DB21T 3256—2020非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法.pdf

ICS11.220B41DB21辽宁省地方标准DB21/T32562020非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法Loop-mediated Isothermal Amplification(LAMP)for Rapid Detection for AfricanSwine Fever Virus2020-04-30发布2020-05-30实施辽宁省市场监督管理局发布DB21/T3256-2020非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法1范围本标准规定了非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法的技术要求。本标准适用于非洲猪瘟疫病的诊断、监测及流行病学调查，适用于猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏等组织样品中非洲猪瘟病毒核酸的快速检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求3原理非洲猪瘟病毒是一种DNA病毒，该检测方法利用6条特异性引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温环境下1h内完成扩增，用于非洲猪瘟病毒的核酸检测。4仪器和器材4.1高速台式冷冻离心机（离心范围020000r/min)4.2冰箱：41冰箱，-201冰箱，-7士1冰箱4.3恒温LAWP扩增仪型号：Gene-8C)4.4离心管：15ml离管、1.5ml离心管和0.2 ml PCR专用离心管4.5微量移液器：10001,200,1001,50u1,201,101,215试剂和引物5.1样品处理剂5.2 ASFV-R-Mix5.3 Bst enzyme5.4D-1矿物油5.5阳性对照5.6阴性对照注：本技术规范中使用的试剂，除另有说明外，所有实验使用的试剂等级均为不含DNA或DNse的分析纯或生化试剂：所有试剂均用无菌的容器分装。1