动物细胞培养及海水鱼类细胞系的建立秦启伟，黄晓红有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学生命科学学院2第一部分第一部分（动物）细胞培养基本流程以及注意事项（动物）细胞培养基本流程以及注意事项3细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养(cell(cellculture)culture)的含义，简单地说的含义，简单地说即是把来自机体的组织经分散即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞，放在类似于体成为单个细胞，放在类似于体内的体外环境中生存，使其不内的体外环境中生存，使其不断生长、繁殖或传代，借以观断生长、繁殖或传代，借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。细胞培养技术在遗生命现象。细胞培养技术在遗传学、免疫学、肿瘤学、病毒传学、免疫学、肿瘤学、病毒学、分子生物学等领域已得到学、分子生物学等领域已得到广泛的应用。广泛的应用。4单个细胞单个细胞原代细胞原代细胞细胞株细胞株细胞系细胞系剪碎，胰蛋白酶剪碎，胰蛋白酶分离细胞分离细胞原代培养原代培养传代培养传代培养（遗传物质没有发生改变）（遗传物质没有发生改变）（遗传物质发生改变）（遗传物质发生改变）动物组织动物组织动物细胞培养基本流程动物细胞培养基本流程5细胞培养的材料准备1细胞培养液2胰酶消化液3PBS缓冲洗涤液4洁净无菌的细胞培养瓶、培养板6细胞培养基应用选择精要细胞培养基应用选择精要选择培养基没有一定的标准，可供参考的几点建议：选择培养基没有一定的标准，可供参考的几点建议：(1(1）建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养）建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(2)(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。细胞。(3)(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选多选RPMI1640RPMI1640。。(4)(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。最客观的方法，但比较繁琐。7培养前...
