PCT、IL-6和PA在新生儿细菌性感染中检测意义及与T淋巴细胞亚群水平关系.pdf

医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第1期doi:10.3969/j.issn.1673-5013.2024.01.009Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.137PCT、I L-6 和PA在新生儿细菌性感染中检测意义及与T淋巴细胞亚群水平关系杜豪伟(漯河市第二人民医院检验科，河南漯河46 2 0 9 9)摘要)目的：探讨血清降钙素原(PCT)、白细胞介素6（IL-6)、前白蛋白(PA）在新生儿细菌感染性疾病(NB）中的表达意义及与T淋巴细胞亚群水平。方法：回顾性收集2 0 2 2 年1月-2 0 2 3年1月我院收治的150 例NBI新生儿作为研究对象并纳入NBI组，另选取150 例在我院进行正常体检的健康新生儿作为对照组，对比两组新生儿血清PCT、I L-6、PA 及T淋巴细胞亚群水平；Pearson相关系数分析PCT、I L-6、PA 与T淋巴细胞亚群水平的相关性；绘制受试者操作特征曲线(ROC）分析PCT、IL-6、PA 单一及联合检测在新生儿NBI中的检测意义。结果：相比于对照组，NBI组新生儿血清PCT、IL-6、C D 3+、C D 4+表达显著上升，而PA、C D 8+水平显著下降(均 P0.05)；Pe a r s o n 相关系数分析显示PCT、I L-6 均与 CD3+、C D 4+呈显著正相关关系，但与 CD8+呈负相关(均 P0.05)；而 PA则与CD3+、C D 4+呈显著负相关，但与CD8+呈正相关（均P0.05)；R O C 分析显示PCT、IL-6、PA 联合检测的曲线下面积（AUC）显著高于任意指标单独检测（均P0.05)，敏感度为8 6.0 0%，特异度为86.67%。结论：PCT、IL-6、PA 在NBI新生儿中均具有特异性表达，且与新生儿T淋巴细胞亚群水平之间具有较强关联性，临床通过联合检测PCT、IL-6、PA 对NBI的发生发展具有良好的诊断价值，值得临床推广使用。关键词细菌感染性疾病；降钙素原；白细胞介素6；前白蛋白；T淋巴细胞亚群水平Significance of PCT,IL-6 and PA detection in neonatal NBI and their relationship with Tlymphocyte subpopulation levelsDUHao-wei(Department of Laboratory,Luohe Second Peoples Hospital,Henan Luohe 462099)Abstract)Objective:To investigate the significance of serum calcitoninogen(PCT),interleukin 6(IL-6),prealbumin(PA)expression and their relationship with T lymphocyte subpopulation levels in neonates with bacterial infectious disease(NBI).Methods:150 neonates with NBI admitted to our hospital from January 2022 to January 2023 were retrospectively collected,and 150 healthyneonates who underwent normal physical examination in our hospital were selected as the control group,and the levels of serum PCT,IL-6,PA and T lymphocyte subpopulation were compared between the two groups;Correlation between PCT,IL-6,PA and T-lymphocytesubpopulation levels was analyzed by Pearson correlation coefficient;Receiver operating characteristic curve(ROC)curves was drawn toanalyze the significance of single and combined PCT,IL-6,PA in neonatal NBI.Results:Compared with the control group,serum PCT,IL-6,CD3t,CD4 expression was significantly increased in neonates with NBI,while PA and CD8+levels were significantly decreased(both P0.05);Pearson correlation coefficient analysis showed that PCT and IL-6 were both significantly positively correlated with CD3+and CD4t,but negatively correlated with CD8+(both P0.05 The ROC analysis showed that the area under the curve(AUC)of thecombined PCT,IL-6,and PA assay was significantly higher than that of any index alone(all P0.05），具有可比性。本研究经本院伦理委员批准进行，所纳人新生儿的临床资料均采取保密措施，只用于本研究，不做其他用途。纳人标准：符合关于中华医学会中华儿科杂志8 中的相关诊断标准；临床资料完整；两组新生儿基线资料可比，不对后续研究结果产生影响；新生儿家属同意本研究使用其临床资料。排除标准：伴有全身严重感染，造成研究偏倚性增大；合并先天性免疫性疾病；人住新生儿重症监护室；合并先天性血液疾病。Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.1医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第1期1.2方法1.2.1PCT、I L-6、PA 水平检测取所有入组新生儿外周静脉血3mL，肝素抗凝处理后，将静脉血3mL放人离心机（产自北京医用离心机厂）中，设置离心参数为350 0 r/min，离心半径15cm，离心时长10 min，离心完毕后分离上层血浆，并置人-2 0 的环境下储存以备用，化学发光分析仪（厂家：深圳市达科为生物科技有限公司，型号DPC2000）采用电化学发光法检测IL-6水平；免疫发光分析仪（厂家：上海梅里埃生物工程有限公司，型号VIDAS）采用免疫发光分析法检测PCT水平；全自动生化分析仪（厂家：南京贝登医疗股份有限公司，型号CobasC501）检测PA水平。1.2.2T淋巴细胞亚群水平检测流式细胞仪（贝克曼FC-500）检测新生儿T淋巴细胞亚群水平，包括CD3+、C D 4+、C D 8+水平，操作为取所有人组新生儿外周静脉血1mL，肝素抗凝后滴加荧光标记的CD3、C D 4、C D 8 各2 0 L；充分震荡后避光静置2 0 min，充分反应后加人红细胞裂解液；避光静置5min后弃掉上清液，重悬后上流式细胞仪检测，对CD3+、C D 4+、C D 8+淋巴细胞（510 4以上细胞数）所占百分比进行计数。1.3统计学处理使用统计软件SPSS26.0对本研究相关数据进行统计分析，符合正态分布的计量资料以均数土标准差（xs）表示，组间对比使用t检验；计数资料以百分率（%）表示，组间对比使用检验；Pearson相关系数分析PCT、I L-6、PA 与T淋巴细胞亚群水平的关系；受试者操作特征曲线（receiver operatingcharacteristiccurve，R O C）分析PCT、I L-6、PA 单一及联合检测在新生儿 NBI中的诊断意义。设置 P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1对比两组新生儿血清PCT、I L-6、PA 表达差异相比于对照组，NBI组新生儿血清PCT、I L-6 表达显著上升，而PA水平显著下降，见图1，差异均具统计学意义（均P0.05）。2.2对比两组新生儿T淋巴细胞亚群水平差异相比于对照组，NBI组新生儿血清CD3+、C D 4+占比显著上升，而CD8+水平显著下降，见图2，差异均具统计学意义（均P0.05)。=-92.469,P0.001医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第1期2.3Pearson相关系数分析PCT、I L-6、PA 与T淋巴细胞亚群水平的关系Pearson相关系数分析显示PCT、I L-6 均与t=23.0799,P0.0011074.542.128-(iu/bu)1od6-42010090-(%),c80-70-60-50-88786(%),c084-82-80-78-76Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.1t=21.519,P0.0013016.537.00(iu/6d)-712010-0.510.270NBI组对照组图1两组新生儿血清PCT、I L-6、PA 表达差异对比t=42.631.P0.001t=24.705,P0.00180厂82.984.1752.767.17(%),tao6065.322.8940-20NBI组对照组图2两组新生儿T淋巴细胞亚群水平差异对比6018717-(%)t55-50-r=0.724P0.001Y=1.468*X+75.3574239.CD3+、C D 4+呈显著正相关关系，但与CD8+呈负相关(均P0.05）；而PA则与CD3+、C D 4+呈显著负相关，但与CD8+呈正相关（均P0.05)，见图3 5。270.5416.73300-(n/6w)vd200-4.081.07100-0-NBI组对照组36.663.51NBI组对照组=0.76045-P0.001Y=2.532*X+40.3140+480400730(%)80025-20-1510-16-15-1413-Y=-0.6381*X+17.9312-7167106.0713.95NBI组(=-9.291,P0.00115.602.87NBI组=-0.680P0.00182对照组22.933.33对照组4681PCT(ng/ml)88-86-84-(%),c0082-8078-76-888684-(%),c0082-80-78-=-0.2342*X+106.676十80PCT(ng/ml)图3PCT与T淋巴细胞亚群水平相关性60755-(%),tO50-r=0.729P0.001Y=0.4804*X+74.0171015IL-6(pg/ml)/=-0.720P0.001190100PA(mg/L)PCT(ng/ml)18-17(%),80516-15-r=0.80714-45-P0.001Y=0.8377*X+38.5640-T2025图4IL-6与T淋巴细胞亚群水平相关性60-55-(%),ta50-45-Y=-0.3682*X+91.0940+97110120/=-0.693P0.00113-Y=-0.1979*X+18.32121015IL-6(pg/ml)/=-0.719P0.00113080图5PA与T淋巴细胞亚群水平相关性20100110PA(mg/L)25(%),8016-15-14-13-712+1201301018717-8015IL-6(pg/ml)Y=0.1110*X+3.396T90100PA(mg/L)201=0.788P0.00111012025130.402.4ROC分析PCT、I L-6、PA 单一及联合检测在新生儿NBI中的诊断意义经ROC分析显示PCT、I L-6、PA 联合检测的AUC显著高于任意指标单独检测（均P0.05），敏感度为8 6.0 0%，特异度为8 6.6 7%，对于新生儿NBI具有良好的临床诊断意义，见表1、图6。100806040200图6 PCT、I L-6、PA 单一及联合检测在新生儿NBI中的诊断ROC图3讨论NBI作为新生儿科室的一种常见病，在新生儿中具有较高的病死率，尤其对于早产儿来说，虽随着医疗技术的进步，早产儿存活率逐渐提高，但由于该类新生儿免疫系统发育仍未成熟，非特异性和特异性的免疫反应低下，不能抵御病原微生物的人侵，因此造成NBI发病率一直居高不下9 。另外据相关研究表示，由于NBI发病初期在新生儿中症状不显著，且临床对于该类疾病的检测缺乏特异性的指标，无法及时、有效地对NBI进行诊断，从而进一步影响干预措施的进行及预后，因此通过寻找敏感、特异的指标对NBI进行早期诊断对改善新生儿预后结局及提高生存率具有重要意义。目前临床中对于检测NBI常用的指标包括白细胞计数、C反应蛋白，但以表1PCT、I L-6、PA 单一及联合检测在新生儿 NBI中的诊断效能指标AUCPCT0.570IL-60.586PA0.637联合诊断0.875Z/PpCT&联合9.609/0.001Z/PIL-6&联合9.135/0.001Z/PPpA&联合7.879/2.28(ng/mL)54.675.98(pg/mL)68.67119.90(mg/L)86.67截断值0.2130.2000.3330.727医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第1期另外Li Yl7还在研究中表示，在感染程度较轻的患者中PCT水平不受影响，但对于系统性的细菌感染及败血症等疾病较为敏感，可在感染后快速上调，因此对于区分细菌性、非细菌性感染有较为良好的作用。且通过相关性分析显示，PCT与T淋巴细胞亚群之间均具有较强的关联性，同样能够说明PCT能够反映机体免疫功能状态，从而评估NBI的发病。另外IL-6作为白介素家族的一员，作为重要的炎症因子具有广泛的生物学效应，在炎症刺激、病理感染等症状时，细胞因子通过刺激巨噬细胞，从而使T、B细胞活化，产生大量的IL-6，并随着病情的加重而呈上升趋势18 。在本研究中也同样能够看出NBI组新生儿的IL-6水平显著高于对照组，说明在感染性疾病的影响下，新生儿体内的炎症微环境持续激活T、B细胞，从而不断分泌IL-6，造成血清可检测的IL-6水平上升。同时经Pearson相关系数验证，IL-6与T淋巴细胞也具有相关性，首先由于体内炎症反映的加剧，免疫细胞功能亢进，因此IL-6表现为与CD3+、C D 4+呈正相关，但在外来细菌的入侵下，免疫细胞受到不同程度的损伤，因此IL-6与CD8+则表现为显著负相关19 。PA作为肝细胞合成的一类糖蛋白，在临床中常用于评估肝合成功能，但在不断地研究中有学者指出，当机体发生细菌性感染时，PA能够通过消耗自身从而清除血液循环中的有毒代谢物质2 0。而在本研究中同样指出NBI组新生儿的PA水平显著低于对照组，说明在NBI发病过程中，PA不断对机体细菌进行清除，在这一过程中不断被消耗，从而表现为显著下调。且通过相关性分析表示，PA的表达趋势与CD3+、C D 4+相反，与CD8+相同，说明PA作为机体一种消耗物质，在机体免疫功能亢进时其也快速地消耗自身，因此其表达趋势与CD3+t、C D 4+相反，而CD8+作为反映免疫细胞受损程度的一类细胞，当细胞受损程度加重时CD8+下降，因此与PA表现为相同的变化趋势(2 1。另外通过ROC检测显示，联合PCT、I L-6、PA对NBI评估具有较高的诊断效能，显著高于指标单一检测，分析主要是由于单一指标检测不仅仅靶向某一类型疾病的发展，因此对于诊断 NBI仍具有一定的局限性。但由于本研究样本量选取较少，因此不具有广泛的代表性，可在下一步研究中通过大样本量的研究进一步提升研究的准确度与严谨度。综上，在NBI新生儿中均可见特异性表达的PCT、I L-6、PA 水平，且各个因子与T淋巴细胞亚Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.1Pediatrics,2021,148(1):2021051322.2 Xu J,Zhang Y,Ma H,et al.Analysis of Factors Relatedto Neonatal Infection and Monitoring of BacterialDrug ResistanceJ.Z Geburtshilfe Neonatol,2022,226(6):399-404.3 Bai Y,Zhao N,Zhang Z,et al.Identification and vali-dation of a novel four-gene diagnostic model forneonatal early-onset sepsis with bacterial infectionJ.Eur J 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对评估NBI的发生具有较高的诊断价值，可作为一项较为准确的检测方式用于早期诊断NBI的发生，为改善新生儿的预后及干预介人提供坚实的理论依据。参考文献1 Kaplan RL,Cruz AT,Michelson KA,et al.Neonatal M-astitis and Concurrent Serious Bacterial Infection J.4213 Ramon-Luing LA,Carranza C,Tllez-NavarreteNA,et al.Mycobacterium tuberculosis?H37Rv StrainIncreases the Frequency of CD3*TCR*Macrophagesand Affects Their Phenotype,but Not Their Migra-tion AbilityJj.Int J Mol Sci,2021,23(1):329.14 Hammond EM,Baumgarth N.CD4 T cell responsesin persistent Borrelia burgdorferi infection J.CurrOpin Immunol,2022,77(1):102187.15 Pritykin Y,van der Veeken J,Pine AR,et al.A unifiedatlas of CD8 T cell dysfunctional states in cancer andinfectionJ.Mol Cell,2021,81(11):2477-2493.16 Matur E,Ozcan M,Ergil Ekiz E,et al.Use of serumprocalcitonin(PCT)level and PCT mRNA expressionas a potential clinical biomarker in cats with bacterialand viral infectionsJJ Feline Med Surg,2022,24(12):595-602.17 Li Y,Min L,Zhang X.Usefulness of procalcitonin(PCT),C-reactive protein(CRP),and white bloodMedical 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