聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用.pdf

生态毒理学报Asian Journal of Ecotoxicology第 18 卷 第 5 期 2023 年 10 月Vol.18,No.5 Oct.2023 基金项目:国家自然科学基金面上项目(51978001);安徽省高等学校科学研究重大项目(2023AH040122);安徽未来技术研究院企业合作项目(2023qyhz01);安徽省高校协同创新项目(GXXT-2021-057)第一作者:陶开燕(1996),女,硕士研究生,研究方向为生态毒理学,E-mail: *通信作者(Corresponding author),E-mail:#共同通信作者(Co-corresponding author),E-mail:DOI:10.7524/AJE.1673-5897.20221121002陶开燕,徐晓平,杨晓凡,等.聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用J.生态毒理学报,2023,18(5):236-245Tao K Y,Xu X P,Yang X F,et al.Combined toxicity of polystyrene nanoplastics and bromate to rotiferBrachionus calyciflorusJ.Asian Journal of Eco-?toxicology,2023,18(5):236-245(in Chinese)聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用陶开燕1,徐晓平1,2,*,杨晓凡1,#,陈涛1,李彬彬1,李锦程11.安徽工程大学建筑工程学院,芜湖 2410002.皖江流域退化生态系统的恢复与重建省部协同创新中心,芜湖 241000收稿日期:2022-11-21 录用日期:2023-02-19摘要:聚苯乙烯纳米塑料(polystyrene nanoplastics,PSNPs)和溴酸盐(BrO-3)广泛存在于水环境中,会对水生生物产生不利影响。为了探究 PSNPs 和溴酸钠(NaBrO3)共存条件下对轮虫的联合毒性效应,以萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)为受试生物,?探究了 PSNPs(0.001、0.1 mg L-1)、NaBrO3(0.001、0.1 mg L-1)以及它们的联合作用对轮虫生命表参数、种群增长、个体及卵大小的影响。PSNPs 和 NaBrO3单一及联合暴露显著影响萼花臂尾轮虫的生命表参数,其中,内禀增长率是最为灵敏的参数。0.1 mg L-1PSNPs 和 0.001、0.1 mg L-1NaBrO3联合暴露使轮虫个体显著减小,0.001 mg L-1PSNPs 和 0.001、0.1 mg L-1NaBrO3联合暴露使轮虫的卵体积显著增大。PSNPs 和 NaBrO3联合作用对轮虫种群增长的抑制产生协同效应,0.001、0.1 mg L-1PSNPs 与 0.001 mg L-1NaBrO3联合作用对轮虫个体的抑制表现出拮抗作用,0.001、0.1 mg L-1NaBrO3能够降低 0.1 mg L-1PSNPs 对轮虫净生殖率的抑制作用。结果表明,PSNPs 和 NaBrO3联合作用对轮虫产生了复杂的毒性效应,且联合毒性效应与 PSNPs、NaBrO3的浓度配比有关。关键词:聚苯乙烯纳米塑料;溴酸盐;萼花臂尾轮虫;联合毒性作用;生命表参数;种群增长;个体及卵大小文章编号:1673-5897(2023)5-236-10 中图分类号:X171.5 文献标识码:ACombined Toxicity of Polystyrene Nanoplastics and Bromate to RotiferBrachionus calyciflorusTao Kaiyan1,Xu Xiaoping1,2,*,Yang Xiaofan1,#,Chen Tao1,Li Binbin1,Li Jincheng11.College of Civil Engineering and Architecture,Anhui Polytechnic University,Wuhu 241000,China2.Collaborative Innovation Center of Recovery and Reconstruction of Degraded Ecosystem in Wanjiang City Belt,Wuhu 241000,ChinaReceived 21 November 2022 accepted 19 February 2023Abstract:Polystyrene nanoplastics(PSNPs)and bromate(BrO-3)exist widely in aquatic environment,which canadversely affect aquatic organisms.In order to explore the combined toxic effects of PSNPs and sodium bromate(NaBrO3)on rotifers,the effects of PSNPs(0.001,0.1 mg L-1),NaBrO3(0.001,0.1 mgL-1)and their combinedactions on life-table parameters,population growth,body and egg size of rotifersBrachionus calycifloruswere in-第 5 期陶开燕等:聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用237?vestigated in this study.The results showed that the single and combined exposure of PSNPs and NaBrO3signifi-cantly affected the life-table parameters ofBrachionus calyciflorus,in which intrinsic rate of population increase?was the most sensitive parameter.The combined exposure of 0.1 mg L-1PSNPs and 0.001,0.1 mgL-1NaBrO3significantly reduced the size of the rotifer body,and the combined exposure of 0.001 mg L-1PSNPs and 0.001,0.1 mg L-1NaBrO3significantly increased the egg size of the rotifers.PSNPs and NaBrO3had a synergistic effecton the inhibition of the population growth of rotifers.0.001,0.1 mg L-1PSNPs and 0.001 mg L-1NaBrO3showedan antagonistic effect on the inhibition of the body size of rotifers.0.001,0.1 mg L-1NaBrO3could reduce the in-hibitory effect of 0.1 mg L-1PSNPs on the net reproductive rate of rotifers.The results showed that the combina-tion of PSNPs and NaBrO3produced complex toxic effects on rotifers,and the combined toxic effects depend onthe concentration ratio of PSNPs and NaBrO3.Keywords:polystyrene nanoplastics;bromate;Brachionus calyciflorus;combined toxic effect;life-table parame-?ters;population growth;body and egg size 塑料制品由于便捷和经济得到了广泛的使用,然而塑料的大量使用、不当处置和难降解造成了大量的塑料垃圾1。研究表明,全球每年大约有 4.801061.27107t 塑料垃圾排入到水环境中2。这些进入到水体中的塑料在水解、光降解和生物分解等作用下会形成粒径更小的塑料微粒,其中,粒径100 nm 的塑料微粒被称为纳米塑料(nanoplastics,NPs)3。NPs 在水体中分布广泛,种类繁多4且易被贻贝、蚤状溞、轮虫等水生生物误食或吸附于生物体表面5-7,并通过食物链进行传递,进而影响水生生物的生理代谢、生长发育和繁殖等过程8-10。此外,NPs 具有粒径小、比表面积大、疏水性强等特点,容易吸附和转移水环境中的其他物质形成复合污染物11-12,造成不可预知的生态风险。聚苯乙烯(PS)是需求量最大的聚合物之一,在水环境中被广泛检出13-14。目前,已有的研究表明,PSNPs 的长期暴露显著降低海水青鳉(Oryzias melastigma)的子代孵化?率,造成胚胎发育畸形15,PSNPs 可以作为水杨酸乙基己酯(EHS)的载体,促进 EHS 在斑马鱼(Danio re-rio)体内的生物积累及其向后代的转移16。溴酸盐(BrO-3)经常在自然水体和处理水中被检出。美国地下水和地表水中溴酸盐浓度分别为 2.6g L-1和 204.6 gL-117,英国受化学品生产厂长期泄露影响的地下水中溴酸盐浓度则达到了 2 mg L-118,我国沈阳、上海两地地表水中溴酸盐浓度分别为 6.96 g L-1和 33.2 gL-119。我国新修订的生活饮用水卫生标准(GB 57492022)20中规定了溴酸盐限值为 10 g L-1。溴酸盐在水中的溶解度和热稳定性高,会在水环境中长期存在并富集,对水中生物造成影响。研究发现,溴酸盐对大型溞(Daphnia magna)48 h、96 h 的 LC50为55.3 mg L-1和46.8 mg L-1,对萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflo-rus)24 h 的 LC50为 365.29 mg L-1,还抑制萼花臂尾?轮虫的游泳速度,降低其净繁殖率、种群增长率,缩短寿命21-22。轮虫是淡水浮游动物群落的重要类群,在维持水生态系统正常的物质循环和能量流动中发挥着重要作用,其中,萼花臂尾轮虫具有分布广泛、世代周期短、易培养和对毒物敏感等特点,是开展水生态毒理学研究的模式生物23。鉴于环境中 PSNPs 与溴酸盐的污染现象日益严重,两者共存时的相互作用很可能对轮虫等重要浮游生物产生复杂的毒性效应,影响水生态系统生物群落结构的稳定。本研究以萼花臂尾轮虫为受试生物,从存活、繁殖、种群增长及形态变化等多个方面研究了低浓度 PSNPs 和NaBrO3对其的联合毒性效应,结果可为探明 PSNPs与 NaBrO3共存条件下对轮虫类浮游生物的影响提供参考,同时为水环境中复合污染物的生态风险评价和控制提供理论支持。1 材料与方法(Materials and methods)1.1 轮虫的采集与培养实验所用的萼花臂尾轮虫采自芜湖市汀棠湖。采样后,随机挑选非混交雌体置于实验室(251)的恒温光照培养箱中进行单克隆培养,光照强度为100 lx,光暗比为 14 h 10 h,在实验室的培养时间超过6 个月。使用美国环境保护局(US EPA)配方24配制轮虫培养液,斜生四链藻(Tetradesmus obliquus)?为轮虫唯一食物来源。斜生四链藻采用 HB-4 培养液培养,待其处于指数增长期时进行离心浓缩收集,238 生态毒理学报第 18 卷储存于 4 下保存备用,投喂密度为 2.0106cells mL-1。实验开始前,将一定数量的轮虫置于(251)的恒温培养箱内进行预培养,此过程中,每 12 h 悬浮一次沉淀于试管底部的藻类食物,每 24 h 更换一次轮虫培养液并投喂新的食物,同时通过去除一部分轮虫个体使种群始终处于指数增长期,预培养时间为 1 周。1.2 测试液的配制实验所用的聚苯乙烯微球(粒径为 0.05 0.1m,2.5%m/V,CAS:9003-53-6)购自上海阿拉丁生?化科技股份有限公司,原液在 4 下避光保存。表征结果显示,该聚苯乙烯纳米塑料平均粒径为(83.340.60)nm,Zeta 电位为(26.200.46)mV,且呈较为规则的球形,分散效果良好(图 1)。NaBrO3(分析纯,99.8%)购自国药集团化学试剂有限公司。实验开始前,用蒸馏水配制 100 mgL-1的 PSNPs 母液和 1 000 mgL-1的 NaBrO3母液,并置于 4 下保存。为了减小 PSNPs 的聚集作用,每次使用前进行30 min 的超声处理,并每24 h 配制一次测试液。结合溴酸盐的实际环境检测浓度及水质标准中规定的限值等因素,设置测试液的浓度为PSNPs:0.001 mgL-1(低浓度,L)、0.1 mgL-1(高浓度,H),NaBrO3:0.001 mgL-1(低浓度,L)、0.1 mgL-1(高浓度,H),参考杨越等25不同毒性比联合毒性实验的设计思路,设置了 PSNPs-NaBrO3相同浓度比和不同浓度比的联合处理组,探究联合毒性作用中 2 种污染物的浓度配比对毒性效应的影响,测试液(PSNPs-NaBrO3)的组成及浓度见表 1。1.3 生命表实验实验开始时,从完成预培养的轮虫中随机吸取若干个带卵的非混交雌体,置于和预培养条件相同的小玻璃杯中进行培养,并每隔 2 h 把孵化出的轮虫幼体取出用于生命表实验。实验在 24 孔培养板中进行,每个孔中放入一只幼体(龄长2 h),并加入0.5 mL 测试液(含有2.0106cells mL-1斜生四链藻),每个浓度设置3 组重复,将培养板置于(251)、无光照的恒温培养箱中进行实验。实验开始 12 h 后的 48 h 内,每4 h 观察一次、48 h 之后每8 h 观察一次轮虫的存活及产卵情况,记录轮虫母体的存活情况及产生的幼体数量,并移出所产幼体。实验期间每 24 h 更换一次测试液并投喂新的斜生四链藻,实验至母体全部死亡为止。基于实验记录,参照 Xue 等26的方法计算轮虫主要发育阶段的历时,包括幼年期(JP,指从幼体孵出到其产出第一枚卵所经历的时间);胚胎发育时间(ED,指从卵的产出到幼体孵出所经历的时间);生殖期(RP,从第一枚卵产出到最后一枚卵产出所经历的时间);生殖后期(PP,从轮虫产出最后一枚卵到其死亡所经历的时间)。生命表参数的定义和计算方法参照 Ge 等27的方法,特定年龄存活率(lx)为X年龄组开始时存活?个体百分数;特定年龄繁殖率(mx)为X年龄组平均?每个个体所产的后代数;生命期望(e0)为各轮虫个体?出生时能存活多久的估计值;净生殖率(R0)为种群?经过一个世代后的净增长率,R0=lxmx;世代时?间(T)为轮虫完成一个世代所经历的时间,T=?lxmxxR0;平均寿命(LS)为所有个体平均存活时间?的观察值;内禀增长率(rm)为种群在特定实验条件下图 1 聚苯乙烯纳米塑料(PSNPs)的形貌Fig.1 Morphology of polystyrene nanoplastics(PSNPs)表 1 实验测试液 PSNPs-NaBrO3的浓度组成Table 1 The concentration composition of the experimental test solution PSNPs-NaBrO30-0L-0H-00-L0-HL-LL-HH-LH-HPSNPs/(mg L-1)00.0010.1000.0010.0010.10.1NaBrO3/(mg L-1)0000.0010.10.0010.10.0010.1第 5 期陶开燕等:聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用239 的最大增长率,先根据方程rm=lnR0T粗略计算,再根据方程nx=0e-rmxlxmx=1在 Excel 中试算求得种群?内禀增长率的精确值。1.4 种群增长实验从预培养好的试管中随机取 10 只龄长2 h 的轮虫幼体,将其置于 5 mL 刻度试管中,加入 5 mL测试液(含有 2.0106cellsmL-1斜生四链藻),每个浓度设置3 组重复,置于(251)、无光照的恒温培养箱中进行群体累积培养。实验期间,每 12 h 悬浮一次沉积于试管底部的藻类食物,每 24 h 更换一次测试液;72 h 后,分别计数存活轮虫的携卵雌体数、不携卵雌体数、混交雌体数和休眠卵数。轮虫种群增长率(r)的计算公式为:r=lnNt-lnN0t,?式中:N0、Nt分别为实验开始时和实验进行到第t天时的种群密度,t为时间,本研究中t=3。计算种群中携卵雌体数与不携卵雌体数的比值(OF/NOF),混交雌体数与总雌体数的比值(MR)。1.5 轮虫个体大小和卵体积实验从预培养好的烧杯中随机取 30 只龄长2 h 的轮虫幼体,将其置于10 mL 刻度试管中,加入10 mL测试液(含有 2.0106cellsmL-1斜生四链藻),每个浓度设置3 组重复,置于(251)、无光照的恒温培养箱中进行培养。实验开始8 h 后每2 h 观察一次轮虫,待轮虫携带第一枚卵后取出,用 5%甲醛固定。采用蔡康光学(XSP-8CC)显微装置和图像采集系统对固定的轮虫进行拍照并进行测量。根据萼花臂尾轮虫的形态学特征,本实验采用 Fu 等28和 Ciros-Prez等29的方法,测量轮虫的背甲宽度、背甲长度、卵长径和卵短径4 个形态参数,根据 Sarma 和 Rao30的公式计算轮虫的个体大小(body size,BS)和卵体积(eggsize,ES):BS=a2b5,ES=(m2n+n2m)12,式中:a和?b分别为背甲长度和背甲宽度,m和n分别为卵长?径和卵短径。1.6 数据统计与分析采用 Excel 和 SPSS 21.0 对数据进行处理与分析,Origin2019 作图,数据以平均值标准差(MeanSD)表示。对所得数据进行正态分布检验和方差齐性检验,符合以上条件的数据,采用单因素方差分析和多重比较(LSD)检验各实验组与空白组之间的差异显著性。P0.05 表示差异显著。2 结果(Results)2.1 PSNPs 和 NaBrO3对萼花臂尾轮虫生命表参数的影响 生存分析结果表明,H-H 处理组的存活率显著高于对照组(P0.05),但 L-L、L-H、H-L、?H-H 处理组均使繁殖率的最高点降低且延长了较高繁殖率的时间(图 2)。发育阶段的结果表明,与对照组相比,0-H、L-L、H-L、H-H 处理组的 JP 显著延长(P0.05),H-L 处?理组的 ED 显著缩短;0-H、L-L、H-H 处理组的 RP显著延长(P0.05);0-H 处理组的 PP 显著缩短(P0.05)(图 3)。单因素方差分析结果表明,与对照组相比,H-L、H-H 处理组使e0、LS 值显著延长(P0.05),H-0 处?理组使R0值显著降低,L-H 处理组使R0值显著升?高(P0.05),0-H、L-L、L-H、H-L 和 H-H 处理组显著?延长了T(P0.05),H-0、0-L、0-H、L-L、H-L、H-H 处?理组显著降低了rm(P0.05),?不同表示差异显著(P0.05),while the different letters represent significant?difference(P0.05).第 5 期陶开燕等:聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用241 图 3 PSNPs-NaBrO3暴露对萼花臂尾轮虫发育阶段的影响注:(a)、(b)、(c)、(d)分别为胚胎发育期、幼年期、生殖期和生殖后期;a、b、c、d 表示不同处理组间存在显著差异(P0.05);表示平均值,表示中位数,误差棒表示标准差。Fig.3 Effects of PSNPs-NaBrO3exposure on the developmental stages ofB.calyciflorusNote:(a),(b),(c)and(d)represent embryonic development,juvenile period,reproductive period and post-reproductive period respectively;a,b,cand d represent significant difference between each group(P0.05);show mean value,show median,error bars indicate SD(n=3).生物种群的所有个体都承担着种群繁衍的任务,生物种群的增长或衰亡是所有个体存活和繁殖的累积表现。研究表明,面对外界环境和毒物的压力时,轮虫个体会在繁殖和生存之间进行能量的分配权衡36。如低温下轮虫寿命的延长要以牺牲繁殖为代价,且温度越低,轮虫所摄取的能量就会越倾向于用来维持自身生命活动37。而 Xu 等38研究发现,较高浓度 DDT 暴露下,轮虫选择降低繁殖率来实现对毒物的适应。本研究中,轮虫的 JP 和T值在多个处理组中被显著延长,而R0值却没有受到显著影响(除了 H-0、L-H 组外),表明轮虫受到胁迫后,在不降低后代个数的情况下,推迟了繁殖开始的时间,延长了后代产出的周期,降低了繁殖频次,这直接导致了rm值的显著降低,轮虫个体对种群增长的贡献?在减少,其结果必然增加轮虫种群衰亡的风险。然而,值得注意的是,在 H-L 和 H-H 组中,轮虫的 LS值被显著延长了,而这 2 组的rm值是所有处理组中?最低的 2 组,表明在耐受压力下,轮虫试图通过延长寿命增加可能的“繁殖机会”以弥补rm的降低给种?群带来的风险。在受污染环境中,生物体会把部分能量用于抵抗污染物的胁迫39。研究表明,轮虫对微囊藻毒素的抵抗是一个耗能过程,它可以通过减小形态学参数,节约生长能量以抵抗微囊藻毒素的胁迫40。本研究中,L-0、H-0、0-L、0-H 和 H-H 处理组的 BS 均显著减小,表明轮虫减少了用于自身发育的能量来增加对 PSNPs 和 NaBrO3单一及联合暴露的抵抗。同样,当能量有限时,轮虫的繁殖会在卵大小和产卵量之间进行权衡41。如食物短缺时,桡足类会产出体积较大但数量较少的卵,以保证后代有较高的存242 生态毒理学报第 18 卷活率,能更好地维持种群的延续42。本实验中,L-L处理组的rm显著降低,ES 显著增大,表明轮虫采取?降低产卵效率,提高卵质量的对策来增强对低浓度PSNPs 和 NaBrO3联合胁迫的抵抗。图 4 PSNPs-NaBrO3暴露对萼花臂尾轮虫种群增长的影响注:(a)PSNPs-NaBrO3暴露 3 d 后萼花臂尾轮虫的种群增长率;(b)PSNPs-NaBrO3暴露 3 d 后种群中携卵雌体数与不携卵雌体数的比值(OF/NOF);a、b、c、d 表示不同处理组间存在显著差异(P0.05)。Fig.4 Effects of PSNPs-NaBrO3exposure on population growth rate ofB.calyciflorusNote:(a)Population growth rate ofB.calyciflorusafter 3 d exposure to PSNPs-NaBrO3;(b)Ratio of the number of carrying femalesto the number of non-carrying females in the population after 3 d exposure of PSNPs-NaBrO3(OF/NOF);a,b,c and d representsignificant difference between each group(P0.05).图 5 PSNPs-NaBrO3暴露对萼花臂尾轮虫个体及卵大小的影响注:(a)PSNPs-NaBrO3暴露后萼花臂尾轮虫的个体大小;(b)PSNPs-NaBrO3暴露后萼花臂尾轮虫的卵大小;a、b、c、d 表示不同处理组间存在显著差异(P0.05)。Fig.5 Effects of PSNPs-NaBrO3exposure on body and egg size ofB.calyciflorusNote:(a)Body size ofB.calyciflorusafter exposure to PSNPs-NaBrO3;(b)Egg size ofB.calyciflorusafter exposure to PSNPs-NaBrO3;a,b,c and d represent significant difference between each group(P0.05).PSNPs 由于粒径小,比表面积大,容易吸附环境中与之共存的污染物,从而影响共存污染物对生物体的毒性效应,同时 PSNPs 与污染物之间可能存在复杂的相互合作,造成难以预料的生物效应。通常混合物的生物效应大于单一组分的生物效应。有研究发现,高浓度微塑料和氟苯尼考联合作用对河蚬摄食率的抑制远大于两者单独作用的抑制之和43;微塑料和文拉法辛共存时泥鳅体内超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于单独接触文拉法辛时的活性44,表明微塑料和共存的污染物之间存在协同作第 5 期陶开燕等:聚苯乙烯纳米塑料和溴酸盐对萼花臂尾轮虫的联合毒性作用243 用。本研究中,PSNPs 与 NaBrO3共存时,所有联合处理组(L-L、L-H、H-L、H-H)的r均受到显著抑制,?且抑制效果显著高于各自对应的单独处理组,表明PSNPs 与 NaBrO3对轮虫r的抑制存在协同作用。?造成协同毒性效应的原因可能是:轮虫是一种滤食性动物,可以通过摄食使 PSNPs 进入体内,而PSNPs 作为 NaBrO3的载体,导致 NaBrO3进入到轮虫体内的量增多,污染物的有效浓度增高,对轮虫r的抑制效果增强。或者是 PSNPs 独特的化学性质?改变了细胞膜的通透性,使得 NaBrO3更容易进入膜内产生作用。然而,不是所有联合作用都会使毒性效应增强。研究表明,PS-MPs 和罗红霉素(ROX)共同暴露对大型溞的氧化胁迫并没有比单一暴露强45,阿伏苯宗(AVO)的存在能够减轻 PSNPs 对斑马鱼的毒性作用46。本实验中,H-L、H-H 暴露对rm的抑制作用?与 H-0、0-L、0-H 单独暴露时无显著差异,呈现出独立作用。而 L-L、H-L 暴露对 BS 的抑制作用与各自对应的单独暴露相比反而减弱了,呈现出拮抗作用。此外,NaBrO3的存在降低了0.1 mg L-1PSNPs 对轮虫R0的抑制作用。上述情况结合协同效应充分表?明,不同浓度 PSNPs 和 NaBrO3以及二者不同的组合方式,对轮虫产生的毒性效应不尽相同,体现出联合毒性效应的复杂性。通信作者简介:徐晓平(1979),男,博士,教授,主要研究方向为水污染监测与控制、生态毒理学。共同通信作者简介:杨晓凡(1978),男,博士,副教授,主要研究方向为工业污染控制与治理。参考文献(References):1 Xu S,Ma J,Ji R,et al.Microplastics in aquatic environ-ments:Occurrence,accumulation,and biological effectsJ.The Science of the Total Environment,2020,703:1346992 Haward M.Science-based solutions to plastic pollutionJ.One Earth,2020,2(1):5-73 Mattsson K,Hansson L A,Cedervall T.Nano-plastics inthe aquatic environment J.EnvironmentalScienceProcesses&Impacts,2015,17(10):1712-17214 Lv M J,Jiang B,Xing Y,et al.Recent advances in thebreakdown of microplastics:Strategies and future pro-spectives J.Environmental Science and Pollution Re-search International,2022,29(44):65887-65903 5 Kolandhasamy P,Su L,Li J N,et al.Adherence of micro-plastics to soft tissue of mussels:A novel way to uptakemicroplastics beyond ingestion J.Science of the TotalEnvironment,2018,610-611:635-6406 Liu Z Q,Cai M Q,Wu D L,et al.Effects of nanoplasticsat predicted environmental concentration onDaphniapulexafter exposure through multiple generations J.En-?vironmental Pollution,2020,256:113506 7 Xue Y H,Sun Z X,Feng L S,et al.Algal density affectsthe influences of polyethylene microplastics on the fresh-water rotiferBrachionus calyciflorusJ.Chemosphere,?2021,270:1286138 陈涛,徐晓平,李彬彬,等.聚苯乙烯微塑料和纳米塑料对萼花臂尾轮虫有性生殖的毒性影响J.环境科学研究,2022,35(5):1306-1314Chen T,Xu X P,Li B B,et al.Effects of polystyrene mi-croplastics and nanoplastics on sexual reproduction of ro-tiferBrachionus calyciflorusJ.Research of Environmen-?tal Sciences,2022,35(5):1306-1314(in Chinese)9 Mao Y F,Ai H N,Chen Y,et al.Phytoplankton responseto polystyrene microplastics:Perspective from an entiregrowth period J.Chemosphere,2018,208:59-6810 Jiang W W,Fang J H,Du M R,et al.Microplastics influ-ence physiological processes,growth and reproduction inthe Manila clam,Ruditapes philippinarumJ.Environ-?mental Pollution,2022,293:11850211Sui Y M,Wang S Y,Mohsen M,et al.The combinedeffect of plastic particles size and concentration on roti-fers(Brachionus plicatilis)performance J.Journal of?Ocean University of China,2022,21(2):509-51912 Drago C,Pawlak J,Weithoff G.Biogenic aggregation ofsmall microplastics alters their ingestion by a commonfreshwater micro-invertebrate J.Frontiers in Environ-mental Science,2020,8:57427413 Xiong X,Wu C X,Elser J J,et al.Occurrence and fate ofmicroplastic debris in middle and lower reaches of theYangtze River-From inland to the sea J.Science of theTotal Environment,2019,659:66-7314 Li C R,Busquets R,Campos L C.Assessment of micro-plastics in freshwater systems:A review J.The Scienceof the Total Environment,2020,707:13557815 靳非,田淼,穆景利,等.聚苯乙烯微塑料长期暴露对海水青鳉(Oryzias melastigma)亲代生长、繁殖及子代发?育的影响J.生态毒理学报,2021,16(4):216-223Jin F,Tian M,Mu J L,et al.Effects of polystyrene micro-plastics on growth and reproduction of parental generationand development of filial generation of marine medaka(Oryzias melastigma)after a long-term exposure J.Asi-244 生态毒理学报第 18 卷?an Journal of Ecotoxicology,2021,16(4):216-223(inChinese)16 Zhou R R,Lu G H,Yan Z H,et al.Interactive transgener-ational effects of polystyrene nanoplastics and ethylhexylsalicylate on zebrafish J.Environmental Science:Nano,2021,8(1):146-15917Kemsley J.Bromate in Los Angeles water J.Chemical&Engineering News Archive,2007,85(52):918 Cornelissen J P,Kafouros M,Lock A R.Metaphorical im-ages of organization:How organizational researchers de-velop and select organizational metaphors J.Human Re-lations,2005,58(12):1545-157819 Wu Q,Zhang T,Sun H W,et al.Perchlorate in tap water,groundwater,surface waters,and bottled water from Chi-na and its association w