P<0.01），黄芪汤高剂量组核固缩、深染现象明显减轻，偶见凋亡小体。Pearson分析表明，下丘脑中miR-93与TLR4蛋白、mRNA表达水平具有显著正线性相关性（P<0.01），而miR-140-5p与TLR4蛋白和mRNA表达水平呈现负线性相关性（P<0.01）。结论：黄芪汤可能是通过抑制miR-93的过度表达和促进miR-140-5p的表达抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活，从而抑制其下游的炎症级联反应，减轻重离子辐射后造成的下丘脑损伤，发挥抗辐射的作用。关键词：黄芪汤；重离子辐射；下丘脑损伤；miR-93；miR-140-5p；TLR4/MyD88/NF-κB信号通路；12C6+；放疗基金资助：国家自然科学基金项目（No.81760797），甘肃省“双一流”科研重点项目（No.GSSYLXM-05），甘肃省优秀研究生“创新之星”项目（No.2021CXZX-746），甘肃中医药大学科学研究与创新基金（No.2021KCYB-4）ProtectivemechanismofHuangqiDecoctionbasedontheTLR4/MyD88/NF-κBsignalingpathwaymediatedbymiR-93andmiR-140-5ponhypothalamicinjuryca...
