刘洋操作步骤.docx

处理好的茄子根 加入溶剂进行 超声提取 加入乙醇浓度60、70、75、80、85% 液料比10:1、15:1、20:1、25:1 、30:1 时间10、15、20、25、30min 功率（100--250w）100、125、150、175、200w 温度60℃提取次数2次 提取后溶液进行抽滤，将滤液合并在一起 1． 称取（两次提取并且混合均匀）的上清液 1mL 稀释于10mL 容量瓶中，用60%乙醇溶液定容至刻度，取 1mL 于比色管中， 加 60%乙醇溶液 1mL，依次加入 5% NaNO2 0.3mL， 混匀后静置6min， 加10% Al（NO3）3 0.3mL， 混匀后静置 6min， 加 4% NaOH 溶液 2mL， 摇匀 ，静置 10min， 同时以 60% 乙醇溶液代替样品液配制空白试剂。在272nm 波长处测定吸光度 A。 利用公式：y=33.72x+0.0189（2-1），R2=0.9996。求出黄酮含量 2． 精密量取（两次提取并且混合均匀）的上清液 1mL 稀释于10mL 容量瓶中，各加入三氯化铝溶液2 mL，醋酸-醋酸钠缓冲溶液1 mL，用55%乙醇定容至刻度，摇匀。放入40 ℃水浴锅中水浴10分钟，以加等量无水甲醇溶液的平行样为空白，用紫外分光光度法于272 nm处测其吸光度 看吸光度是否在所测定的区间若在，则继续做。若不在则看浓度， 若浓度过低则用旋转蒸发仪进行浓缩(注意温度)。浓度过高用60%乙醇稀释 。 1． 单因素筛选 已提取率绘图，以乙醇浓度为例，测定5个数据绘制图形选取最优数据，若数据在区间合理就选择最优，若数据前移就另选60%之前数据，若数据后移就在85%后选，其余类似。