DB41T 1930-2019泡桐组织培养快繁技术规程.pdf

ICS65.020.01B05DB41河南省地方标准DB41/T19302019泡桐组织培养快繁技术规程2019-11-21发布2020-02-21实施河南省市场监督管理局发布DB41/T1930-20193.2种子无菌化材料培养采集生长健康的泡桐当年生种子，先用70%酒精消毒30s,再放入0.1%HgC1溶液中进行浸泡消毒5mi,然后用无菌水冲洗35次。最后将种子接种于不附加植物生长调节物质的MS培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1.50后可获得34对叶片的无菌材料，其叶片和茎段用作芽诱导的材料。4芽诱导4.1叶片外植体芽的诱导将获得的无菌叶片沿主脉切成约1.0cm2.0cm的外植体，接种于附加不同浓度6-BA(8mg/L18mg/L)和NAA(0.1mg/L0.5mg/L)的MS培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养35d后，在叶缘处分化出芽。4.2茎段外植体芽的诱导将获得的无菌茎段切成长1cm左右的外植体，接种于附加不同浓度6-BA(10mg/L18mg/L)和NAA(0.2mg/L0.5mg/L)的MS基本培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养30d后分化出芽。5增殖培养将诱导出的芽接种于附加不同浓度6-BA(8mg/L12mg/L)和NA(0.1mg/L0.5mg/L)的MS基本培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1.35d后长出丛生芽。6生根培养当诱导出的泡桐芽长到约3cm时，从茎基部切下，接种于附加不同浓度NAA(0.1mg/L0.5mg/儿)的1/2MS培养基上进行生根培养，培养基中蔗糖质量浓度为20g/L,琼脂4.5g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同4.1。？d后分化出根。7炼苗与移栽当泡桐幼苗的根在生根培养基上长到约3c时，逐步大掉组培瓶盖，在温室内锻炼7d,然后移入盛有蛭石或草炭土（经5%的高猛酸钾消毒处理或121高1灭20min)的营养钵中。用1/2WS营养液浇灌湿润，放到温室中培养，温室温度2528，开始2周全气湿度85%以上，2周后湿度逐渐降低与室外环境相同，45周后，可以移栽到大田中。8档案管理建立泡桐组织培养基本情况档案，包括以下内容：品种名称、材料来源、培养过程、培养照片等。档案由组培人员填写，档案填写后，及时整理归档。2