细胞培养技术南方医科大学细胞生物学教研室罗深秋DepartmentofCellBiology,SouthernMedicalUniversity第一章概述一.细胞培养技术的概念,简史在体外对细胞培养并进行研究的技术,也叫细胞克隆技术.细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞全能性细胞培养是基于细胞全能性发展起来的细胞生物学技术克隆：无性繁殖植物细胞培养---转基因植物动物细胞培养---转基因动物转基因植物将外源目的基因转入植物的细胞、组织、器官中，获得更能满足人民生活的需要的植物。细胞、组织、器官外源目的基因克隆根、茎、叶、花、果实、种子、植株扦插生根发芽成为植株培养植物克隆丰富了人民的生活植物克隆丰富了人民的生活抗蚜虫小麦抗旱耐盐碱水稻；富含铁的水稻；富含β胡萝卜素水稻抗除草剂作物转基因棉花：动物角蛋白(免、羊毛)棉花，光泽好，手感好，保暖性增强。既保留了传统棉花的天然本质，又具有了免、羊毛的某些品质；彩色棉花棕、绿、黄、浅蓝、粉红、浅褐等；抗虫棉转基因大豆更富营养、耐贮藏番茄；不含尼古丁烟叶、能产生药物的食品细胞培养技术主要包括二大方面内容:1.微生物细胞培养技术2.动,植物细胞培养技术1)器官培养技术2)组织培养技术3)细胞培养技术发展简史二.细胞培养的优点1.得到的是活细胞：能长时间、直接观察、研究活细胞的形态、结构、生命活动2.可控制：可控制-选择对象：类型：上皮？间质？性质：正常？肿瘤？可控制-调节条件：各种因素:物理、化学、生物等因素可控制-利用方法采用各种研究技术、记录方法：研究：倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记--记录：摄影照片、缩时电影、电视--3.应用广学科多：对象广：各种动物：低等动物--高等动物--人类一种动物：不同年龄不同组织:正常或异常（肿瘤）4.较经济：花钱较少但可得到大量、同时、重复性好的生物学性状相似的实验对象5.不易污染环境三.细胞培养的缺点1.现人工无法完全模拟体内环境a.失去彼邻关系b.失去神经体液的调节和细胞相互间的影响2.细胞趋向单一化3.失去原有组织结构和细胞形态4.分化减弱或不显要正确认识体外培养细胞是一种特定条件下生长的细胞群体。5.某些类型细胞还很难培养6.大规模培养难度大四.体外细胞培养的方式1.粘附型培养:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。粘附是大多数有机体细胞在体内外生存和生长发育的基本存在方式2.悬浮型培养:不必附着于固相...
