葛根异黄酮抗缺血性脑卒中的活性筛选与研究陆瑶1,周密1,鲁婷婷1,郑梅竹2(1.长春师范大学生命科学学院,吉林长春130032;2.长春师范大学中心实验室,吉林长春130032)[摘要]利用PC12细胞建立糖氧剥夺(OGD)体外脑卒中损伤模型,采用该模型对葛根异黄酮抗缺血性脑卒中活性进行筛选和验证。评价指标包括:细胞存活率检测、细胞内活性氧(ROS)含量检测、乳酸脱氢酶(LDH)释放率检测、细胞内钙离子(Ca2+)浓度检测和细胞凋亡程度检测,并利用蛋白免疫印迹法(WesternBlot)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-celllymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bcl-xL/Bcl-2asociateddeathpromoter,BAD)的表达水平。结果显示,与模型组比较,葛根异黄酮保护组能够抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,降低LDH释放、抑制细胞内Ca2+累积,并且Bcl-2表达水平升高,BAD表达水平降低,Bcl-2与BAD蛋白表达量比值上调。表明葛根异黄酮能减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)造成的PC12细胞损伤,提升细胞存活率,葛根异黄酮可能具有一定的抗缺血性脑卒中活性。其作用机制可能与抑制神经细胞的凋亡,减少神经元丢失相关。[关键词]葛根异黄酮;脑卒中;PC12细胞[中图分类号]R285.5[文献标志码]A[文章编号]2095-7602(2023)02-0077-07缺血性脑卒中(Ischemicstroke)作为一种脑血管疾病,是指因脑部血液供应障碍,缺血、缺氧所导致的局限性脑组织的缺血性坏死或软化[1-2]。对于缺血性脑卒中,临床上主要采用的治疗方法是溶栓治疗。但有可能引起脑出血或再灌注损伤,因而有很大的缺陷[3]。药物治疗主要包括合成类药物和天然药物。合成药物是目前临床上比较常见的脑保护药物。相对来说,天然药物的药效更温和,对病人的不良反应也更少,适合长期使用。异黄酮是一种存在于植物中的芳香含氧杂环化合物,具有抗肿瘤、抗老年痴呆、抗炎症等生理功能[4-5]。近年来,异黄酮类化合物的抗脑卒中作用陆续有了研究报道。研究发现,葛根异黄酮在一定程度上有修复血管内皮损伤的作用[6-7],对脑卒中病人的康复有重要意义[8-9]。本实验利用PC12细胞建立OGD/R缺血性脑卒中细胞模型对葛根异黄酮的抗脑卒中活性进行初步筛...