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DB37T
3319-2018水貂、狐和貉犬瘟热病毒等10种病毒性病原实时荧光PCR检测方法
3319
2018
水貂
貉犬瘟
热病
10
病毒性
病原
实时
荧光
PCR
检测
方法
DB37/T33192018水貂、狐和貉犬瘟热病毒等10种病毒性病原实时荧光PCR检测方法1范围本标准规定了水貂、狐和貉犬瘟热病毒等10种病毒性病原实时荧光PCR检测方法。本标准所规定的实验室检测方法适用于水貂、狐和貉的犬瘟热病毒、细小病毒、冠状病毒、轮状病毒、星状病毒、阿留申病毒、杯状病毒、博卡病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒等10种病毒的荧光PCR检测方法,其他动物参考。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法3缩略语荧光PCR实时荧光聚合酶链式反应Ct值每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环圈数DNA脱氧核糖核酸RNA核糖核酸Taq酶Taq DNA聚合酶PBS磷酸盐缓冲生理盐水4试剂和材料4.1荧光定量PCR检侧仪及配套反应管(板)4.2高速台式冷冻离心机(离心速度12000r/min以上)。4.3混匀器。4.4恒温水浴锅。4.5冰箱(28和-20两种)。4.6微量移液器(0.5L10L,5L20L,20L200L,200L一1000L)及配套吸头。4.71.5mL离心管(无核酸酶)。4.8DNARNA核酸提取试剂等。5样品的采集与前处理1