肺泡灌洗液联合mNGS在免...制合并肺部感染病原学的应用_庞晴晴.pdf

，（）：，“”，（）：，：，（）：收稿日期：肺泡灌洗液联合 在免疫抑制合并肺部感染病原学的应用庞晴晴 白梦茹 尤青海 【摘要】目的 了解肺泡灌洗液联合宏基因组下一代测序技术（）在免疫抑制合并肺部感染中病原学诊断的应用价值。方法 回顾分析 年 月 年 月确诊为肺部感染的免疫抑制患者 例及非免疫抑制患者 例的临床资料，同时收集患者痰培养 痰涂片、肺泡灌洗液联合 病原学的检出结果，针对肺泡灌洗液联合 在免疫抑制合并肺部感染患者中的诊断及治疗指导效能进行分析，并绘制 曲线。结果 免疫抑制组中肺泡灌洗液联合 检出病原体阳性率高于常规痰培养，差异有统计学意义（.）；、住院费用、住院天数等指标免疫抑制组均高于非免疫抑制组，淋巴细胞绝对计数低于非免疫抑制组（.）。将免疫抑制组分为 个亚组，其中肾移植组住院天数及住院费用均高于外在激素类免疫抑制组（.）；而淋巴细胞绝对计数及中位年龄均低于外在激素类免疫抑制组（.）；免疫抑制组各亚组间肺泡灌洗液联合、痰培养与预后之间关系无统计学差异（.）。肺泡灌洗液联合 阳性患者的预后优于阴性的患者，差异有统计学意义（.）。曲线显示肺泡灌洗液联合 针对免疫抑制合并肺部感染患者（.）具有良好的治疗指导效能。结论 肺泡灌洗液联合 可提高免疫抑制合并肺部感染患者病原学诊断阳性率，有利于快速检测相关病原体，进一步指导治疗。【关键词】免疫抑制；肺部感染；病原体检测；肺泡灌洗液；宏基因组下一代测序技术 ，【】（），（.）；，：基金项目：安徽省自然科学基金（）作者单位：安徽 合肥，安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科通信作者：尤青海，：临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期（.），（.），（.），（.），（.）（.），【】；肺部感染发病率与病死率均较高，耐药情况较为严重。近年来免疫抑制患者数量急剧增加，机体免疫状态低下常并发重症肺部感染，因此早期精确识别病原体对提高肺炎治愈率、优化临床抗菌药物的使用至关重要。传统的病原学检测方法中，痰培养及涂片标本合格率低，且易受口腔、咽喉部等上呼吸道内定植菌群的影响。支气管镜下取痰较常规取痰病原菌检出率高，不易受到污染，可同时进行治疗。宏基因组下一代测序技术（，）能直接从患者的临床样本中鉴定病原体，实现对病原体检测的无偏倚及广覆盖，对罕见的病原体有诊断价值。本研究针对肺泡灌洗液联合 在免疫抑制合并肺部感染病原学诊断的应用价值，并为临床治疗方案的选择提供依据。资料与方法一、一般资料收集 年 月 年 月确诊为肺部感染的免疫抑制患者 例及非免疫抑制患者 例的临床资料，并进行回顾性分析。其中男性 例、女性 例。所有患者的临床症状、血液检测及胸部 均提示肺炎（排除肺水肿、非感染性肺间质性疾病等），且符合社区获得性肺炎 医院获得性肺炎诊断标准。其中将免疫抑制患者分为四个亚组：肾移植组 例，组 例，恶性肿瘤组 例及外在激素类免疫抑制组（其它组）例。所有患者及家属均签署相关知情同意书。本研究中的受试者均知情同意，研究经安徽医科大学第一附属医院伦理委员会批准（）。二、纳入标准及排除标准 纳入标准：）所有患者均需符合我国社区获得性肺炎 医院获得性肺炎诊断标准。）免疫抑制组包括血液恶性肿瘤、造血干细胞移植或实体器官移植及艾滋病、实体肿瘤接受免疫治疗及长期服用免疫抑制药物或糖皮质激素治疗的自身免疫性疾病的患者。排除标准：）合并全身难以控制的感染性疾病。）合并精神疾病或认知功能障碍。三、方法收集接受支气管镜检查并送检肺泡灌洗液联合 检测的肺部感染患者 例，分为免疫抑制组和非免疫抑制组；两组患者入院后均完善生命体征监测、血常规、肝肾功能、及胸部 等检查。首剂抗生素前经鼻或者气管插管吸痰留取痰培养 痰涂片（连续 天）；同时经患者及家属同意后行支气管镜肺泡灌洗（灌洗前均完善胸部 检查，明确感染病灶部位），灌洗液送检微生物培养、试验、试验、。其中免疫抑制组男 例，女 例，年龄 岁；非免疫抑制组男 例，女 例，年龄 岁。四、临床观察指标观察并记录两组患者的病原体检出情况、感染指标、临床症状和治疗疗程，并对治疗效果做出评估。具体评估标准如下：（）好转：临床症状改善明显或完全消失，病原菌显示部分或完全清除，胸部临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期 提示炎症吸收或消失；（）无好转：症状未出现好转趋势，维持当前现状，甚至存在恶化趋势。针对肺泡灌洗液联合 在免疫抑制合并肺部感染患者中的诊断及治疗指导效能进行分析，并绘制 曲线。五、统计学方法数据统计应用 .和 .，计量资料以中位数（四分位数）表示，采用秩和检验进行比较；计数资料以例数（构成比）表示，采用卡方检验进行比较。.为差异具有统计学意义。结 果一、两组患者基本资料比较将完善支气管镜检查并送检肺泡灌洗液联合 检测的患者分为免疫抑制组与非免疫抑制组，非免疫抑制组中位年龄高于免疫抑制组，差异具有统计学意义；免疫抑制组、住院费用、住院天数等指标均高于非免疫抑制组，淋巴细胞绝对计数低于非免疫抑制组，差异具有统计学意义。肺泡灌洗液联合 检出病原体的阳性率在免疫抑制组高于非免疫抑制组，差异有统计学意义，痰培养的阳性率在两组之间的差异无统计学意义（见表）。免疫抑制组中肺泡灌洗液联合（：.）检出病原体阳性率高于痰培养（：.），差异具有统计学意义（.）。表 两组患者基本资料分组非免疫抑制组（）免疫抑制组（）年龄（，），岁（，）（，）性别（）男（）（）女（）（）基础疾病（）非呼吸（）（）有呼吸（）（）无（）（）发热（）无（）（）有（）（）咳嗽（）无（）（）有（）（）咳痰（）无（）（）有（）（）呼吸困难（）无（）（）有（）（）咯血（）无（）（）有（）（）胸痛（）无（）（）有（）（）预后（）无好转（）（）好转（）（）住院费用（，），元（，）（，）住院天数（，），天（，）（，）白细胞计数（，），（，）（，）中性粒细胞百分比（，），（，）（，）淋巴细胞绝对计数（，），（，）（，）淋巴细胞百分比（，），（，）（，）（，），（，）（，）（，），（，）（，）试验（，），（，）（，）试验（，），（，）（，）（）阴性（）（）阳性（）（）痰培养（）阴性（）（）阳性（）（）注：临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期 二、肺泡灌洗液联合 检出两组患者合并肺部感染病原体特点其中免疫抑制组混合感染占比高（.），非免疫抑制组细菌感染占比高（.）（见表）。表 阳性患者检出病原学的构成情况病原学免疫抑制组非免疫抑制组细菌 真菌 病毒 混合 其它 合计 三、肺泡灌洗液联合 及痰培养两种检测方法与预后的关系肺泡灌洗液联合 阳性患者的预后优于阴性患者，差异有统计学意义（.），痰培养结果与预后的关系无统计学意义（.）（见表）。表 两种检测方法与预后的关系分组无好转好转值（）阴性（）（）阳性（）（）痰培养（）阴性（）（）阳性（）（）合计 注：四、免疫抑制组各亚组间基本资料四组间的性别比例差异具有统计学意义，其中肾移植组住院天数及住院费用均高于外在激素类免疫抑制组，差异具有统计学意义（.）。而淋巴细胞绝对计数及中位年龄均低于外在激素类免疫抑制组，差异具有统计学意义（.）（见表）。免疫抑制组各亚组间肺泡灌洗液联合、痰培养与预后之间关系差异无统计学意义（.）。五、免疫抑制组各亚组间肺泡灌洗液联合 检出病原学特点各亚组间混合感染及真菌占比均较高（见表）。六、肺泡灌洗液联合 在不同患者中的治疗指导效能 曲线 显示：.；：.；曲线 显示：.；：.；曲线 显示：.；：.（见图）。讨 论 是一种无偏倚的测序技术，其敏感性和特异性均优于传统的病原学检测。既往文献报道 受先前抗生素暴露的影响较小，对病原体的鉴别更加准确。能协助诊断免疫缺陷患者的重度、混合型、复杂性及难治性肺部感染，对于免疫功能低下患者的感染，其快速反馈可能会加速临床决策。本次研究结果发现，在临床症状表现中，两组患者差异主要体现在发热、咳痰及咯血等方面。免疫图 肺泡灌洗液联合 在不同分组中的治疗指导效能：预测全体患者治疗指导效能的 曲线；：预测免疫抑制组的治疗指导效能的 曲线；：预测非免疫抑制组的治疗指导效能的 曲线。临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期表 免疫抑制各亚组间基本资料肾移植（）（）恶性肿瘤（）其它（）住院费用（，），元（，）（，）（，）（，住院天数（，），天（，）（，）（，）（，）年龄（，），岁（，）（，）（，）（，）白细胞计数（，），（，）（，）（，）（，）中性粒细胞百分比（，），（，）（，）（，）（，）淋巴细胞绝对计数（，），（，）（，）（，）（，）淋巴细胞百分比（，），（，）（，）（，）（，）（，），（，）（，）（，）（，）（，），（，）（，）（，）（，）试验（，），（，）（，）（，）（，）试验（，），（，）（，）（，）（，）预后（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）性别（）男（）（）（）（）女（）（）（）（）发热（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）咳嗽（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）咳痰（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）呼吸困难（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）咯血（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）胸痛（）无（）（）（）（）有（）（）（）（）（）阴性（）（）（）（）阳性（）（）（）（）痰培养（）阴性（）（）（）（）阳性（）（）（）（）注：表 阳性患者检出病原学的构成情况病原学肾移植肿瘤其它细菌真菌病毒混合阴性总计抑制组淋巴细胞绝对计数水平低于非免疫抑制组，考虑免疫抑制组患者淋巴系统免疫功能受损所致。在免疫抑制组中，肾移植组淋巴细胞绝对计数低于外在激素类免疫抑制组，也有研究曾报道淋巴细胞绝对计数可预测肾移植术后复发巨细胞病毒感染，这为临床诊疗提供新思路。与既往报道一致，在本次研究中，免疫抑制组中肺泡灌洗液联合 检测病原体的阳性率高于痰培养，表明相比痰培养来说 具有良好的诊断效能。我们通过肺泡灌洗液联合 检测病原体阳性的标本中发现，免疫抑制组混合感染较多，非免疫抑制组细菌感染较多，亚组之中病原体分布倾向于混合感染及临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期真菌感染，难以鉴别，这与 等的研究结果一致，考虑可能与免疫抑制组长期处于疾病易感状态，间断应用抗生素治疗等原因有关，表现在肾移植组中尤为显著。通过分析治疗指导效能评估结果，我们发现肺泡灌洗液联合 阳性患者的预后优于阴性患者，提示根据 结果及时调整治疗方案，可使临床获益。同时我们发现，免疫抑制组的各亚组间肺泡灌洗液联合 及痰培养与预后之间的关系无统计学意义，考虑可能与样本病例数偏少，且肺部感染程度的不同可能引起数据偏倚。本研究中，曲线显示肺泡灌洗液联合 在免疫抑制组具有良好的治疗指导效能，故免疫抑制合并肺部感染患者可考虑尽早完善肺泡灌洗液联合 检测，以提高疾病诊断效能及治疗指导效能，促进康复。免疫抑制合并肺部感染患者病情反复，极易合并重症肺炎，导致病程长，疾病负担重，。研究发现 能迅速识别病原体，针对病原体尽早行抗感染治疗，并及早调整免疫治疗方案，帮助临床决策。本研究通过结合患者症状、肺部体征、影像学及实验室指标，综合判读检测结果，通过分析病原学，探究肺泡灌洗液联合 的诊断及治疗指导效能，为完善抗生素治疗方案提供更多依据。综上所述，免疫抑制合并肺部感染患者病情进展快，危重症多，在疾病早期完善肺泡灌洗液联合 可提高病原体检出阳性率，同时联合检测可以弥补单项检测的不足，及时调整治疗方案，改善预后。由于本研究属回顾性分析，相关资料不够完全，且检测样本仅为肺泡灌洗液，导致本研究内容相对局限。后期将扩大样本量及标本种类。参考文献 ，（）：，：秦蓉，何平，张颐豪，等 肺部感染患者痰液与肺泡灌洗液病原菌分布及培养结果分析 上海交通大学学报（医学版），（）：，（）：瞿介明，曹彬 中国成人社区获得性肺炎诊断和治疗指南（年版）中华结核和呼吸杂志，（）：施毅 中国成人医院获得性肺炎与呼吸机相关性肺炎诊断和治疗指南（年版）中华结核和呼吸杂志，（）：，：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，：，（）：，：，：李颖，麻锦敏 宏基因组学测序技术在中重症感染中的临床应用专家共识（第一版）感染、炎症、修复，（）：中华医学会细菌