淡竹叶挥发油成分GC-MS分析_杨海军.pdf

淡竹叶挥发油成分GC-MS分析杨海军1，赵光瑞2，石 芸3，沈金阳2，高 珣2，秦昆明2,3*（1.江苏卫生健康职业学院，江苏 南京 211800；2.江苏海洋大学 药学院，江苏 连云港 222005；3.南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210046）摘 要：目的 通过对淡竹叶挥发油的成分组成研究，探讨淡竹叶挥发油中潜在的抗菌活性成分。方法 采用水蒸气蒸馏法提取淡竹叶挥发油成分，并用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术分析淡竹叶挥发油的主要化学成分。结果 从淡竹叶挥发油中分析得出26种成分，主要以烯类成分（19.87%）为主。结合文献查阅分析筛选淡竹叶挥发油中6种潜在抗菌活性成分为：2,4-二叔丁基苯酚、-紫罗兰酮、-紫罗兰酮、桉叶油醇、-杜松醇、龙脑。结论 不同产地的淡竹叶挥发油中活性成分具有一定差异性，研究结果为后续的药理学研究及其质量标准评价奠定基础。关键词：淡竹叶；挥发油；气相色谱-质谱联用；化学成分中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）01-0036-04DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.01.007GC-MS Analysis on Volatile Oil from Lophatheri HerbaYANG Hai-jun1,ZHAO Guang-rui2,SHI Yun3,SHEN Jin-yang2,GAO Xun2,QIN Kun-ming2,3(1.Jiangsu Health Vocational College,Nanjing 211800,China;2.School of Pharmacy,Jiangsu Ocean University,Lianyungang 222005,China;3.School of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210046,China)Abstract:Objective To study the main components of volatile oils from Lophatheri Herba and explore its potential antibacterial active components.Methods Steam distillation was used to extract the volatile oils from Lophatheri Herba and the main chemical components of the volatile oil from Lophatheri Herba were analyzed by GC-MS technology.Results From the analysis on the volatile oil from Lophatheri Herba,26 kinds of components were obtained,and the main components were olefins(19.87%).Combining literature review and analysis,six potential antibacterial active components in the volatile oil of Lophatheri Herba are 2,4-di-t-butylphenol,-ionone,-ionone,cineole,-cadinol and endo-borneol.Conclusion There are differences in the active ingredients of Lophatheri Herba from different producing areas.The results of the study lay the foundation for the research on the effective material basis of Lophatheri Herba and the quality control evaluation.Key Words:Lophatheri Herba;volatile oil;GC-MS;constituent收稿日期：2021-10-08基金项目：江苏省六大人才高峰项目（编号：SWYY-108）；江苏海洋大学人才引进科研基金项目（编号：KQ17016）作者简介：杨海军，硕士，讲师，研究方向：中药活性成分研究，E-mail:*通讯作者：秦昆明，博士，研究员，研究方向：中药炮制机制及质量标准，E-mail:淡竹叶为禾本科植物淡竹（Lophatherum gracile Brongn.）的干燥茎叶，始载于本草纲目，历版中国药典均收载，具有清热泻火、除烦止渴、利尿通淋之功效，主要分布于我国浙江、福建、广东等省份。淡竹叶收载于药食同源目录大全，是一味药食同源药物，在我国有悠久的药用和食用历史1。淡竹叶主要含有黄酮类、三萜类、酚酸类、挥发油36 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期类、多糖等成分2，具有抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、抗病毒、增强免疫等药理作用3。挥发油类成分脂溶性强，易透过生物膜，能快速吸收起效，是淡竹叶发挥药效作用的一类重要活性成分。现代药理学研究表明，淡竹叶挥发油具有抗菌作用，但对其发挥作用的潜在活性成分尚不明确。本文采用气质联用（GC-MS）技术对淡竹叶挥发油成分组成进行分析，结合文献数据挖掘淡竹叶挥发油中潜在抗菌活性成分，并揭示其质量控制指标成分，为后续药理学研究及其质量标准评价奠定了基础。1 仪器与材料1.1 仪器与设备安 捷 伦 气 相 色 谱-质 谱 联 用 仪（型 号：7890A-5975C，美国安捷伦公司）；安捷伦自动进样器（型号：7693，美国安捷伦公司）；安捷伦气相毛细管柱（型号：HP-5MS，30 m25 m0.25 m）；精密电子分析天平（型号：BS142S，瑞士梅特勒-托利多）。1.2 试剂与材料淡竹叶中药饮片（四川百胜药业，批号：160318，产地：四川）；环己烷（分析纯，南京南奥公司）。2 方法与结果2.1 样品制备方法称取淡竹叶100 g，按照1:10料液比加入纯化水1000 ml，浸泡2 h，精密量取环己烷1 ml加至挥发油提取器，水蒸气蒸馏提取6 h，收集挥发油，加入12 g无水硫酸钠，过夜，除水干燥即得淡竹叶挥发油，经计算淡竹叶挥发油得率为1.0%。2.2 GC-MS分析条件 色谱条件：载气为高纯氦气（99.999%）；分流比设置为10:1；流速设置为1 ml/min；进样体积为1 l；进样口温度为250；柱温箱升温程序见表1。质谱条件：电子轰击（EI）离子源；调谐文件为标准调谐；接口温度为260；离子源温度为230；四级杆温度为150；电子能量为70 eV；质量扫描方式为20500 amu全部扫描范围；电子倍增器电压为1553 V。每个样品进样3针。表1 柱温箱升温程序速率/min-1温度/保持时间/min602320001026052.3 淡竹叶挥发油成分鉴定结果按照2.1项下制备淡竹叶挥发油，取适量的淡竹叶挥发油，按照1:40比例，用乙酸乙酯稀释，经0.45 m滤膜后进GC-MS分析。结果见图1。t/min图1 淡竹叶挥发油GC-MS总离子流图对淡竹叶挥发油质谱扫描总离子流图进行分析，以峰面积归一法测定挥发油中各成分相对百分含量。经由NIST标准质谱库检索匹配化学成分。结果：从淡竹叶挥发油中检测到48种挥发性成分，鉴定出匹配率高于95%的成分共有26种（见表2）。2.4 淡竹叶挥发油成分分析由表1可见，从淡竹叶挥发油中鉴定了26种挥发性成分，占总峰面积的63.13%。其中，占比最多的是烯类成分14种，相对含量共19.87%；其次是醇类成分5种，相对含量共18.26%；酮类成分4种，相对含量共9.21%。在这些成分中，相对含量高于5%的共4种，依次为：叶绿醇、蒎烯、-石竹烯和植酮。相对含量高于1%的共8种，依次为棕榈酸、-律草烯、桉叶油醇、-杜松烯、-杜松醇、龙脑、对伞花烃和-紫罗兰酮。通过与文献进行数据比对，结果表明：产自福建罗源的淡竹叶挥发油中，主要的化学成分为：十六酸（19.9%）、金合欢基丙酮（18.4%）、植醇（8.8%）、石竹烯（5.8%）、7,11-二甲基-3-亚甲基-1,6,10-十二碳三烯（5.5%）4。产自浙江临安的淡竹叶挥发油中，主要化学成分为：棕榈酸（30.7%）、橙花叔醇（12.0%）、糠醛（3.4%）、食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期 37亚麻酸（3.3%）、2-羟基苯乙酮（3.3%）、亚油酸（3.1%）、桉油精（3.0%）、植醇（2.6%）和芳樟醇（0.8%）等 5。在3个产地淡竹叶挥发油成分中，匹配率高于95%的成分，四川有26种，福建有22种，浙江有27种，由此可见，挥发油中的主要成分在数量上无明显差异。但四川与福建产地的淡竹叶挥发油成分差异较大，而浙江与四川产地的淡竹叶挥发油中主要成分相似度较高。对浙江产地与四川产地的淡竹叶挥发油进行数据比较发现，两个产地挥发油均含有紫罗兰酮、-杜松醇、棕榈酸等成分。在福建产地的淡竹叶挥发油中，未发现棕榈酸成分，而浙江与四川两个产地之间棕榈酸含量又存在差异；序号保留时间/min面积/%英文名中文名分子式CAS号匹配度/%相对分子质量14.9439.88(-)-pinene蒎烯C10H167785-26-496136.2325.3160.98(+)-camphene莰烯C10H1679-92-597136.2337.5891.12p-cymene对伞花烃C10H1499-87-697134.2247.8162.81cineole桉叶油醇C10H18O470-82-697154.2559.9670.52tetrahydrodicyclopentadiene四氢二环戊二烯C10H166004-38-298136.23612.9571.31endo-borneol龙脑C10H18O507-70-097154.249718.0570.30anethole茴香烯C10H12O4180-23-897148.20822.4520.94-elemene-榄香烯C15H24515-13-998204.35922.8430.44longifolene长叶烯C15H24475-20-799204.351023.4897.84-caryophyllene-石竹烯C15H2487-44-599204.351123.9321.06-ionone-紫罗兰酮C13H20O127-41-398192.301224.2590.88(+)-aromdendrene(+)-香橙烯C15H24489-39-496204.351324.8533.38-caryophyllene-律草烯C15H246753-98-696204.351425.1390.41alloaromadendrene香树烯C15H2425246-27-999204.351525.8380.45-muurolene-依兰油烯C15H2424268-39-198204.351626.2640.97-ionone-紫罗兰酮C13H20O79-77-695192.301726.7880.65-muurolene-依兰油烯C14H2410208-80-798204.351827.4530.442,4-di-t-butylphenol2,4-二叔丁基苯酚C14H22O96-76-496206.321927.7041.88(+)-cadinen-杜松烯C15H24483-76-198204.352030.2330.48ledol喇叭茶醇C15H26O19078-39-899222.372132.605