老年结直肠癌病人UGT1A1%5E%28＊%2928及%5E%28＊%296基因多态性分析.pdf

第 期 年 月临床研究 作者单位：江苏省南京市，江苏省人民医院病理学部通信作者：李霄，：老年结直肠癌病人及基因多态性分析蒋露 丁颖 季盼 缪琛 吕君文 陈旭阳 时姗姗 李霄 【摘要】目的利用分子病理学检测平台分析老年结直肠癌病人 及 基因多态性。方法 采用 毛细管电泳法以及测序法对老年结直肠癌病人手术切除组织样本进行分析。结果 例老年结直肠癌病人中，和 基因型的分布规律从多到少均为野生型、突变杂合型和突变纯合型。两种基因的多态性在不同性别、肿瘤类型、肿瘤 分期和原发肿瘤部位的分布差异均无统计学意义（）。结论 和 基因型的分布规律不受性别、肿瘤类型、分期和原发肿瘤部位的影响。比 更易发生纯合突变。如果任一位点发生纯合突变，另一位点则可能存在突变排斥。【关键词】结直肠癌；尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶；基因多态性；聚合酶链式反应毛细管电泳；测序中图分类号 文献标志码 ：，：，：【】（），（），【】；实用老年医学 年 月第 卷第 期 ，结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤，高发病率与高死亡率是结直肠癌的重要特征。在临床治疗用药中，因个体化差异的存在，用药疗效因人而异。分子病理诊断方法的应用，从基因层面可为癌症病人个体化治疗提供有效的指导。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 （，）是结直肠癌化疗药物伊立替康（，）的关键代谢酶，直接影响 治疗的有效性和安全性。基因多态性的存在是影响该酶生物活性的重要因素。相较于单一位点检测，联合位点检测更能反映细胞毒作用。本研究分别采用 毛细管电泳法以及测序法对 例中国老年结直肠癌病人肿瘤石蜡样本中的 以及 基因进行多态性分析，同时分析了性别、肿瘤类型、分期以及原发肿瘤部位 种临床因素对于两种基因位点多态性分布的差异，以期为临床化疗用药提供一定的指导。材料与方法 研究对象 收集 年就诊于江苏省人民医院结直肠外科并进行手术切除的老年原发结直肠癌病人 例，年龄 岁，平均（）岁，其中女 例，男 例。所有纳入统计的样本皆由病理确诊，每例样本所对应的结直肠癌病人及其家属均已签署知情同意书。所有病人组织样本均经过固定脱水石蜡包埋处理，并在本院病理学部分子病理实验室进行 及 基因检测。试剂与仪器 基因型检测试剂盒（批号：）、基因多态性检测试剂盒（批号：）和基因组 提取试剂盒（批号：）均来自上海源奇生物公司。型涡旋震荡仪（美国 公司），型 高 速 离 心 机（德 国 公 司），型 仪（美 国 公 司），型基因分析仪（美国 公司）均按说明书操作。方法 石蜡组织切片样本，脱蜡处理后进行组织富集，使用基因组 提取试剂盒提取样本。分别按照相应的 基因型及 基因多态性检测试剂盒的说明书操作步骤进行基因型及多态性检测。统计学处理毛细管电泳和测序由配套软件 运 行 及 进行分析。采用 软件进行统计分析。计数资料采用频数和百分比（，）表示，组间比较使用 确切概率法，为差异具有统计学意义。结果 老年结直肠癌病人 及 基因型分布 基因型为 、和 者分别为 例（）、例（）和 例（）。基因型为 、和 者分别 为 例（）、例（），例（）。根据临床特征分类，种肿瘤类型中，除了浸润型有 例 基因型表现为野生型，以及 例 基因型表现为野生型 外，其余两种溃疡型与隆起型的 以及 基因型分布占比均分别为 ，；个不同肿瘤 分期中除了 期仅存在 例基因 （）病人及 例 基因 （）病人，分期 及 基因型分布占比从多到少均分别为 ，。在不同性别与原发肿瘤部位的病人中统计结果同样符合该规律。种基因型分布在不同临床特征间比较，差异均无统计学意义（）。见表。与 基因双位点交叉统计分析为了解 基因更多的基因型分布特征，本研究对 与 基因进行了双位点交叉统计分析。结果显示，及 均为野生型占比最多，其后依次为仅存在 突变杂合子、仅存在 杂合子、同时发生 及 杂合突变、仅 存 在 突 变 纯 合 子、仅 存 在 突变纯合子，不存在任一方发生纯合突变，另一方发生杂合或纯合突变的情况。见表。实用老年医学 年 月第 卷第 期 ，表 不同临床特征老年结直肠癌病人 及 基因型分布比较（，）项目 位点 位点野生型（）突变型杂合子（）突变型纯合子（）野生型（）突变型杂合子（）突变型纯合子（）性别 男（）（）（）（）（）（）女（）（）（）（）（）（）肿瘤类型 溃疡型（）（）（）（）（）（）隆起型（）（）（）（）（）（）浸润型（）（）分期（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）肿瘤部位 右半结肠（）（）（）（）（）左半结肠（）（）（）（）（）（）直肠（）（）（）（）（）（）表 与 基因双位点交叉统计分析（，）基因 合计 （）（）（）（）（）（）（）（）（）合计（）（）（）（）不同临床特征老年结直肠癌病人 与 基因型双位点分布分析将不同临床特征与基因型分布的关系同样进行双位点交叉统计分析，结果显示 以及 基因型双位点分布在不同性别、肿瘤类型、分期和肿瘤部位间差异均无统计学意义（）。由于 基因 型样本数很少，统计学参考价值较低，因此未列出。见表。表 不同临床特征老年病人 基因多态性与 基因双位点分布分析（，）项目 性别 男（）（）（）（）（）女（）（）（）（）（）肿瘤类型 溃疡型（）（）（）（）（）隆起型（）（）（）（）（）浸润型（）分期 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）肿瘤部位 右半结肠（）（）（）（）（）左半结肠（）（）（）（）（）直肠（）（）（）（）（）实用老年医学 年 月第 卷第 期 ，讨论 基因定位于染色体，编码蛋白分子量为 作用于葡萄糖醛酸化途径的，该种酶可将药物等亲脂小分子物质转化分解为水溶性、可排泄的代谢产物。作为现今常用的结直肠癌化疗药物，能够导致粒细胞缺乏与迟发性腹泻等不良反应。突变被证明与其细胞毒作用相关，且合并 种 基因突变较之单一突变的毒性反应更为显著。吸收入血后在肝内代谢为毒性更强的 乙基羟基喜树碱（）。随后 在 的作用下代谢失活转化为糖基化（），随胆汁排泄入肠。基因突变能够导致 表达下降，使得失活代谢产物 生成减少，继而引发具有更强细胞毒作用的活性代谢产物 在体内蓄积，最终引起因粒细胞缺乏而导致的骨髓抑制以及因肠道蓄积而产生的严重迟发性腹泻。本研究将 例经病理确诊的老年结直肠癌病人石蜡 样 本 纳 为 分 析 对 象，对 以 及 基因进行多态性分析。从单位点多态性统计结果显示，在老年结直肠癌病人中，两种突变类型皆为野生型杂合突变型纯合突变型，并且基因型分布在 个不同临床特征间差异均无统计学意义。有研究报道，是存在于亚洲人群的一种特有的 突变类型，特别在粒细胞缺乏上，纯合突变型（）较之杂合突变型（）风险更高。基因突变者 转变为 的能 力 比 突 变 者 更 低，因 此 携 带 突变基因的病人发生骨髓抑制或腹泻等严重不良反应的概率更高。而双位点交叉统计分析显示，在老年结直肠癌病人中两基因位点至少存在一种突变（包括杂合突变与纯合突变）的基因型占比过半，且 杂合突变与纯合突变概率均大于，同样未见双位点突变分布在 种临床特征中差异有统计学意义。研究表明，老年结直肠癌病人分期越晚预后越差，存活期越短。由于其年老体弱以及基础疾病的存在，合并 基因突变者，对化疗药的耐受性更低，因此基于分子病理进行联合位点检测更能为 对老年病人的细胞毒作用作出有效预测，从而指导临床用药，提高药物的疗效。然而，与 任一基因为纯合突变时，是否与另一方突变排斥，尚未有文献报道，有待进一步研究。参考文献 刘宗超，李哲轩，张阳，等 年全球癌症统计报告解读 肿瘤综合治疗电子杂志，（）：，（）：谭娜，郑洪，黄佳佳，等 肿瘤的分子病理诊断及临床意义研究 进 展 临 床 检 验 杂 志：电 子 版，（）：，（）：贾晓艳，付汉东 口腔黏膜拭子检测 基因多态性并分析其与伊立替康药物不良反应的关系 实用医药杂志，（）：，（），（）：，（）：，？，（）：吴燕子，陈晓燚，薛源，等 基因多态性与伊立替康所致不良反应的相关性分析 药学与临床研究，（）：，（）（），（）：，（），（），（）：，实用老年医学 年 月第 卷第 期 ，：，（）：，：陈绍俊，莫恰，徐君毅，等 广西壮族转移性结直肠癌患者 基因多态性与伊立替康化疗反应相关性研究 中华肿瘤防治杂志，（）：，：，：，（）：付明生，蔡勋全，杜梅玲，等 老年结直肠癌术后长期生存的预后因素分析 中华老年医学杂志，（）：（收稿日期：）（上接第 页），（）：，：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，：，：，（）：，：，（）：（收稿日期：）