DB46T 536-2021西番莲(百香果)种苗病毒检测技术规程.pdf

DB46/T536-20215抽样方法5.1原种每株必检，每3个月进行病毒检测1次。5.2采穗母株采穗圃每半年检测1次，每株一年内至少被抽检1次。5.3商品苗同一批生产批次或同一调运批次的种苗为同一检验批。采用随机抽样方法，按同一检验批不小于0.5%的比例抽样，最低抽样数量为20株。6检测方法6.1试纸条检测法6.1.1适用情形种苗生产和调运过程中需要在现场快速获知病毒检测结果的情形。6.1.2采样方法及样品保存每株取淡绿期展开叶片1张，单独放到封口塑料采样袋里，挤掉袋内空气，密封后妥善保存。样品在2一8条件下保存，保存期不应超过3d;若需长期保存，需放置-80冰箱，且避免反复冻融。6.1.3操作方法用马铃薯Y病毒属的通用检测试纸条进行现场快速检测。具体操作方法按产品说明执行。6.1.4结果判定试纸条远液端控制线位置出现反应条带时，检测结果方可信。试纸条插入反应液中20mi左右检测线位置出现反应条带的，样品判定为Potyvirus阳性，未出现反应条带的，判定为阴性。6.2酶联免疫吸附测定(ELISA)法6.2.1适用情形样品数量较多（一般40份以上），宜用ELISA检测法。适用十检测采穗母株。6.2.2采样方法及样品保存按照6.1.2给出的要求执行。6.2.3操作方法用马铃薯Y病毒属的通用抗血清进行ELISA检测。用已知含马铃薯Y病毒属的西番莲样品做阳性对照，用已知不含马铃薯Y病毒属的西番莲样品做阴性对照，用无菌水替代样品做空白对照。操作方法按NY/T401一2000的附录A规定执行。6.2.4结果判定