DB63T 1159-2012甘蓝型杂交油菜品种纯度检验 ISSR操作规程.pdf

DB63/T115920124.1设备一一高速低温离心机：一一PCR扩增仪：多用电泳仪及水平式电泳槽：紫外凝胶成像系统：微量移液器：规格为0.2uL-2uL,1uL-10uL,2L-20uL,5uL-50L,20L-200L,200L-1000uL:电子分析天平：磁力加热搅拌器：蒸汽压力灭菌锅：恒温水浴锅：微波炉。4.2耗材一一离心管：0.2mL,1.5mL,2.0mL:研钵：一一移液器吸头：20uL,200L和1000L:烧杯：三角烧瓶：一一PE手套：一次性聚乙烯手套。5试剂及溶液的配制5.1试剂要求试剂需使用分析纯级。配制试剂所使用的水，除另有说明外，使用按GB/T6682规定的一级水。5.2试剂一一CTAB:十六院基三甲基溴化胺：一一阝-巯基乙醇：一一Tris:三羟甲基氨基甲烷：PVP:聚乙烯吡咯烷酮碘络合物：一一TaqE:DNA聚合酶，附带6倍1 oading buffer、.10倍buffer和25.0mmol/LMgC12:dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸：-ADNA/Hind II marker一一100bp或200 bp DNA marker;一一EB:溴化乙锭一一10倍buffer:10倍反应缓冲液：一一氯化镁：一一6倍loading buffer:6倍上样缓冲液：Primer:引物：一一EDTANa22H0:乙二胺四乙酸二钠：一一dd0:经高压灭菌的二次蒸馏水：一一氯化钠：2