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221206
【221206】生物化学第11次带读课作业-答案
生物化学
11
次带读课
作业
答案
蛋白质的合成1.UAA/UAG/UGA2.方向性、连续性、简并性、摆动性、通用性3.反密码子第 1 位碱基为次黄嘌呤(I),可与密码子第 3 位的 A、C、U 配对;反密码子第 1 位的 U,可与密码子第 3 位的 A、G 配对;反密码子第 1 位的 G,可与密码子第 3 位的 C 或 U 配对。4.一个是氨基酸结合部位(tRNA 的氨基酸臂的-CCA 末端的腺苷酸3-OH),另一个是 mRNA 的结合部位(tRNA 反密码环中的反密码子)。5.A 位-结合氨酰-tRNA,称氨酰位;P 位-结合肽酰-tRNA,称肽酰位;E 位-释放已经卸载了氨基酸的 tRNA,称排出位。6.起始因子:IF1-占据核糖体 A 位,防止 tRNA 过早结合于 A 位;IF2-促进 fMet-tRNA fmet 与小亚基结合;IF3-防止大小亚基过早结合;增强 P 位结合 fMet-tRNA fmet 的特异性。延长因子:EF-Tu:促进氨酰-tRNA进入A位,结合并分解GTP;EF-Ts:EF-Tu 的调节亚基;EF-G:转位酶活性,促进 mRNA-肽酰-tRNA 由 A位移至 P 位,促进 tRNA 卸载与释放。释放因子:RF1-特异性识别终止密码子 UAA 或 UAG,诱导肽酰转移酶转变酯酶;RF2-特异性识别终止密码子 UAA 或 UGA,诱导肽酰转移酶转变酯酶;RF3-具有 GTPase 活性,新合成肽链从核糖体释放后,促进 RF1 或 RF3 与核糖体分离。7.氨酰-tRNA 合成酶;2 个高能磷酸键8.核糖体大小亚基分离:完整核糖体在 IF 的帮助下,大、小亚基解离;IF3 的作用是稳定大、小亚基的分离状态.mRNA 与核糖体小亚基结合:小亚基与 mRNA 结合时,可准确识别可读框的起始密码子 AUG,而不会结合内部的 AUG,从而正确地翻译出所编码蛋白质;fMet-tRNA fMet 结合在核糖体 P 位:fMet-tRNA fMet 与结合了GTP 的 IF2 一起,识别并结合对应于小亚基 P 位的 mRNA 的 AUG 处;此时,A 位被 IF1 占据,不与任何氨酰-tRNA 结合;翻译起始复合物形成:结合于 IF2 的 GTP 被水解,释放的能量促使 3 种 IF 释放,大亚基与结合了 mRNA、fMet-tRNA fMet 的小亚基结合,形成由完整核糖体、mRNA、fMet-tRNA fMet 组成的翻译起始复合物。9.进位/注册:指氨酰-tRNA 按照 mRNA 模板的指令进入核糖体 A位的过程;翻译起始复合物中的 A 位是空闲的,并对应着可读框的第二个密码子,进入 A 位的氨酰-tRNA 种类即由该密码子决定,氨酰-tRNA 先与 GTP-EF-Tu 结合成一复合物,然后进入 A 位,GTP 随之水解,EF-Tu-GDP 从核糖体释放。GTP-EF-Tu 又可循环生成。成肽:指核糖体 A 位和 P 位上的 tRNA 所携带的氨基酸缩合成肽的过程。由肽酰转移酶催化,肽酰转移酶属于一种核酶。在起始复合物中,P 位上起始 tRNA 所携带的甲酰甲硫氨酸,与 A 位上新进位的氨酰 tRNA 的-氨基缩合形成二肽,第一个肽键形成后,二肽酰-tRNA 占据核糖体 A 位,而卸载了氨基酸的 tRNA 仍在 P 位。转位:成肽反应后,核糖体需要向 mRNA 的 3-端移动一个密码子的距离,方可阅读下一个密码子,此过程为转位,核糖体的转位需要延长因子 EF-G(即转位酶),并需要 GTP 水解供能,P 位上的tRNA 所携带的氨基酸或肽在成肽后交给 A 位上的氨基酸,P 位上卸载的 tRNA 转位后进入 E 位,然后从核糖体脱落,成肽后位于 A 位的肽酰-tRNA 移动到 P 位,A 位空出,且准确定位在 mRNA 的下一个密码子,以接受下一个氨酰-tRNA 进位。10.4 个高能磷酸键11.终止密码子不被任何氨酰-tRNA 识别,只有释放因子 RF 能识别终止密码子而进人 A 位,这一识别过程需要水解 GTP。RF1-特异识别 UAA 或 UAG;RF2-特异识别 UAA 或 UGA,RF1、RF2 均可诱导肽酰转移酶转变为酯酶;RF3-具有 GTPase 活性,当新生肽链从核糖体释放后,促进 RF1 或 RF2 与核糖体分离。12.Rnase P、snRNA、肽酰转移酶。13.热激蛋白 70/伴侣蛋白14.除了需要分子伴侣协助肽链折叠外,一些蛋白质形成正确空间构象还需要异构酶的参与。蛋白质二硫键异构酶:帮助肽链内或肽链间二硫键的正确形成;肽脯氨酰基顺-反异构酶:可使肽链在各脯氨酸残基弯折处形成正确折叠。15.新生肽链的水解是肽链加工的重要形式。16.丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸17.伊短菌素和密旋霉素可引起 mRNA 在核糖体上错位,从而阻碍翻译起始复合物的形成,对原核生物和真核生物的蛋白质合成均有抑制作用;伊短菌素还可以影响起始氨酰-tRNA 的就位和 IF3 的功能;晚霉素结合于原核 23S rRNA,阻止 fMet-tRNA fMet 的转位。18.白喉毒素:真核细胞蛋白质合成的抑制剂,它作为一种修饰酶,可使 eEF2 发生 ADP-核糖基化修饰,生成 eEF2-腺苷二磷酸核糖衍生物,使 eEF2 失活,从而抑制蛋白质的合成;蓖麻毒蛋白:B 链上的半乳糖结合位点,也是蓖麻毒蛋白发挥毒性作用的活性部位。