生态毒理学报AsianJournalofEcotoxicology第17卷第6期2022年12月Vol.17,No.6Dec.2022基金项目:国家重点研发计划课题(2018FYC1603001)第一作者:潘志辉(1997—),男,硕士研究生,研究方向为农药毒性效应,E-mail:1138027931@qq.com*通信作者(Correspondingauthor),E-mail:fangyj86@126.com#共同通信作者(Co-correspondingauthor),E-mail:wujinlch@163.comDOI:10.7524/AJE.1673-5897.20220301002潘志辉,席令仪,孙景然,等.毒死蜱和苯醚甲环唑联合暴露诱导小鼠精原细胞凋亡[J].生态毒理学报,2022,17(6):441-451PanZH,XiLY,SunJR,etal.ApoptosisofGC-1cellsinducedbycombinedexposureofchlorpyrifosanddifenoconazole[J].AsianJournalofEcotoxi-cology,2022,17(6):441-451(inChinese)毒死蜱和苯醚甲环唑联合暴露诱导小鼠精原细胞凋亡潘志辉,席令仪,孙景然,刘伟丽,吴瑾#,房彦军*军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天津300050收稿日期:2022-03-01录用日期:2022-04-17摘要:现代农业生产中为有效防治病虫害、保证农产品质量,多种农药混用现象突出。毒死蜱、苯醚甲环唑都是广泛使用的农药,现有研究证明这2种农药单独暴露对小鼠生殖系统具有毒性作用,但目前对二者联合暴露机制的研究较少。为了研究毒死蜱和苯醚甲环唑联合暴露对小鼠精原细胞的毒性作用及机制,先将GC-1细胞分别暴露于不同浓度的毒死蜱和苯醚甲环唑24h,通过测定细胞活力,确定2种农药的半抑制浓度(IC50)值。以2种药物的IC50浓度进行单独和联合暴露,测定其活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)指标水平,分析暴露后细胞线粒体膜电位和细胞凋亡等变化;通过Westernblot检测凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP和Bax的表达。结果表明,毒死蜱和苯醚甲环唑暴露导致GC-1细胞形态发生明显改变、存活率显著降低,毒死蜱和苯醚甲环唑的IC50分别为158.5μmol·L-1和89.57μmol·L-1。与对照组相比,联合暴露组细胞内ROS含量和MDA含量明显增加,而SOD活性和GSH含量明显降低,引起细胞显著的氧化应激。联合暴露组中Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase3和Bax蛋白表达水平显著提高。毒死蜱、苯醚甲环唑联合暴露对细胞毒性的影响明显高于其单独暴露组,导致GC-1细胞存活率降低并改变细胞形态,引起细胞氧化应激,线粒体膜电位下降,凋亡相关基因和蛋白的表达水平升高,最终诱导细胞凋亡。关键词:毒死蜱;苯醚甲环唑;小鼠精原细胞;联合暴露;细胞凋亡文章编号:1673-5897(2022)6...