紫菜和黑木耳中脂肪提取方法及脂肪酸组成研究_吴丽华_.pdf

食品工业 2023 年第44卷第 2 期 98 工艺技术紫菜和黑木耳中脂肪提取方法及脂肪酸组成研究吴丽华，洪霞*，王燕姣，马燕，钱滢文，何海宁1.甘肃中商食品质量检验检测有限公司（兰州 730010）；2.甘肃省商业科技研究所有限公司（兰州 730010）摘要采用索氏抽提法和酸水解法分别对市售紫菜和黑木耳各10种产品中的脂肪进行提取,利用气相色谱仪对其脂肪酸组成进行定性分析研究。结果表明:索氏抽提法和酸水解法测得的紫菜中平均脂肪含量分别是0.17 g/100 g和2.67 g/100 g,黑木耳中平均脂肪含量分别是0.12 g/100 g和2.26 g/100 g;其中,紫菜中主要脂肪酸为癸酸甲酯、十五碳酸甲酯和山嵛酸甲酯,而黑木耳中主要脂肪酸为十六碳酸甲酯、油酸甲酯和花生酸甲酯。比较发现,酸水解法提取脂肪效率远高于索氏抽提法,尤其对于脂肪含量极低的样品,酸水解法提取效率更高。该方法耗时短、灵敏度高,为其他样品中脂肪含量提取提供技术支撑。关键词紫菜;黑木耳;脂肪;索氏抽提法;酸水解法;气相色谱仪Extraction Method of Fat in Laver and Black Fungus and Study on Composition of Fatty AcidWU Lihua,HONG Xia*,WANG Yanjiao,MA Yan,QIAN Yingwen,HE Haining1.Gansu Zhongshang Food Quality Test and Detection Co.,Ltd.(Lanzhou 730010);2.Gansu Business Science and Technology Institute Co.,Ltd.(Lanzhou 730010)Abstract The soxhlet extraction method and the acid hydrolysis method were used to extract fat content from 10 different kinds of laver and black fungus,and gas chromatograph was used to analyze the fatty acid composition.The results showed that the average fat content of laver by soxhlet extraction method and acid hydrolysis method was 0.17 g/100 g and 2.67 g/100 g,respectively,and the average fat content of black fungus was 0.12 g/100 g and 2.26 g/100 g,respectively.The main fatty acids in laver were methyl decanoate,methyl pentadecarbonate and methyl behenate,while the main fatty acids in black fungus were methyl hexadecarbonate,methyl oleate and methyl arachidonic acid.It was found that the efficiency of acid hydrolysis was much higher than that of soxhlet extraction,especially for the samples with very low fat content,and the efficiency of acid hydrolysis was higher.This method is sensitive and takes time shorter,to provide technical support for the extraction of fat content in other samples.Keywords laver;black fungus;fat;Soxhlet extraction;acid hydrolysis;gas chromatograph*通信作者；基金项目：甘肃省中央引导地方科技发展专项项目；甘肃省青年科技人才托举工程项目；甘肃省动物源制品安全分析与检测技术重点实验室（编号：18JR2RA024）研究表明：紫菜中蛋白质含量为34%，铁、磷等维生素含量为24%，具有很高的营养价值，被誉为理想的营养佳品之一1-3；紫菜的主要功效有软坚散结、清热化痰、利咽止咳、养心除烦、利水除湿4-5，主治瘿瘤瘰疬、咳嗽痰稠、咽喉肿痛、烦躁失眠、脚气水肿、小便淋痛等症6-8。被称之为“菌中之冠”的木耳，又称黑木耳，由古书记载，具有“益气补肌，轻身强志”的功效9。黑木耳中碳水化合物含量65%，蛋白质含量10.6%，铁、钙、磷等微量元素总含量1.86%，还含有丰富的脑磷脂、卵磷脂等营养物质，被誉为“素中之荤”10-12，其中蛋白质、维生素和铁的含量均比白木耳高出1倍13-14，其蛋白质中包括多种氨基酸，尤其以天门冬氨酸、谷氨酸、克氨酸、懒氨酸等含量最为丰富15。木耳中含有一种特殊的植物胶质，有较强的吸附作用，可将残留在人体消化系统的灰尘杂质集中吸附并排出体外，从而起到排毒作用16。对紫菜和黑木耳中主要营养成分的提取和测定方法有很多，如：皮胜涛等17采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）联用技术，建立一种优化的超声萃取法测定紫菜中碘含量，该方法简单、可靠，线性关系好，检出限低；曾臻等18建立ICP-MS同时测定干紫菜中28种元素的检测方法，通过对干紫菜中元素含量测定，可为干紫菜质量检测、质量评价及其产业可持续发展提供科学依据；邱伟芬等19以条斑紫菜为原料，采用水提醇沉法提取条斑紫菜粗多糖，用过氧化氢和抗坏血酸联合的方法对条斑紫菜粗多糖进行降解，对降解多糖进行分离纯化后，并对纯化的组分进行化学成分分析、结构分析、体外免疫活性和体外抗氧化活性研究。由于紫菜和黑木耳基质复杂、脂肪含量低、提取过程耗时长等特点，对紫菜和黑木耳中脂肪的测定研究很少见诸报道。试验基于索氏抽提法和酸水解法分别提取紫菜和黑木耳中的脂肪含量，同时对其提取过程中的影响因素进行优化，并通过气相色谱仪对其脂 99 工艺技术 食品工业 2023 年第44卷第 2 期肪酸组成成分进行定性分析研究。1材料与方法1.1材料与仪器1.1.1材料与试剂紫菜、黑木耳样品各10种（市售）。石油醚（沸程3060，分析纯，天津市津东天正精细化学试剂厂）；盐酸、无水乙醚（均为分析纯，西陇科学股份有限公司）；乙醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。1.1.2主要仪器和设备JYL-C012粉碎机（九阳股份有限公司）；XS225A-SCS电子天平（普利赛斯上海天美天平仪器有限公司）；HH-S16S恒温水浴锅（金坛市大地自动化仪器厂）；DHG-9073BS-电热恒温鼓风干燥箱（上海新苗医疗制造有限公司）；Agilent 7890B气相色谱仪安捷伦（上海）科技有限公司。1.2方法1.2.1 索氏抽提法样品处理。将样品打碎均匀后称取25 g（含油量少的样品称样量相对较大），全部移入滤纸筒内，将包好样品的滤纸筒放入101105 干燥箱内烘4 h至干燥无水5备用。样品抽提。将滤纸筒放入索氏抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的平底烧瓶，由冷凝管上端加入石油醚至瓶内溶剂的2/3处，于水浴上加热，使石油醚不断回流，连续抽提8 h。取下烧瓶后，回收石油醚，待瓶内溶剂剩余12 mL时在水浴上蒸干，于1005 干燥1 h，放干燥器内冷却0.5 h后称量。1.2.2酸水解法样品消化。称取约25 g（含油量少的样品称样量相对较大）试样置于试管中，加入8 mL水，加入10 mL盐酸。将试管放入7080 水浴中，每隔510 min搅拌1次，至试样消化完全。样品提取。取出试管，加入10 mL乙醇，冷却后移入具塞三角瓶中，以25 mL无水乙醚分数次洗试管，一并倒入三角瓶。加塞振摇1 min，放气后盖塞静置12 min，用乙醚-石油醚等比混合液冲洗瓶塞及瓶口附着的脂肪。静置1020 min，待分层清晰后，吸出上清液于已恒重的烧杯内，加5 mL乙醚-石油醚等比混合液于三角瓶内，振摇、静置后仍将上层液吸出，放入烧杯内，蒸干、称量。1.2.3 色谱条件色谱柱HP-88（100 mm0.25 mm0.25 m）；柱温150（2 min）8/min240（7 min）；汽化温度250；检测温度250；氮气5.0 mL/min；进样方式采用不分流进样；进样量1 L。分别吸取混合标准液及样品净化液注入气相色谱仪中，记录色谱图，以保留时间定性，以样品和标准样品的峰面积比较定量。2结果与分析2.1紫菜脂肪含量提取试验探索索氏抽提法和酸水解法提取不同种类紫菜样品中的脂肪含量（质量百分数），每一样品重复测定6次，取其平均值，分别得到标准偏差及实验室变异系数（C.V.）。其结果见表1。通过2种方法对不同种类紫菜中的脂肪含量进行提取比较研究，每一样品重复测定6次后取其平均值，由表1可知，索氏抽提法的测定结果均满足GB/T 274042008实验室质量控制规范 食品理化检测中C.V.2.7%的要求，酸水解法的结果同时满足C.V.2.0%的要求。其中，索氏抽提法对10种紫菜样品中的脂肪提取含量在0.110.21 g/100 g范围内，而酸水解法测得的10种紫菜样品中的脂肪含量在2.632.76 g/100 g范围内，这是由于酸水解法能同时提取游离态脂肪和饱和态脂肪，因此，酸水解法更适合于紫菜中脂肪含量的提取。表1索氏抽提法和酸水解法提取紫菜中脂肪含量比较样品编号索氏抽提法/(g100 g-1)酸水解法/(g100 g-1)均值标准偏差C.V./%均值标准偏差C.V./%10.170.0042.312.760.0441.5820.150.0042.472.650.0341.2830.200.0052.622.710.0281.0440.140.0032.392.640.0321.2050.110.0032.542.630.0291.1160.170.0032.172.670.0381.4270.210.0042.002.740.0331.2080.210.0042.022.710.0311.1490.180.0042.102.720.0351.28100.140.0042.732.640.0271.02平均含量0.172.692.2 黑木耳脂肪含量提取用索氏抽提法和酸水解法提取10种黑木耳样品中的脂肪含量（质量分数），每一样品重复测定6次取平均值，其标准偏差及CV见表2。表2索氏抽提法和酸水解法提取黑木耳中脂肪含量比较样品编号索氏抽提法/(g100 g-1)酸水解法/(g100 g-1)均值标准偏差C.V./%均值标准偏差C.V./%10.110.0022.152.230.0311.3820.130.0032.622.350.0331.4030.100.0022.442.230.0251.1040.110.0032.652.250.0301.3550.090.0022.632.240.0281.2560.130.0032.292.260.0241.0570.150.0032.142.370.0321.3580.070.0022.492.180.0231.0590.160.0032.042.280.0231.03100.140.0042.512.240.0261.14平均含量0.122.26食品工业 2023 年第44卷第 2 期 100 工艺技术通过2种方法对不同种类的10种黑木耳中脂肪含量进行提取比较研究，由表2可知，索氏抽提法测得10种黑木耳样品中的脂肪含量范围为0