经细胞蜡块诊断恶性肿瘤15例临床病理分析.pdf

3 9西藏医药 2 0 2 3 年第 4 4 卷第 5 期（总 1 7 0 期）年藏族居民酒精性肝病患病现状及其影响因素 J .中国公共卫生,2 0 1 6,3 2(0 3):2 9 5-2 9 8.1 0 周昌衡,周喜汉.桂西地区 7 2 0 例上消化道出血患者的病因分析 J .右江医学,2 0 2 0,4 8(0 8):6 0 6-6 1 0.1 1 D U A N F,L I U L,C H E N X,e t a l.G e n e t i c r i s k a n d g a s t r i c c a n c e r:p o l y g e n i c r i s k s c o r e s i n p o p u l a t i o n-b a s e d c a s e-c o n t r o l s t u d y J .E x p e r t R e v M o l D i a g n,2 0 2 3;1 0.1 0 8 0.1 2 麻荣.对不同年龄段上消化道出血患者临床特点的分析 J .当代医药论丛,2 0 1 7,1 5(0 4):4 5-4 7.1 3 P A L L I O S,ME L I T A G,S H A H I N I E,e t a l.D i a g n o s i s a n d M a n a g e m e n t o f E s o p h a g o g a s t r i c V a r i c e s J .D i a g n o s t i c s (B a s e l),2 0 2 3,1 3(6).1 4 P u i a A,S c h l a n g e r D,F e t t i A,P o p a C,N e c u l a A,A l H a j j a r N.D o P a t i e n t D e l a y a n d D i a g n o s t i c D e l a y I n f l u e n c e L o n g T e r m S u r v i v a l i n P a t i e n t s w i t h G a s t r i c C a n c e r?J .J G a s t r o i n t e s t i n L i v e r D i s.2 0 2 2;3 1(4):3 9 6-4 0 2.本文责任编辑 熊海临床医学经细胞蜡块诊断恶性肿瘤 1 5 例临床病理分析周凯华南京市高淳中医院病理科 江苏南京 2 1 1 3 0 0摘要 目的 探讨细胞蜡块诊断恶性肿瘤的价值及临床病理特点。方法 回顾性分析 2 0 2 0 年 1 月2 0 2 3 年 4 月本院经细胞蜡块联合免疫细胞化学检查明确诊断为恶性肿瘤的患者 1 5 例病理资料。分析不同病理检测对诊断恶性肿瘤的价值。结果 细胞蜡块标本中：肺腺癌 1 0 例（6 6.6 7%），T T F-1、Na p s i n A、C E A、C K 7 阳性表达；肺小细胞癌 1 例（6.6 7%），C D 5 6、S y n、T T F-1 阳性表达；肺鳞状细胞癌 1 例（6.6 7%），C K 5/6 及 P 4 0 阳性表达；阴道腺癌 1 例（6.6 7%），C K 7、P a x-8、E R阳性表达；乳腺癌 1 例（6.6 7%），G A T A 3 及 E R阳性表达；卵巢浆液性腺癌 1 例（6.6 7%），C K 7、P a x-8、WT-1 阳性表达。结论 细胞蜡块联合免疫细胞化学检查及临床资料能够对细胞学片中发现的异型细胞明确来源及性质，对恶性肿瘤有诊断价值。关键词 细胞蜡块 恶性肿瘤 免疫细胞化学 鉴别诊断目前诊断恶性肿瘤的方法有影像学诊断和病理学诊断等等，而病理诊断常被认为是肿瘤诊断的“金标准”。活检组织病理标本常需要通过手术或活检获取，属有创检查，易导致患者痛苦和并发症，而细胞学检查标本较活检标本容易获得，而且可以多次离心富集细胞，制成细胞蜡块，可以重复切片进行免疫细胞化学检查确定细胞来源及性质 1。特别是对于临床分期较晚的恶性肿瘤，丧失了手术机会，无法获得手术标本或活检标本时，较容易获取的细胞学标本成了可用于病理诊断的有价值的可选标本 2。细胞蜡块技术越来越多的应用到临床病理诊断中 3。本文通过对 1 5 例经细胞蜡块病理诊断为恶性肿瘤患者的临床病理资料进行回顾性分析，旨在探讨细胞蜡块诊断恶性肿瘤的价值及临床病理特点。1 材料与方法1.1 材料回顾性分析 2 0 2 0 年 1 月 2 0 2 3 年 4 月本院经细胞蜡块联合免疫细胞化学检查明确诊断为恶性肿瘤的患者 1 5 例病理资料。其中男 9 例，女 6 例。年龄 5 5岁 8 7 岁，平均年龄为 7 5.3 岁。标本来源：胸水来源1 3 例，腹水来源 1 例，肺泡灌洗液来源 1 例。1.2 方法1.2.1 细胞学涂片的制作：临床送检的细胞病理学检查标本一般体积为 1 0 0毫升以上，病理科接收后分批装入 5 0 毫升带刻度的尖底离心管离心（如标本量较少则全部离心，离心机型号 T D 4 Z-WS，由湖南湘鹰离心机有限公司生产），转速 2 0 0 0 转/m i n，离心 1 0 分钟后，倒去上清液，用一次性吸管吸取适量离心管底部含有沉淀物的细胞液，滴在准备好的载玻片上，按照细胞学涂片制作规范制成细胞学涂片，放入 9 5%浓度的乙醇固定 1 5 分钟后，进行苏木素伊红染色液（H E）染色，显微镜下观察评估，剩余标本放在冰箱冷藏备用。1.2.2 细胞蜡块的制作：将上述细胞学涂片病理检查显微镜下发现异型细胞、可疑恶性肿瘤的 1 5 例标本，分管装入 5 0 毫升带刻度的尖底离心管多次离心，倒去上清液，离心管底部沉渣部分以 1：1 体积比加入丙酮试剂混合均匀，再次以转速 2 0 0 0 转/m i n 离心 1 0 分钟，倒去上清液，离心管底部沉淀物用专用包埋纸包裹放入包埋盒内，常规脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡，包埋机包埋后制成细胞蜡块，4 微米厚度切片，苏木素伊红染色液染色。1.2.3 免疫细胞化学检查：综合细胞学涂片及细胞蜡块 H E切片显微镜下异型细胞的细胞形态、排列方式、影像资料、临床病史等有针对性的选择不同的抗体组合：T T F-1、C K 7、N a p s i n A、C E A、C D 5 6、S y n、C K 5/6、P 4 0、E R、P a x-8、G A T A 3、WT-1 等抗体进行免疫细胞化学检测。用细胞蜡块连续切片，烤片 1 小时后脱蜡至水，采用 E n V i s i o n 法，工作液和抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。使用全自动免疫组化染色机（北京中杉 u l t r a P A T H）进行免疫细胞化学染色，D A B显西藏医药 2 0 2 3 年第 4 4 卷第 5 期（总 1 7 0 期）4 0色。严格按照常规设置阴性和阳性对照标本，按照说明书操作。免疫细胞化学染色阳性是指显微镜下观察可见肿瘤细胞内具有定位准确的棕褐色或者棕黄色颗粒，P 4 0、T T F-1、E R、P a x-8、G A T A 3、WT-1阳 性表达定位于肿瘤细胞核，C E A、N a p s i n A、S y n、C K 7、C K 5/6 阳性表达定位于肿瘤细胞质，C D 5 6 阳性表达定位于肿瘤细胞膜。阴性：肿瘤细胞不着色。2 结果2.1 细胞学涂片结果：1 5 例标本细胞学涂片背景可见较多炎症细胞及红细胞，均可见少量散在的核大、浓染、核浆比例高的异型细胞，单个或成团状排列，不能判断细胞来源及做出明确的病理诊断。2.2 细胞蜡块切片显微镜下病理特点肺腺癌显微镜下病理特点：肿瘤细胞呈现簇状、单个或者腺样、花环状排列，核浆比例大且核大深染，可见核仁；肺小细胞癌病理特点：肿瘤细胞单个松散或者多个细胞凝聚成团，呈现小块状排列，细胞呈圆形或者梭形，细胞胞浆少，核染色程度深，呈颗粒状，未见核仁；肺鳞状细胞癌 1 病理特点：肿瘤细胞呈片状排列分布，可见细胞间桥，偶见角化细胞，核深染，胞浆嗜酸性，可见核仁及病理性核分裂像。阴道腺癌病理特点：细胞蜡块切片显示细胞异型性明显，排列呈腺管样或者栅栏样，核染色深且核分裂像易见。乳腺癌病理特点：肿瘤细胞呈巢团样或者腺样排列，边缘较光整并且胞浆嗜酸性。卵巢浆液性腺癌 1 病理特点：肿瘤细胞呈簇状、腺样、乳头样排列，核大且染色质粗，核仁明显，易见核分裂。2.3 免疫细胞化学结果 见表表 免疫细胞化学结果(n=15)恶性肿瘤类型标本来源n 百分比（%）免疫细胞化学阳性表达抗体肺腺癌胸水1 06 6.6 7T T F-1（1 0/1 0）、C E A（1 0/1 0）C K 7（1 0/1 0）、N a p s i n A（9/1 0）乳腺癌胸水16.6 7G A T A 3（1/1）、E R（1/1）卵巢浆液性腺癌胸水16.6 7C K 7（1/1）、P a x-8（1/1）、WT-1（1/1）肺小细胞癌胸水16.6 7S y n（1/1）、C D 5 6（1/1）、T T F-1（1/1）肺鳞状细胞癌肺泡灌洗液16.6 7C K 5/6（1/1）、P 4 0（1/1）阴道腺癌腹水16.6 7C K 7（1/1）、P a x-8（1/1）、E R（1/1）3 讨论细胞学标本制备成细胞蜡块的方式，可以保留比较好的组织学结构，此外细胞蜡块也可为之后的免疫组化以及基因测定提供良好的组织基础，可操作性强，满足临床对肿瘤定性、分型、鉴别肿瘤细胞来源等要求 5。细胞蜡块切片经苏木素伊红染色后，可观察体液中细胞的形态特征，联合免疫细胞化学，可反复切片及长期保存标本，可帮助寻找更多的诊断证据 6。本组 1 0 例胸水细胞蜡块标本确诊为肺腺癌（6 6.6 7%）。免疫细胞化学检查，如肿瘤细胞表达T T F-1、N a p s i n A、C E A、C K 7 等标记物阳性，则提示肿瘤细胞来源于肺腺癌 7。1 例肺小细胞癌免疫细胞化学 C D 5 6、S y n、T T F-1 阳性表达，提示来源于肺小细胞癌。本组诊断肺鳞状细胞癌的免疫细胞化学表达 C K 5/6 及 P 4 0 等鳞状细胞来源的特异性标记物。本组阴道腺癌病例以腹水为首发症状，免疫细胞化学C K 7、P a x-8、E R阳性表达，提示肿瘤来源于女性生殖系统。本组诊断为卵巢浆液性腺癌，免疫细胞化学C K 7、P a x-8、WT-1 阳性表达，P a x-8（配对盒基因 8）是 P a x 核转录因子家族成员之一，表达于甲状腺及女性生殖系统相关肿瘤，在卵巢浆液性癌中高表达 8。结合临床病史，本例符合卵巢浆液性腺癌来源。本组诊断为乳腺癌行免疫细胞化学检查显示 G A T A 3 及 E R阳性，G A T A 3 抗体是一种锌指转录因子，主要表达于乳腺癌和尿路上皮癌，在其他肿瘤中很少表达 9，1 0。结合 E R表达阳性及患者既往病史，本例符合乳腺癌来源。综上所述，对于临床送检的细胞学标本，离心机离心富集细胞制成细胞蜡块，以细胞学涂片及细胞蜡块切片显微镜下形态为基础，结合临床病史及影像学资料，辅助免疫细胞化学技术，有针对性的选择不同的抗体组合，能够对细胞学涂片中发现的异型细胞明确来源及性质，对恶性肿瘤有诊断价值，值得推广应用。【参考文献】1 周兵，熊基玲，彭丽姿，等细胞蜡块在恶性胸水诊断和个体化治疗中的应用价值 J 临床肺科杂志，2 0 2 1，2 6(1 1):1 7 0 3 1 7 0 7 2 王双双,孙怡,赵苏苏,等.胸水细胞蜡块在晚期肿瘤诊断 及 肺 腺 癌 E G F R/A L K/R O S 1检 测 中 的 应 用 J .临 床 与 病 理 杂志,2 0 2 0,4 0(5):1 1 5 9-1 1 6 3.3 刘甜，刘嘉敏，陈 意，等.细胞蜡块结合免疫组织化学、分子病理在胸腔积液病理诊断中的应用 J .诊断病理学杂志，2 0 2 1，2 8（2）：1 5 2-1 5 4.4 黄晓萍.肺腺癌恶性胸腔积液细胞蜡块的诊断价值及表皮生长因子受体表达的临床意义 J .中国基层医药,2 0 1 8,2 5(1 6):2 0 4 9-2 0 5 2.5 蒋宗英，王瑞肖，李国富，等细胞蜡块结合免疫组化技术对腹腔积液良恶性的诊断价值 J 中国当代医药，2 0 2 2，2 9(3 6):4 2-4 4.6 王莉莉,段海瑞,敖启林.细胞蜡块制作方法改良及在浆膜腔积液临床病理分析中的应用 J .中国组织化学与细胞化学杂志,2 0 2 0,2 9(4):3 6 4-3 6 8.7 刘甜，周颖，胥素娟，等细胞蜡块制作方法精细化改良及在腹腔积液病理诊断中的应用 J 诊断病理学杂志，2 0 2 2，2 9(8):7 7 4 7 7 6 8 赵帅,肖琳.细胞块结合免疫组化技术在恶性胸腔积液病理诊断中的应用 J .肿瘤基础与临床,2 0 1 9,3 2(3):2 5 3-2 5 5.9 王婷婷，马盛宗，马晓红，等.P A X-8 在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义 J .宁夏医学杂志，2 0 2 0，4 2（1）：1 8-2 0.1 0 吴开良，时倩倩，杨壹羚，等.G A T A 3 在乳腺癌中的研究进展 J .中国现代医学杂志，2 0 2 1，3 1（5）：3 4-3 8.本文责任编辑 石泉贵