2023年ATP荧光检测仪指导（教学课件）.ppt

技术培训 Better Hygiene,Better Life 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 By Jane ATP Testing System 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP:Adenosine-5-tripholsphate ATP is an energy substance in cells ATP exists in all kinds of living cells.Dead cells dont have ATP,because it will be analyzed by some extracellular enzyme.The amount of intercellular ATP present varies with cell size,health,the type of cell,etc.腺嘌呤核苷 磷酸基团 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 细胞内ATP含量受细菌种类，生长状态，周围环境的影响。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP平均值平均值2.5x10-18mol/cell ATP 生物发光技术可以检测细菌和真菌。生物发光技术可以检测细菌和真菌。ATP 生物发光技术只能检测活细胞。生物发光技术只能检测活细胞。ATP生物发光技术无法分辨微生物细胞生物发光技术无法分辨微生物细胞的种类，只可检测微生物总数的种类，只可检测微生物总数 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP生物发光技术生物发光技术 Why ATP+D-Luciferin+O2 AMP+ppi+Oxyluciferin+CO2+light Luciferase Mg2+The firefly bioluminescence technology Given an excess concentration of D-luciferin and luciferase,the light intensity emitted is proportional to the concentration of ATP More ATP more intensive the light We can determine the quantity of living cells(bacteria)according to the light intensity 细菌细胞越多，ATP含量也就越高，在同等的检测范围之内，发光值也越强。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP浓度与细胞数量成正比 杂菌悬液与ATP浓度的关系 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP 荧光检测技术背景介绍 1000Fmol ATP 4x105cells 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP发光值不能严格对应微生物数量，发光值不能严格对应微生物数量，发光值对于微生物数量为正相关。发光值对于微生物数量为正相关。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 Comparison Quantify the microorganisms Traditional way:Colony counting Advantage:Easy to distinguish the category of bacteria Disadvantage:The complexity of the process The requirements for high skills and time Rapid detection method:ATP bioluminescence Advantage:Easy to operate Dont need skills Rapid Disadvantage:Cant identify the category of bacteria 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 乐宇乐宇 ATP 检测产品 I-GenieTM 手持便携式ATP 荧光检测仪 CleanSense TM 外表洁净度检测试剂盒 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 CleanSense 外表洁净度检测试剂盒外表洁净度检测试剂盒 冻干粉：荧光素和荧光素酶 优点：保存时间长，能够耐受一定程度的温差变化，在高温环境下，更稳定。采样棒：上有提取液 优点：能在短时间内提取出细胞内90%以上的ATP，并且能迅速破坏细胞外ATP酶，使结果更为真实。稀释液：快速溶解冻干粉 为发光反响提供一个稳定的液体环境。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 使用方法：使用方法：Step 5.放入放入ATP荧光检测仪检测荧光检测仪检测 Step 4.洗脱样品洗脱样品 Step 3.涂抹取样涂抹取样 Step 2.溶解冻干粉溶解冻干粉 Step 1.开机自检开机自检 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP 检测技术的优点 无需培养，仅需15s，即可得到结果。待测样品无需预处理，操作简便 操作人员无需培训，容易上手 灵敏度高 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP检测的意义检测的意义 HACCPHazard Analysis Critical Control Point 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP检测的意义检测的意义 卫生与清洗 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP检测的意义检测的意义 清洁剂配制 调整浓度 清洁程序 肉眼观察清洁效果 可见污垢 无可见污垢 验证 I-Genie TM ATP荧光检测 继续以下工作 继续或重新清洗和复查 重新评估清洁人员的清洁工作，整改措施 重新清洁 验证 不合格 警告 合格 完善清洁程序完善清洁程序 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP检测技术的应用 食品与饮料加工 用于检验生产卫生平安体系，确保符合HACCP的规定，辅助监督人员的工作并快速确定食品加工设备的洁净度。工业和制造 快速简便确实认产品外表污染和清洁效果 医疗 方便CSSD消毒供给中心，central sterile supply department以及其他卫生工作人员在短时间内客观地证实外表清洁的有效性。食品效劳 可以在一分钟内快速准确检测出由生物膜及细菌残留所造成的污染，实时监测结果可以快速识别问题区域，保证及时发现食品平安问题，保证质量 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 问题与本卷须知 CleanSenseTM 外表洁净度检测试剂盒 1.为什么在溶解冻干粉之后需要放置一段时间？冻干粉溶解之后，短时间放置可使试剂背景值降低，从而更有利于检出痕量的ATP。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 2.为什么采样棉签是湿润的？采样棒上含有高效裂解剂，能在短时间内裂解微生物细胞，更大限度地释放细胞内ATP。注意：x请防止采集残水过多的外表。x使用采样棉签时，不要触碰棉签头，防止污染棉签，使检出值升高。x采样棉签翻开后，请立即使用，防止长时间放置，造成棉签污染。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 3.为什么在采集样品时，要注意涂抹手法，并保证每次涂抹都要一致？在采样时，请尽可能的增大棉签头与待测外表的接触面积，在采样的不断旋转棉签，使样品能均匀分布在棉签外表，这样有利于裂解剂完全作用于采集到的细胞，更完全地释放出细胞内的ATP。为了保证检测结果的重现性和可靠性，请注意同一位点每次涂抹时手法都要一致。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 10cm 4.为什么在洗脱样品后要取出采样棉签？由于I-Genie ATP 荧光检测仪的检测窗口处于检测池底部，所以洗脱样品之后，需取出棉签，防止棉签头遮蔽检测窗口。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 试剂盒使用前需平衡室温试剂盒使用前需平衡室温 取出冷藏中的试剂盒后需在环境中放置取出冷藏中的试剂盒后需在环境中放置10分分钟后再使用，否那么结果会不准确偏低钟后再使用，否那么结果会不准确偏低 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 CleanSenseTM 外表洁净度检测试剂盒的存外表洁净度检测试剂盒的存放放 试剂盒应冷藏保存，温度为试剂盒应冷藏保存，温度为28 2128下可以保存下可以保存8周，请注意避光保存周，请注意避光保存 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 空白试剂的合理检测值空白试剂的合理检测值 空白试剂允许有正常的背景值，为0-10RLU 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 检测瓶置入仪器前保持枯燥与干净检测瓶置入仪器前保持枯燥与干净 尤其是从冷藏取出后会有冷凝水，可用枯燥的布擦尤其是从冷藏取出后会有冷凝水，可用枯燥的布擦拭干，然后再放入仪器检测，以防止检测腔污染。拭干，然后再放入仪器检测，以防止检测腔污染。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 不要将采样棒遗留在仪器中不要将采样棒遗留在仪器中 否那么将可能污染检测腔！否那么将可能污染检测腔！上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 试剂盒检测完后的处理试剂盒检测完后的处理 本试剂盒使用的容器以及内含的试剂均为无害的物质，无需灭菌再抛弃。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 问题与本卷须知问题与本卷须知 I-Genie 手持便携式手持便携式ATP荧光检测荧光检测仪仪 充电与电池持续时间充电与电池持续时间 本设备可外接电源适配器工作或者使用两节AA，LR6或类似的电池。两节电池可以维持250次测试。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 机器内存机器内存 I-GenieTM 手持便携式ATP检测仪可储存500组数据，包括检测时间，日期和RLU值。上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 仪器操作时的环境温度要求仪器操作时的环境温度要求 1.操作时最正确温度为操作时最正确温度为540 2.存放时最适温度为存放时最适温度为-10oC 50oC 3.待测外表的温度对检测无影响如：高温的外表待测外表的温度对检测无影响如：高温的外表 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 检测腔假设被污染，不要自行清洁检测腔假设被污染，不要自行清洁!仪器外壳可用柔软的抹布仪器外壳可用柔软的抹布+温和的清洁剂清洁温和的清洁剂清洁 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 乐宇乐宇 ATP检测产品检测产品 其他手持式其他手持式ATP检测产品检测产品 操作简单，无需繁琐设置 界面复杂，操作人员需经过培训 检测结果稳定，重现性高 检测结果不稳定 仪器背景噪音低 仪器背景噪音高 试剂保质期长，可耐受一定的温差变化 保质期相对较短，对运输保存温度要求较高 一体化的便携检测箱设计 手持、放置均可使用 无便携箱设计，只可手持检测 金属外壳防氧化，抗老化性强，增加使用年限 塑料外壳防氧化，抗老化性弱，缩短使用年限 特殊材质避光设计 无附加避光设计，且机盖为塑料材质，容易老化降低避光性 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 检测结果稳定检测结果稳定 1.检测窗位于检测池底部，检测结果不受仪器手持和放置角度的影响。检测窗口 其他手持式其他手持式ATP检测仪检测仪 检测窗口 I-Genie TM ATP检测仪检测仪 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 检测窗口 检测结果稳定检测结果稳定 2.CleanSenseTM与其他试剂盒重现性的比较 CleanSense TM外表洁净度检测试剂盒 其他ATP检测试剂 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 CV=8.4%仪器背景噪音低仪器背景噪音低 铝制外壳，密封避光效果更好，上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 ATP 荧光检测系统的质控比较荧光检测系统的质控比较 ATP阳性阳性物对照物对照检测检测 校准检查校准检查 校准校准 原理 特点 原理 特点 I-Genie ATP阳性对照品 外置功能（发光二极管）1.波长与荧光相同 2.不定期人工操作，节省用户时间 3.对人体无害 利用ATP荧光 与实际光完全一致 Hygiena Biocontrol ATP阳性对照品 额外耗材（同位素放射棒）1.波长与荧光不同 2.定期人工操作 3.对人有伤害 同位素放射棒 波长与荧光不同 上海乐宇生物科技上海乐宇生物科技 总总 结结 ATP检测的是物体外表的总菌数。ATP检测可以立即告知物体外表的洁净度状况。ATP检测可以作为即时预警，弥补传统方法的缺乏，但又与传统培养法相互补充。根据ATP检测数据趋势掌控清洗卫生状况。A