猪圆环病毒3型感染现状及检测措施_刘勇.pdf

592023.01动物生产猪圆环病毒3型感染现状及检测措施刘 勇，钟 桢，金 利，华 瑛，徐 艳*（内蒙古自治区赤峰市动物疫病预防控制中心，内蒙古赤峰024005）猪圆环病毒系统性疾病是影响我国生猪养殖业主要的疾病之一。猪圆环病毒为无囊膜、单链环状DNA病毒，是哺乳动物可感染的最小病毒之一。目前，已发现了4种基因型（PCV14）。PCV3于2015年首次在美国北卡罗莱纳州母猪体内检测发现猪圆环病毒3型，经调查显示，患病母猪患有心脏与多系统并发症、猪皮炎和肾病综合征，通过对患病母猪检测，排除了猪圆环病毒2型。借助宏基因组分析，鉴定出新型圆环病毒即猪圆环病毒3型。1 国内外流行现状继美国首次发现猪圆环病毒3型后，亚洲、欧洲、南美洲多个国家都检测出PCV3，该病毒迅速传遍全球。2017年，广东省首次报道了我国PCV3病例。随后，湖南、广西、福建、江西等地频繁发布检测出PCV3的相关报道。研究者从韩国70多个养殖场采集了360份样品，经检测总样品PCV3阳性率为44.2%，总场阳性率为72.6%。病毒毒株基因序列与美国PCV3毒株同源性高达99.8%。来自西班牙的报道显示，从4个农场收集不同生长阶段的猪群样本，均检测出PCV3，少数生猪感染周期较长，可达423周。波兰的研究显示，对14个养殖场320周龄猪群进行血清检测，仅有2个商业养殖场未检测出PCV3，其余12个养殖场的总场阳性率可达85.7%。2017年，我国关于PCV3感染情况的报道显示，吉林省PCV3阳性率最高为100%，其次为广东省44.29%。研究人员采集了江西省、重庆市和辽宁省的3个商业养殖场356头出现繁育障碍与急性流产的母猪，检测出唯一的病原体为PCV3。迄今为止，我国有26个省出现PCV3感染病例，阳性率出现逐年升高趋势，并发现了与蓝耳病混合感染、多种继发感染的病例，给生猪养殖业带来严重的经济损失。2 病原学特征PCV3病毒粒子壳体结构为二十面体，直径为1325纳米，包括3个主要开放阅读框（ORF13），ORF1是相对保守区域，负责编码和病毒的复制酶蛋白（Rep）；ORF2为变异区域，氨基酸的结构蛋白（Cap）与感染病毒及免疫密切相关。ORF3与ORF1位置相反，编码推定蛋白，是病毒传播的关键环节，但是其蛋白功能尚不清楚。3 传播途径与感染宿主在患病母猪与死胎或阳性猪群的组织或体液中能够检测出PCV3的病毒核酸，表明PCV3存在于猪的心脏、淋巴结、脾脏、脑、扁桃体、唾液、乳汁和精液中，其中，肺脏、心脏与淋巴结中分布更多的病毒基因组。唾液中更容易检测到PCV3（37.3%），显示PCV3可经粪口传播。被感染的家猪或野猪，表现为轻症或无症状，是PCV3的主要宿主，易感性较强，与动物生长阶段、性别或健康状况无关，各种类型的猪均可感染，对后备母猪与育肥猪的影响最为严重。对无症状野猪展开的跟踪检测结果表明，野猪体内PCV3检出率为42.66%，在体内感染可持续数月。国外学者在其他家畜、野生哺乳动物及蜱的体内均检测到PCV3，该病毒跨物种传播能力较强。研究者在山东省牛群的血清进行PCR检测，阳性率为34.7%。在我国猪养殖场内的蚊子中检测到了PCV3。德国研究者发现PCV3在狒狒体内传播，狒狒接受了猪心脏移植，出现延长病毒复制的现象。4 实验室检测方法病原学方法与血清学方法是检测PCV的主要方法，PCR检测是病原学主要的检测方法，包含常规PCR、套氏PCR、荧光定量PCR、与其他PCR技术。研究者通过免疫荧光法，观察到PCV3特异性小鼠阳性感染细胞中存在较强的荧光反应，证实PCV3感染了PK-15细胞。宏基因组测序法是首次检测出PCV3的病原菌检测法。酶联免疫吸附实验(ELISA)是检测PCV3抗体含量主要的血清学检测方法。我国研究者采集20152017年的样本，重组Cap蛋白，建立PCV3间接ELISA诊断法，并从2015年血清样本中检测出PCV3抗体。另有研究人员使用杆状病毒表达的Cap蛋白，建立了PCV3IgG间接ELISA检测法，对1038份来自与湖南省的样品进行检测，结果显示样本中PCV3血清阳性率较高，繁殖障碍母猪阳性率明显高于健康母猪。随着对PCV3研究的深入，更多便捷高效的检测方法将被应用于PCV3临床诊断，应依据实际症状选择适宜的检测方法对该病进行诊断。PCV3为养猪业带来严重的威胁，增强PCV3病毒检测，做到早检测、早预防、减少病毒的传播，保证生猪养殖健康发展。*通讯作者：徐艳。