复方巴戟天健骨颗粒的水提工艺优化研究_龚燕珍.pdf

药剂复方巴戟天健骨颗粒的水提工艺优化研究龚燕珍，严锦贤，倪立坚，李 颖，王和鸣（.光泽县医院，福建光泽；.福建中医药大学附属第二人民医院，福建福州；.福建中医药大学，福建福州）摘要：目的优化复方巴戟天健骨颗粒的水提工艺。方法单因素考察溶媒使用量；以丹酚酸 等三种有效成份含量和干浸膏率的加权评分为综合指标，正交试验研究复方巴戟天健骨颗粒的水提工艺，并进行工艺验证。结果最佳工艺为药材浸泡 ，倍水提取 次，每次。结论水提工艺合理、可靠、可行。关键词：复方巴戟天健骨颗粒；丹酚酸；川续断皂苷；淫羊藿苷；正交设计试验中图分类号：文献标识码：文章编号：（）作者简介：龚燕珍，女（）。学历：学士。职称：主管药师。从事医院药学和制剂的研究。通信作者：严锦贤，男（）。学历：硕士。职称：主任中药师。基金项目：福建省医疗机构中药制剂重点实验室（福建中医药大学），（.，；.，；.，）：.，.：，.，.：；复方巴戟天健骨颗粒是基于王和鸣教授的临床方剂“复方巴戟天合剂”开发而成的纯中药医院制剂，用于治疗股骨头坏死（）。为保证其质量并为下步工艺升级做好研究基础，本项目采用正交试验法，以丹酚酸、川续断皂苷、淫羊藿苷含量和干浸膏率的加权综合评分优选复方巴戟天健骨颗粒的水提取工艺。仪器与材料.仪器 高效液相色谱仪（美国赛黙飞）、万分之一分析天平（梅特勒托利多仪器上海有限分公司）、超声波清洗器（宁波新芝生物科技股份有限公司）、超纯水机（四川卓越水处理设备有限公司）。.材料 丹参、续断、淫羊藿等中药饮片（购自于福建同春药业股份有限公司）；丹酚酸 标准品（绿叶生物科技有限公司，批号：）、川续断皂苷标准品（中国药品生物制品检定所，批号：）、淫羊藿苷标准品（绿叶生物科技有限公司，批号：）。.色谱试剂与耗材 甲醇、乙腈、磷酸均为色谱纯；色谱柱（.，）；水为超纯水。方法与结果.水提工艺的正交设计.吸收溶媒量考察：按 处方量称取药材，在常温下加 倍超纯水浸泡，需没过药材，每 滤过一次，用量筒量取滤液体积并记录计算药材吸水率。在 、各温度下分别实验，经综合评价，原药材最合适浸泡 。.提取工艺优化：按照表 所列因素水平，按复方巴戟天健骨颗粒处方比例称取中药饮片，设计正交实验方案依次以纯水提取，将提取液用 目筛网过滤，滤液减压浓缩，完全海峡药学 年 第 卷 第 期干燥至干膏，检测含量（丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷）及出膏率，每个试验平行制备 个样品，每个样品平行进样两次测定。通过直观分析和方差分析，确定各因素对出膏率及各有效成分含量的影响顺序。结合经济效益确定最佳提取工艺。表 正交实验因素水平表水平 提取时间 提取次数 加水倍数.含量测定.对照品溶液的制备：将以上所述三种标准品用甲醇溶解分别制成对照品溶液（丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷）。.供试品溶液的制备：取.中 种干膏粉末各约，精密称量，用甲醇超声 至完全溶解并转至 棕色容量瓶，摇匀定容后经.微孔滤膜过滤即得。.色谱条件：流动相：乙腈（）.磷酸水溶液（），梯度洗脱：，；，；，；，；，；，；，流速.；检测波长为 。.精密度试验：分别精密吸取.项三个对照品溶液各，按.项下色谱条件进样检测，连续 次，测得丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷平均峰面积分别为.、.、.，分别为.、.、.，仪器的精密度良好。.稳定性和重复性试验：精密吸取.项下制备的第 号供试液，按.项下色谱条件进样。结果见表，可见色谱系统重复性良好，供试品溶液性质在 内稳定，可以满足日常试验要求。表 稳定性与重复性试验分析表稳定性间隔时间（）图谱相似度.重复性进样次数图谱相似度.回收率试验：取 份.项下制备的第 号供试液，分为三组，每组分别加入适量的丹酚酸、川续断皂苷、淫羊藿苷标准品制成 份供试品溶液，按.项下色谱条件测峰面积，计算其平均加样回收率，分别为.、.、.（分别为.、.、.），表明试验方案可行。.有效成分含量测定：采用外标一点法计算复方巴戟天健骨颗粒中丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷的含量。.出膏率考察 根据公式（蒸发皿与药质量总和蒸发皿重量）投药量，计算不同提取工艺的出膏率。.试验结果以及数据分析.将 份样品按照上述方法制备供试品溶液，并进行含量测定，综合评分 丹酚酸 .淫羊藿苷 .川续断皂苷.初膏率.，其结果见表，方差分析结果见表。表 （）正交设计实验方案及结果序号 次空列峰面积丹酚酸 淫羊藿苷川续断皂苷出膏率 综合评分.均值.均值.均值.极差.从以上分析可以看出，最佳组合为，即正交实验中的第 个工艺。因素即提取次数对综合评分影响显著，因素和 因素影响较小，参考实际生产情况及经济因素，可将复方巴戟天健骨颗粒最佳水提取工艺确认为：倍的加水 .量提取 次，每次 。表 水提正交方差分析表方差来源离均差平方和自由度 值显著性.误差.工艺验证：按上述确定的提取工艺条件，平行制备 份供试品溶液，检测其出膏率及有效成分含量，进行验证试验。结果显示，复方巴戟天健骨颗粒提取液干膏中丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷的含量分别为.、.、.，分别为.、.、.，重现性好。讨论.本实验在一个色谱条件同时测定多个组份，方中主药巴戟天的主要成分巴戟天多糖未能在优选的色谱条件下实现有效的分离。淫羊藿、丹参、川续断作为复方巴戟天健骨颗粒处方中重要的三味中药，起到补益肝肾、活血化瘀、袪风除湿等作用，其主要成分丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷药理作用也得到临床证实，具有改善微循环、纠正脂质代谢、促进骨细胞增殖、抗骨细胞凋亡等多种作用。以上三个成份同时在一个色谱条件下快速准确地测定含量，不仅大大减少了实验检测次数，还能更全面地反映工艺的优化情况。.前期做供试品溶液制备方法考察时，分别完成提取溶剂、提取方法、提取时间的单因素考察，发现用 甲醇以超声提取 所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度结果较优。前期做色谱条件考察时，完成了四个常用检测波长（、）的考察，通过比较色谱峰数目、峰形和峰强度，以及分离度等指标，发现不同检测波长对复方巴戟天健骨颗粒指纹图谱有显著影响，采用 检测波长所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度均优于 、和 波长。参考文献孙克民，王和鸣，王平，等.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠模型血液流变学和血脂的影响.中国中医骨伤科杂志，（）：.孙克民，王和鸣，胡娟，等.复方巴戟天合剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.福建中医药，（）：.孙克民，王和鸣，林久茂.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠血管内皮生长因子表达的影响.中国实验方剂学杂志，（）：.李文顺 孙克民 王和鸣 等.复方巴戟天合剂治疗股骨头缺血性坏死的临床研究.中国中医骨伤科杂志，（）：.倪立坚，李颖，王和鸣.复方巴戟天健骨颗粒的质量标准升级研究.海峡药学，（）：.碳酸锂片的制备及其体内外评价研究罗 隽，李峥嵘，左瑾蓉，唐 杰，陈 涛，秦杰峰，王玲兰（株洲千金药业股份有限公司，湖南株洲）摘要：目的 制备碳酸锂片并考察体内外释药特性。方法 采用体外溶出评价筛选碳酸锂片中原料粒径、马铃薯淀粉用量、硬脂酸镁用量；采用生物等效性试验比较自制制剂与参比制剂在健康受试者体内的药动学行为。结果 碳酸锂片处方为碳酸锂 、小麦淀粉 、马铃薯淀粉 、硬脂酸镁。自制制剂与参比制剂的溶出曲线 因子均大于；两种制剂在健康受试者体内的药动学参数均无显著性差异，自制碳酸锂片相对生物利用度为（.）。结论 成功制备碳酸锂片，其体外溶出和体内药动学行为与参比制剂相似。关键词：碳酸锂片；生物等效性；体内外评价中图分类号：文献标识码：文章编号：（）作者简介：罗 隽，女（）。学历：硕士学位。职称：中级工程师。研究方向：药物制剂。通讯作者：王玲兰，女（）。学历：硕士学位。职称：中级工程师。，（.，.，）：.，海峡药学 年 第 卷 第 期