山东医药2023年第63卷第3期梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤成熟人神经母细胞瘤细胞的修复作用及其机制刘燕1，高春辰1，2，厉励2，冯清华1，吴明华3，李文磊31南京中医药大学附属医院南京中医药大学第一临床医学院，南京210023；2东部战区空军医院；3南京中医药大学附属医院/江苏省中医院摘要：目的观察梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y（SH-SY5Y细胞）的修复作用，并探讨其作用机制。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组、诱导组、模型组、梓醇组。对照组：SH-SY5Y细胞不做任何处理；诱导组：用ATRA诱导SH-SY5Y细胞72h，将其诱导为成熟神经元；模型组：ATRA诱导SH-SY5Y细胞72h后，将完全培养基换成无糖的EBSS溶液置于三气培养箱（氧气1%，二氧化碳5%，氮气94%）4h，氧糖剥夺结束后换回完全培养基（含糖），复氧12h；梓醇组：细胞经模型组同样处理后，加入含不同浓度梓醇（50、100、200μmol/L）的完全培养基常规培养72h。采用CCK-8法检测各组细胞的活力；细胞划痕实验观察细胞的迁移、穿越能力；β-Ⅲ-tubulin免疫荧光染色标记轴突，并测量其长度；Westernblotting法检测细胞中神经生长相关蛋白（GAP43）、骨桥蛋白（OPN）、磷酸化的胰岛素生长因子1受体（p-IGFR）、抑癌基因（PTEN）、雷帕霉素分子靶点（mTOR）、磷酸化核糖体S6蛋白（p-S6）。结果与对照组相比，诱导组存活率升高（P<0.0001）；与诱导组相比，模型组存活率降低（P<0.0001）；不同浓度梓醇组存活率均有升高（P均<0.05），各浓度组之间比较，P>0.05。对照组细胞胞体圆润，轴突较短，胞体与胞体之间几乎没有轴突连接；诱导组细胞轴突较长并且相互交织，形成神经网络；与诱导组相比，模型组数量减少，胞体扁平，轴突回缩；与模型组比较，梓醇组神经元数量增多，轴突长度获得一定的恢复；与空白对照组相比，诱导组轴突长度延长；与诱导组相比，模型组轴突长度缩短（P<0.001）；不同浓度梓醇组神经元轴突长度均延长（P均<0.01），而不同浓度梓醇组之间比较，P>0.05。与模型组相比，不同浓度梓醇组48h后的划痕面积均小（P均<0.05），不同浓度梓醇组之间比较，P>0.05。与诱导组比较，模型组PTEN相对表达量升高（P<0.05），OPN降低（P<0.05）；与模型组比较，不同浓度梓醇组GAP43、OPN、p-IGFR、mTOR及p-S6蛋白相对表达量均升高，PTEN蛋白相对表达量降低（P均<0.05）。结论梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤的SH-SY5Y细胞具有修复作用，其作用机制可能是通过上调OPN表达，诱导细胞...
