DB12T 1067-2021淡水小球藻生产技术规程.pdf

DB12/T1067-2021进行藻液规模培养。配有光照设备和不同容量的透明发酵容器等。5生产技术流程5.1生产流程生产流程应按附录A执行。5.2藻种质量用于培养的藻种应有藻种鉴定报告或藻株来源相关信息。规模生产之前需检测藻种的细胞密度和纯度，不能有其他藻污染，藻细胞密度110cells/mL,利用平板涂布法或计数框计数法测定藻细胞密度，计数框计数法应按SL733中6.4的规定执行。5.3培养基小球藻液体培养基配方见附录B。保种固体培养基和计数培养基为在液体培养基中加入20g/L琼脂粉。5.4灭菌消毒保种斜面培养基，生产液体藻种培养基以及计数培养基采用高压蒸汽灭菌，灭菌条件为110115C,0.1 MPa0.15 MPa,灭菌10 min15 min。规模培养容器用10mg/L20mg/L高锰酸钾溶液或有效氯浓度为0.1%0.3%次氯酸钠溶液浸泡12h24h。消毒后，用清水洗净。检查无杂藻杂物后，加水和培养基。也可加入水和培养基后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为110115，0.1MPa0.15MPa,灭菌10min15min。5.5液体藻种培养5.5.1容器容器为200mL500mL透明玻璃瓶，可高压蒸汽灭菌。5.5.2培养条件从斜面培养基接种原藻种到液体培养基中，光照强度30001x50001x,光照周期14L:10D,培养温度2025，静置培养7d10d5.5.3质量检测配制计数培养基，利用平板涂布法测定小球藻细胞密度及纯度。小球藻细胞密度110cells/mL,其他藻类密度0.1%即为合格藻种。5.6规模培养5.6.1容器容器容积控制在0.2m32m,高度100cm。选用透光性强的塑料桶、塑料袋、玻璃缸等适合的培养容器。5.6.2接种量按培养体积的10%20%接种液体藻种。2