·论著·重组分泌型Ｆａｓ配体对肝癌细胞株ＨｅｐＧ２凋亡的影响＊尚小玲１，３，汪宏良１，３，冯琴琴４，胡芳１，３，杨浩１，３，谌章舟１，２，３△１．黄石市中心医院／湖北理工学院附属医院医学检验科，湖北黄石４３５０００；２．湖北理工学院医学院，湖北黄石４３５００３；３．肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北黄石，４３５００３；４．黄石市妇幼保健院产科，湖北黄石４３５００３摘要：目的构建重组表达Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）基因（Ｎ端含有ＩＬ２信号肽）的慢病毒，探讨其介导肝癌细胞凋亡的可行性及其可能的分子机制。方法将含有ＩＬ２信号肽的ＦａｓＬ基因克隆至慢病毒载体ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－ＭＣＳ－ＥＦ１－ＧＦＰ＋Ｐｕｒｏ（简称ｐＣＤＨ）中，然后将重组ｐＣＤＨ－ＩＬ２ｓｉｇ－ＦａｓＬ与慢病毒辅助质粒共同转染至ＨＥＫ２９３细胞中，获得重组慢病毒ＬＶ－ＩＬ２ｓｉｇ－ＦａｓＬ，阴性对照为ＬＶ，分别感染ＨｅｐＧ２细胞。最后将成功构建的稳转细胞ＨｅｐＧ２－ＬＶ－ＩＬ２ｓｉｇ－ＦａｓＬ及ＨｅｐＧ２－ＬＶ同时培养至９６ｈ，采用实时荧光定量聚合酶链反应（ｑＰＣＲ）检测细胞中相关凋亡信号因子的转录水平，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测蛋白表达水平，ＭＴＴ检测细胞增殖抑制水平。结果ＨｅｐＧ２－ＬＶ－ＩＬ２ｓｉｇ－ＦａｓＬ细胞相对于阴性对照株ＨｅｐＧ２－ＬＶ，其凋亡因子转录及表达水平均上调；ＭＴＴ检测结果显示ＨｅｐＧ２－ＬＶ－ＩＬ２ｓｉｇ－ＦａｓＬ细胞生长明显受到抑制。结论外源表达ＩＬ２ｓｉｇ－Ｆａｓ基因可诱导肿瘤细胞ＨｅｐＧ２凋亡，有可能作为肿瘤基因治疗的新途径。关键词：Ｆａｓ配体；肝癌细胞；慢病毒；凋亡ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０２３．０４．０１４中图法分类号：Ｑ２９１文章编号：１６７３－４１３０（２０２３）０４－０４５０－０６文献标志码：ＡＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｓｅｃｒｅｔｏｒｙＦａｓｌｉｇａｎｄｉｎｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅＨｅｐＧ２＊ＳＨＡＮＧＸｉａｏｌｉｎｇ１，３，ＷＡＮＧＨｏｎｇｌｉａｎｇ１，３，ＦＥＮＧＱｉｎｑｉｎ４，ＨＵＦａｎｇ１，３，ＹＡＮＧＨａｏ１，３，ＳＨＥＮＺｈａｎｇｚｈｏｕ１，２，３△１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＨｕａｎｇｓｈｉＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉ...
