荆花蜜质量控制指标与药用价值研究.pdf

荆花蜜质量控制指标与药用价值研究阮晓雯1,张子豪1,李燕辉1,吴秋媚1,朱皓然1,殷昌平2,王吓长1,李涛3,李璇1,4(1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.都安神瑶医药健康管理有限公司,广西 都安 530799;3.济南大学化学化工学院,山东 济南 250024;4.南京中医药大学江苏省中医药健康养生技术工程研究中心,江苏 南京 210023)摘要:目的 对荆花蜜质量控制指标和药用价值进行研究。方法收集近 4 年广西都安地区定地饲养模式生产的荆花蜜样品,研究其理化特征和对盐酸哌洛丁胺诱导的小鼠传输障碍便秘模型的影响。结果经蜜蜂充分酿造的荆花蜜中花粉以荆条花花粉粒为主,水分可稳定达到 20%以下,电导率低于 0.8 mScm-1,pH 3.673.93,游离酸 27.332.3 meqkg-1、内酯15.621.5 meqkg-1、总酸 35.453.7 meqkg-1、淀粉酶 17.621.5 U、羟甲基糠醛(5-HMF)3.311.6 mgkg-1,总酚含量450650 mgkg-1,总黄酮含量 16.326.6 mgkg-1,DPPH 清除 EC50 67.590.1 mgmL-1。薄层色谱研究结果显示,荆花蜜与其他 10 余种蜂蜜呈现不同的特征图谱,但不同年份荆花蜜的图谱特征相似;每日饮用不同浓度的蜂蜜水溶液,盐酸哌洛丁胺诱导的传输障碍小鼠便秘模型的便秘症状得到明显改善和缓解。结论 为荆花蜜各级各类质量标准制定和其药用价值研究进行了有益探索,以期为后续标准制定和产品开发提供依据。关键词:荆花蜜;质量研究;理化性质;指纹图谱;润肠通便;抗氧化中图分类号:R283文献标志码:A文章编号:1672-0482(2023)09-0870-09DOI:10.14148/j.issn.1672-0482.2023.0870引文格式:阮晓雯,张子豪,李燕辉,等.荆花蜜质量控制指标与药用价值研究J.南京中医药大学学报,2023,39(9):870-878.Study on Quality Control Indicators and Medicinal Value of Vitex HoneyRUAN Xiao-wen1,ZHANG Zi-hao1,LI Yan-hui1,WU Qiu-mei1,ZHU Hao-ran1,YIN Chang-ping2,WANG Xia-chang1,LI Tao3,LI Xuan1,3(1.School of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023,China;2.Duan-Shenyao Health Management Co.,Ltd,Duan 530799,China;3.School of Chemistry and chemical engineering,Jinan University,Jinan 250024,China;4.Jian-gsu Provincial Technology Engineering Research Center of TCM Health Preservation,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023,China)ABSTRACT:OBJECTIVE To evaluate the quality control indicators and medicinal value of Vitex Honey.METHODS Vitex hon-ey samples from Duan area of Guangxi in the past four years were collected,and their physicochemical characteristics and effects on the loperamide hydrochloride-induced transmission disorder constipation mouse models were studied.RESULTS The pollen grains of the Vitex Honey were mainly from Vitex flower,with a stable water content of less than 20%,conductivity below 0.8 mScm-1,pH 078南京中医药大学学报 2023 年 9 月第 39 卷第 9 期J Nanjing Univ Tradit Chin Med Vol.39 No.9 Sep.2023收稿日期:2023-08-11基金项目:中国民族医药学会科研项目(2021M2094-180501)第一作者:阮晓雯,女,E-mail:1170028242 通信作者:李璇,女,副研究员,主要从事中药与免疫代谢性疾病的关系研究,E-mail:xuanli ;李涛,男,实验师,主要从事蜂产品分析检测技术研究,E-mail:chm_lit between 3.67 and 3.93,free acid 27.3 to 32.3 meqkg-1,lactones 15.6 to 21.5 meqkg-1,total acid 35.4 to 53.7 meqkg-1,amylase 17.6 to 21.5 U,hydroxymethylfurfural(5-HMF)3.3 to 11.6 mgkg-1,total phenolic content 450 to 650 mgkg-1,and total flavonoid content 16.3 to 26.6 mgkg-1,DPPH clearance EC50 ranges from 67.5 to 90.1 mgmL-1.The results of thin layer i-dentification research showed that Vitex honey exhibited different characteristic spectra compared to more than ten other types of honey,but Vitex honey exhibited relatively consistent spectral characteristics in different years;daily intaking of different concentrations of honey aqueous solution significantly improved and alleviated the constipation symptoms of loperamide hydrochloride-induced transmis-sion disorder constipation in mice.CONCLUSION This study provides a beneficial exploration for the formulation of various quality standards for Vitex honey at all levels and the study of its medicinal value,in order to provide a basis for subsequent standard formula-tion and product development.KEYWORDS:Vitex honey;quality study;physicochemical properties;fingerprint;relaxing bowel;antioxidant 蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露,与自身分泌物结合后,经充分酿造而成的天然甜物质1,我国药典记载2其性平,归肺、脾、大肠经;具有补中,润燥,止痛,解毒,外用生肌敛疮的功效。主治脘腹虚痛,肺燥干咳,肠燥便秘,解乌头类药毒;外治疮疡不敛,水火烫伤等。国内外关于蜂蜜开展了很多研究,其中包括蜂蜜的标志性成分分析,药理活性研究3。蜂蜜作为一种天然药食同源物质,包括蜜源植物、产地、蜂种、存储方法等多种因素对蜂蜜的品质均具有显著影响,其质量标准也一直备受关注。荆 条 Vitex negundo Linn.Var.Heterophylla(Franch.)Rehd.是我国常见野生落叶小灌木,在南亚多国有广泛分布,有药用价值,同时也是优良的蜜源植物。荆花蜜产量丰富,是我国四大名蜜之一,它具有独特的香气和口感,是深受消费者喜爱的蜂蜜品种之一。经由蜜蜂采集荆条花蜜露并在蜂巢中酿造成熟的荆花蜜符合世界粮农组织标准,品质优于经过加热脱水而制得的蜂蜜产品,但其理化和功能特征研究尚不完善,作为特色单花种蜂蜜的质量标准亦尚未建立,这限制了荆花蜜的市场发展。本文对其多项理化指标和薄层图谱特征进行研究,探索食用荆花蜜对慢传输型便秘模型的影响和改善作用,以期凸显荆花成熟蜜的品质特征,为建立更加科学和全面可靠的荆花蜜质量评价体系提供参考。1 材料1.1 动物与试剂荆花蜜由都安神瑶医药健康管理有限公司提供,产地为广西都安 34 个固定蜂场,年份为 2019、2020、2021、2022,共 4 个年份样本,各年份不同蜂场样本充分混匀后用于实验;采自广西都安地区和广西密云地区蜂场的干燥荆条花、叶、茎、根由都安神瑶医药健康管理有限公司提供;黄芪蜜、金菊蜜、龙须藤蜜、龙眼蜜、苜蓿蜜、女贞蜜、山花蜜、苕子蜜、油菜蜜、中蜂蜜、中蜂蜜-盐肤木蜜、中蜂蜜-杂花蜜均由南京中医药大学校友李晓栋先生收集鉴定并捐赠;福林酚、羟甲基糠醛、没食子酸(99%)、槲皮素(99%)、三氯化铝、DPPH,对羟基苯甲酸(99%),由上海源叶生物科技有限公司提供;果葡糖浆由广州双桥股份有限公司提供;大孔树脂 Amber-lite XAD-16、浓硫酸、醋酸酐、甲酸、盐酸、氢氧化钠、乙酸钠等化学试剂均为分析纯,由国药集团化学试剂有限公司提供。SPF 级 Balb/c 小鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,动物许可证号:SCXK(沪)2017-0005。1.2 仪器与设备显微镜 Model YS100,Nikon 公司;薄层色谱仪ATS4/ADC2/TLC Visualizer2,Camag 公司;蜂蜜波美度计 LB92T,速为电子科技有限公司;电导率仪,上海越平科学仪器有限公司;pH 计 PB-10,Sartorius公司;紫外分光光度计 TU-1810,北京普析通用仪器有限责任公司;万分之一天平 BSA124S,Sartorius公司;电子天平 NewClassic,METTLER TOLEDO 公司;超纯水仪 Milli-Q Direct8,Merck Millipore 公司;超声清洗仪 KQ-500DE,昆山市超声仪器有限公司。2 方法2.1 花粉粒鉴定称取蜂蜜样品 10 g,置 15 mL 离心管中,加入蒸馏水至 12 mL,溶解稀释。以 4 000 rmin-1的速度离心 10 min,弃去约 3/4 的上清液,加入 2 mL 乙酸并用涡旋仪混匀,静置2 h。将放置后的样品进行离心(4 000 rmin-1,10 min),弃去约 1/2 的上清液,加入新配制的浓硫酸和醋酸酐的混合液(体积比为91)0.5 mL,并用涡旋仪混匀,然后将离心管放入80 水浴锅中水浴加热 7 min。停止加热后,迅速离心(4 000 rmin-1,10 min),弃去 1/2 上清液,加10 mL 蒸馏水混匀,离心(4 000 rmin-1,10 min),弃去 4/5 上清液。再加入 10 mL 蒸馏水,离心(4 000 rmin-1,10 min),去上清,留下约 3 mL 的样液。取适量样液放在盖玻片上,盖上盖玻片,将边178阮晓雯,等:荆花蜜质量控制指标与药用价值研究 第 9 期缘多余液体用滤纸吸干,用血球计数板观察,盖玻片一端靠在载玻片上呈 45,然后缓缓放下盖玻片,防止出现气泡影响观察4。2.2 水分含量测定打开蜂蜜波美度计盖板,取样品数滴,置于检测棱镜上,合上盖板,避免气泡产生,使溶液遍布棱镜表面,通过目镜读出蜂蜜样品水分数值。2.3 电导率的测定根据国家标准GB/T 18932.152003规定方法进行测量5,称取相当于 20 g 蜂蜜样品,置于100 mL 烧杯中,加入 40 mL 水,用玻璃棒搅拌使之完全溶解,转移至 100 mL 容量瓶中,再用 30 mL 水分数次洗涤烧杯后,转移至容量瓶中,最后用水定容至刻度,摇匀。将样液倒入 100 mL 烧杯中,将电极放入样液中,轻轻摇动,赶出气泡,待测定值稳定后,记录样品的电导率,用 mScm-1来表示。2.4 pH 测定取 10 g 蜂蜜样品,溶于 75 mL 蒸馏水(蒸馏水使用前需煮沸去除 CO2并冷却至室温)中,充分搅拌混匀,将 pH 电极插入到溶液中,记录 pH 值。2.5 游离酸、内酯、总酸测定根据 AOAC 所描述的方法6进行测定,用氢氧化钠的标准溶液进行滴定。游离酸的测定:取 10 g蜂蜜样品,溶于 75 mL 蒸馏水(蒸馏水使用前需煮沸去除 CO2并冷却至室温)中,充分搅拌混匀,将pH 电 极 插 入 到 溶 液 中,记 录 pH 值。以5 mLmin-1的速率匀速滴加 0.05 mol L-1的NaOH 溶液至溶液 pH 达到 8.5,记录使用的 NaOH溶液的体积为 VNaOH。游离酸含量(VNaOH-V空白)50/m蜂蜜样品。溶液 pH 值达到 8.5 后,立即加入10 mL 0.05 molL-1的氢氧化钠溶液,然后使用0.05 molL-1的 HCl 溶液反滴至蜂蜜样品溶液 pH值为 8.30,记录使用 HCl 的体积为 VHCl。内酯含量为(10-VHCl)50/m蜂蜜样品。样品中的总酸含量为游离酸与内醋酸含量的总和。2.6 淀粉酶活性测定2.6.1 溶液的配制 碘储备液:称取 2.2 g 碘化钾于 100 mL 容量瓶中,加入 34 mL 水溶解,再称取0.88 g 的碘加入容量瓶中,用水定容至 100 mL;碘溶液:称取 4.0 g 碘化钾,用水溶解,置 100 mL 容量瓶中,再加入1 mL 碘储备液,加水定容至刻度;乙酸盐缓冲液:称取 8.7 g 乙酸钠于 80 mL 水中,加入2.1 mL 冰乙酸,用水定容至100 mL;氯化钠溶液:称取 1.45 g 氯化钠,用水溶解并定容至 50 mL。按此法重复制备以备测量样品所需;淀粉溶液:溶解 2 g淀粉于 90 mL 水中,迅速煮沸再微沸 3 min,至室温后,转移至 100 mL 容量瓶中。2.6.2 淀粉酶溶液的标定 吸取 5.0 mL 淀粉溶液和 10 mL 水并分别置于 40 水浴中 15 min。将淀粉溶液倒入 10.0 mL 水中并充分混合后,取 1.0 mL加到 10.0 mL 的碘溶液中,混匀,用一定体积的水稀释后,以水为空白对照,用分光光度计于 660 nm 波长处测定吸光度,确定产生 0.7600.02 吸光度所需稀释水的体积数,并以此体积数作为样品溶液的稀释倍数。当淀粉来源改变时,需重新标定。2.6.3样品测定称取约 5 g 蜂蜜样品,置于20 mL 烧杯中,加入 15 mL 水和 2.5 mL 乙酸盐缓冲液,移入含有1.5 mL 氯化钠溶液的25 mL 容量瓶中并定容。吸取 5.0 mL 淀粉溶液,10.0 mL 样品溶液和 10 mL 碘溶液,分别置于 40 水浴中 15 min,将淀粉溶液倒入样品溶液中,以前后倾斜的方式充分混合后开始计时,5 min 时取1.0 mL 样品混合溶液,加入到 10.0 mL 的碘溶液中,再用淀粉溶液标定时确定的稀释水的体积数进行稀释并用前后倾斜的方式充分混合后,以水为空白,用分光光度计 于660 nm 处测定吸光度值。如吸光度0.235,应继续按照上述步骤重复操作,直至吸光度0.99)。精密称取荆花蜜 10 g 和果葡糖浆 30 g,置于25 mL 容量瓶中,加入 15 mL 左右甲醇混匀后,加入5%氯化铝 0.5 mL,再以甲醇定容至 25 mL,以上各个样品需做 3 组平行。暗室中静置 30 min 后,在425 nm 下测定其吸光度。2.10 DPPH 清除能力的测定2.10.1 溶液的配制 300 molL-1 DPPH 溶液:精密称取 12 mg DPPH 固体,先溶解于少量甲醇中,随后用甲醇定容至 100 mL 容量瓶中(现配现用);荆花蜜 240 mgmL-1溶液:称取荆花蜜 2.4 g,甲醇定容至 10 mL;果葡糖浆 1 350 mgmL-1溶液:称取果葡糖浆 13.5 g,甲醇定容至 10 mL。2.10.2DPPH 清除能力测定准备 7 个试管,编号 06,按表 1 配制反应溶液。表 1 DPPH 清除能力测定加样量表(mL)Table 1 Sample addition scale for DPPH clearingcapacity measurement(mL)标号甲醇样品溶液DPPH01.001.010.80.21.020.60.41.030.40.61.040.20.81.050.10.91.0601.01.0 0 6 号管先加甲醇和样品溶液,再加 DPPH时,每管间隔 1 min。加完后摇匀,确保混合均匀,30 min 后在 517 nm 处测定其吸光度。2.10.3 EC50的计算 DPPH 剩余量的计算:K1(%)=A1100/A0 其中,K1:DPPH 剩余量%;A0:0 号管的吸光度值;A1:不同浓度样品试管的吸光度值。EC50值的计算:以样品溶液浓度为横坐标(mgmL-1),DPPH剩余量(%)为纵坐标作直线图,显示公式y=ax+b其中 a 为直线的斜率,b 为直线的截距,EC50=(50-b)/a。378阮晓雯,等:荆花蜜质量控制指标与药用价值研究 第 9 期2.11 薄层色谱鉴别2.11.1 供试品溶液的制备取蜂蜜样品 50 g,置500 mL 烧杯中,加入 250 mL 溶液(pH=2 的盐酸水溶液),用棉花过滤以除去固体颗粒。然后将滤液加入 Amberlite XAD-16 树脂柱进行分离,首先用pH=2 的盐酸水 100 mL 洗脱,再加入 300 mL 蒸馏水洗脱,除去糖和其他极性的化合物;再用 300 mL甲醇洗脱,得到中小极性成分,40 减压干燥,将残留物溶解在 5 mL 水中,用乙酸乙酯萃取(5 mL3),合并乙酸乙酯萃取液,减压干燥,1 mL 甲醇复溶,即得7-8。取不同产地的荆条的根、茎、叶、花粉末,称取约2 g,加入 25 mL 甲醇,超声提取 30 min,过滤,取上清,即得。2.11.2 对照品溶液的制备 取对羟基苯甲酸对照品,精密称定,加甲醇制成每 1 mL 含对羟基苯甲酸0.98 mg 的溶液,作为对照品溶液。2.11.3展开剂的选择照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取供试品溶液各 10 L,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上,以甲苯:乙酸乙酯:甲酸(5 41)为展开剂,展开,取出,晾干。2.12 对小鼠便秘模型的影响将 BALB/c 小鼠随机分成空白对照组、模型组、糖浆 5%组、荆花蜜 1.7%、5%、15%组,每组 10 只,雌雄各半。空白组和模型组饮用灭菌水,其他组自由饮用相应饮水,并记录体质量,连续 4 周。依据文献给予造模药物盐酸洛哌丁胺9,实验结束前 2 d,每日灌胃给予盐酸洛哌丁胺 50 mgkg-1诱导便秘模型小鼠,更换新笼盒,立即收集 5 h 粪便,称取质量、记录湿粪便质量 W1,以比较组间排便量差异;然后将各组小鼠的粪便放入鼓风机内进行高温烘干、脱水。鼓风机设置为 100,连续烘干 2 h,再次进行称质量,记录干粪便质量 W2。造模完成后,小鼠禁食过夜以排空肠内容物。至第 2 天上午开始进行小鼠肠道推进率检测。具体方法为:每只小鼠经口灌0.2 mL 印度墨水,15 min 后脱颈椎处死。迅速打开小鼠腹腔,取出自幽门至肛门的全肠道,无张力拉直后测量肠道全长 L1;然后再测量墨汁在肠道内的行进长度 L2,计算小鼠肠道推进率 D=L2/L1100%。2.13 数据处理及统计方法所有数据均以 xs 表示,多组之间比较通过单因素方差分析进行,P2020 年2021 年2022 年,说明 5-HMF 含量随存放时间的增加而增加,也验证了 5-HMF 是检验蜂蜜新鲜度的指标。3.5 总酚、黄酮含量及 DPPH 清除能力蜂蜜具有一定抗氧化活性,酚类和黄酮类成分是蜂蜜抗氧化的主要物质基础,蜂蜜中的酚类和黄酮类化合物含量越高,则其抗氧化活性越好。因此酚类和黄酮类化合物也是目前相关研究的重点。结果如表 2 所示,四年份荆花蜜多酚类化合物含量在450 650 mgkg-1之间,总黄酮含量在 16.3 26.6 mgkg-1之间,EC50为 67.590.1 mgmL-1。表 2 20192022 四年份荆花蜜理化指标Table 2 Physicochemical indicators of Vitex honey from 2019 to 2022样品水分/%电导率/(mScm-1)pH游离酸/(meqkg-1)内酯/(meqkg-1)总酸/(meqkg-1)淀粉酶/U5-HMF总酚/(mgkg-1)总黄酮/(mgkg-1)抗氧化能力(DPPH)-EC50/(mgmL-1)F5521.50.50.0120.002 6.330.3613.63.612.10.525.73.6/5.21.8286.454.3 0.540.01648.8ViH1919.90.50.250.023.800.0529.42.718.72.248.13.319.26.411.64.0651.283.126.61.167.5ViH2018.60.440.200.023.740.0432.12.321.51.153.72.018.14.15.21.8505.626.121.41.079.5ViH2118.31.10.280.083.930.2827.313.615.63.035.417.717.62.2 4.91.3518.3106.116.71.189.6ViH2217.30.40.240.053.670.0432.31.218.70.251.01.121.53.63.30.6453.527.316.31.290.1注:F55.果葡糖浆;ViH19.荆花蜜 2019 年样品;ViH20.荆花蜜 2020 年样品;ViH21.荆花蜜 2021 年样品;ViH22.荆花蜜 2022 年样品。与 F55 比较,P0.05。3.6 薄层鉴别薄层色谱作为一个传统的质量控制的方法,具有操作方便、设备简单的特点。相较于 GC-MS、LC-MS/MS 等方法,TLC 容易操作15。对荆花蜜的薄层色谱进行研究,可为鉴别不同蜂蜜提供参考,实现更好的荆花蜜质量控制。我国南北都有荆条分布,为了探索荆条蜜成分与蜜源植物之间的关系,本文对来源于具有南北代表性的广西都安和北京密云地区的荆条的根、茎、叶、花样品进行提取,采用建立的薄层色谱方法进行分析,为项目后期研究蜜源植物区域分布与荆花蜜质量控制的关系的研究提供更多数据支持。结果如图 2 所示,荆花蜜薄层色谱图呈现出相似的条带特征,同时,对产于广西都安和北京密云的荆条植物根、茎、叶、花进行分析,通过与荆花蜜之间的薄层色谱进行对比,可以确定一种共有成分同时存在于荆578阮晓雯,等:荆花蜜质量控制指标与药用价值研究 第 9 期条花和荆条叶中,与标准品对比确认该化学成分为对羟基苯甲酸。在 254 nm 检测条件下,荆花蜜在Rf值为 0.71 时显黑色斑点,可以明显地区别荆花蜜与其他品种的蜂蜜,而在 366 nm 检测条件下,各批荆花蜜主要斑点相似。注:1.根-都安;2.根-密云;3.茎-都安;4.茎-密云;5.花-都安;6.花-密云;7.叶-都安;8.叶-密云;9.对羟基苯甲酸;10.2019 年荆花蜜;11.2020 年荆花蜜;12.2021 年荆花蜜图 2 荆条植物组织样品与荆条蜜薄层色谱图Fig.2 Thin layer chromatograms of Vitex plant tissuesamples and Vitex honey对包括荆花蜜在内的 13 种可溯源蜂蜜样品进行薄层色谱分析,结果如图 3 所示,各样品薄层色谱特征均有所不同,但能否作为不同蜂蜜的鉴别技术手段应用还需更多数据积累比对。注:1.苜蓿蜜;2.苕子蜜;3.黄芪蜜;4.油菜蜜;5.金菊蜜;6.中蜂蜜;7.女贞蜜;8.龙眼蜜;9.中蜂蜜-杂花蜜;10.山花蜜;11.中蜂蜜-盐肤木;12.龙须藤蜜;13.荆花蜜图 3 多品种蜂蜜薄层色谱图Fig.3 Thin layer chromatograms of multiple varieties of honey3.7 荆花蜜改善小鼠便秘模型肠道功能盐酸洛哌丁胺作用于肠壁阿片受体,组织乙酰胆碱和前列腺素的释放6,从而抑制肠蠕动,延长肠内容物的滞留时间,可用于制作小鼠便秘模型。小鼠每日自由饮用蜂蜜水 4 周后,给予造模药物,饮用 5%、15%蜂蜜水的小鼠湿粪质量、干粪质量和小肠推进率都有明显增加,这表明饮用蜂蜜水可以使便秘模型的便秘症状得到改善和缓解。饮用相近浓度的果葡糖浆溶液能促进小肠推进运动,但对于湿粪和干粪质量无明显影响。连续四周饮用果葡糖浆和不同浓度荆花蜜水对体质量无明显影响,如图 4所示。4 讨论蜂蜜是人类最早的甜味物质,数千年来一直深受人类的喜爱,早在神农本草经中就有我国人民食用蜂蜜的记载,我国也拥有悠久的养蜂和食用蜂蜜的传统。到了近代,战乱不断,我国的养蜂业逐渐落后于世界先进水平。关于新西兰的麦卢卡蜂蜜的专门研究始自 20 世纪 90 年代,自 2007 年起发表科研论文数量逐年增加,多国科学家合作研究了麦卢卡蜂蜜特征成分“丙酮醛 MGO”的来源及转化条件16-19,德国科学家研究结果表明美拉德反应的中间产物是麦卢卡的特定成分19。麦卢卡蜂蜜的抗菌20、抗炎、修复伤口、抗氧化、抗肿瘤等作用也相继被发表20-24。建立在这些科学研究基础之上,麦卢卡蜂蜜迅速成为蜂蜜产品领域中的殿堂级产品,价高难求,也为蜂蜜的研究提供了良好的思路。由此,本研究立足于荆花蜜的品质与药用价值两方面,研究荆花蜜的质量控制指标和其代表功能,以期为后续标准制定和产品开发提供数据支持。蜂蜜的品质与蜜源植物密切相关。荆条蜜的蜜源植物为马鞭草科(Verbenaceae)植物黄荆(Vitex-cen-nalrfalia Sieb.et Zuee.)的一个变种,称之为荆条。黄荆适宜生存在热带及温带地区,南亚很多国家都有分布,如中国、印度尼西亚、印度和菲律宾等,生长于海拔 1 500 m 处,在我国黄荆广泛分布于我国长江流域及南部各省区。黄荆生自山野间,为落叶灌木,叶对生,长柄,掌状复叶 13-5 小叶,披针形或长椭圆形,边缘如粗锯齿,头锐尖,顶生圆锥花序,夏日开淡紫色小唇形花,结小球形核果,黑熟。中国药物植物志载:“牡荆与黄荆,最相近似,然不难鉴别,牡荆毛虽细密,但均直立,不似黄荆毛之相互织为绒毛状,牡荆的叶面绿色,而黄荆的叶的下面为678南京中医药大学学报 2023 年 9 月第 39 卷第 9 期粉白色,牡荆的叶具锯齿,黄荆正种则为全绿,或只具小齿”。又载“黄荆条为黄荆的变种,其异于黄荆者在深裂如羽状的小叶,在黄荆则为全绿或只具浅齿,有时黄荆条的小叶也只具粗齿,形如牡荆,惟牡荆的叶下面绿色是其异点”。现在一般认为本品有3 种:牡 荆 Vitex negundo L.var.cannabifolia(Sieb.et Zucc.)Hand.-Mazz.;黄荆 Vitex Negun-do Linn.;黄 荆 条 Vitex Negundo Zinn Verincisa(Lam)clarke。在药用上的性质,均完全相同25。本研究发现,2019、2020、2021 和 2024 年荆花蜜中,除了稳定存在的 1 个成分对羟基苯甲酸外,还有 7个共有成分有待鉴定,本研究后续将推进相关研究,完成荆花蜜指纹图谱的绘制。注:A.荆花蜜对连续 4 周体质量的影响;B.荆花蜜对小肠推进率的影响;C.荆花蜜对湿粪质量的影响;D.荆花蜜对干粪质量的影响。Con.空白对照组;M.模型组;Sy.果葡糖浆 5%饮用组;ViH1.7.荆花蜜 1.7%饮用组;ViH5.荆花蜜 5%饮用组;ViH15.荆花蜜 15%饮用组;W1.实验第 1 周;W2.实验第 2 周;W3.实验第 3 周;W4.实验第 4 周。与对照组相比,#P0.05;与模型组相比,P0.05。图 4 荆花蜜对小鼠便秘模型的影响Fig.4 Effect of Vitex honey on mouse constipation model 黄荆子、叶、枝及根均可入药。黄荆子即为植物的种子,亦即本草纲目所载的黄荆子,能“祛风涤痰镇咳”,八九月间采实阴干供药用。黄荆有止咳、祛痰及缓解支气管痉挛的作用,主治感冒、咳嗽、哮喘、风痹、疟疾、胃痛、疝气、痔漏。黄荆叶清热解表,利湿解毒,主治感冒、中暑、吐泻、痢疾、疟疾、黄疸、风湿、跌打肿痛、创痛疥癣,并能防止甲醛性关节炎肿胀的发生26。在黄荆中共发现四大类共 120 种化合物,主要是类黄酮、木脂素、萜类和类固醇化合物27。Gill 等综述了黄荆提取物中的活性成分抗炎、抗氧化、抗糖尿病、抗癌、抗微生物等多种功能及其作用机制的研究28。荆条蜜的成分与功能研究相关的文献并不多。中国的荆条蜜总酚和总黄酮含量分 别 为 344 520 mg kg-1(GAE)和 19 31 mgkg-1(芦丁),给予大鼠 20 gkg-1 70 d 后,能提高扑热息痛所致肝毒性大鼠血清中抗氧化相关指标,改善肝功能相关指标29。柴霞等30报道了果蝇培养基中加入荆条蜜能促进果蝇的生长发育、延缓衰老、抗氧化,提高繁殖能力。郭顺悦等31报道通过 HPLC-MS/MS 鉴定出荆条蜜中的独特成分3-O-7-O-二葡萄糖花旗松素苷,将其命名为荆条素(Vitexin)。张永清等32应用实时 LAMP 方法对荆条蜜真实性进行快速检测。本团队后续将继续进行荆花蜜功能-物质基础关系研究,以阐明其可能的作用机理。参考文献:1 中华人民共和国卫生部.GB14963-2011,食品安全国家标准蜂蜜S.北京:中国标准出版社,2011.Ministry of Health of the Peoples Republic of China.GB14963-2011,National standard for food safety honeyS.Beijing:China standards press,2011.2 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部S.北京:中国医药科技出版社,2020:374.National Pharmacopoeia Commission.Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China:Vol S.Beijing:China medical science and technology press,2020:374.3 ZAMMIT YOUNG GW,BLUNDELL R.A review on the phytochem-ical composition and health applications of honey J.Heliyon,2023,9(2):e12507.4 魏丽,曾志将.中国部分商品蜂蜜中植物花粉形态、含量及浓度的研究J.中国蜂业,2009,60(6):12-14.WEI L,ZENG ZJ.Study on shape,content and concentration of plant pollen in part commercial honey of ChinaJ.Apic China,778阮晓雯,等:荆花蜜质量控制指标与药用价值研究 第 9 期2009,60(6):12-14.5 中华人民共和国卫生部.GB/T 18932.15-2003,食品安全国家标准蜂蜜S.北京:中国标准出版社,2003.Ministry of Health of the People s Republic of China.GB/T 18932.15-2003,National standard for food safety honeyS.Bei-jing:China standards press,2003.6 Association of Official Analytical Chemists AOAC(1990).AOAC Official Method 962.19 Acidity in Honey S.Washington:Asso-ciation of Official Analytical Chemists.7 ISLAM MK,SOSTARIC T,LIM LY,et al.A comprehensive HPTLC-based analysis of the impacts of temperature on the chemi-cal properties and antioxidant activity of honey J.Molecules,2022,27(23):8491.8 MAKOWICZ E,JASICKA-MISIAK I,TEPER D,et al.HPTLC fingerprinting-rapid method for the differentiation of honeys of differ-ent botanical origin based on the composition of the lipophilic frac-tionsJ.Molecules,2018,23(7):1811.9 姚一博,王迪,王钱陶,等.盐酸洛哌丁胺诱导的小鼠慢传输型便秘模型的实验研究J.中国实验动物学报,2020,28(3):370-375.YAO YB,WANG D,WANG QT,et al.Experimental study of slow transit constipation induced by loperamide hydrochloride in miceJ.Acta Lab Animalis Sci Sin,2020,28(3):370-375.10 张金谈,王嘉琳.蜂蜜的花粉分析J.植物学报,1966,8(2):186-192.ZHANG JT,WANG JL.Pollen analysis of honeyJ.J Integr Plant Biol,1966,8(2):186-192.11 赵天祎,马占峰,汪驷麒.蜂蜜电导率的实验研究J.中国蜂业,2020,71(7):40-41.ZHAO TY,MA ZF,WANG SQ.Experimental study on the con-ductivity of honeyJ.Apic China,2020,71(7):40-41.12 陈雪洋,田珂雪.蜂蜜中-淀粉酶活力测定方法改进J.河南农业,2020(24):59-60.CHEN XY,TIAN KX.Improvement of 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