大鼠血清中NO测定实验过程.doc
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大鼠
血清
NO
测定
实验
过程
大鼠血清NO含量测定
【实验目的】
测定大鼠血清NO含量
【实案原理】
NO化学性质活泼，在体内代谢很快转化为NO2和NO3，而NO2又进一步转化为N03 -,而NO2-又进一步转化为NO3-,本法利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-，通过显色深浅测定其浓度的高低
【实验材料】
SD大鼠血清（保存于-20℃）、96孔板、NO试剂盒、酶标仪等
【实验过程】
1. 取出NO试剂盒中的Griess ReagentⅠ和Ⅱ，恢复室温
2. 梯度稀释法稀释标准品：用蒸馏水将1M的NaNO2依次稀释为0,1,2,5,10,20,40,60,100μM的标准品
3. 取出样品，室温下解冻（每组3个样品，共5组）
4. 按50ul/孔，在96孔板中加入标准品及样品
5. 按50ul/孔，在各孔中加入室温Griess ReagentⅠ
6. 按50ul/孔，在各孔中加入室温Griess ReagentⅡ
7. 540nm测定吸光度
8. 数据记录
9.统计学处理：
计量资料用均数±标准差（mean±SD）表示, 利用SPSS19.0 统计软件进行统计分析, 实验组间均数比较采用单因素方差分析(oneway analysis of variance, ANOVA)，并采用LSD法进行两两比较；统计结果P< 0. 05 为差异有统计学意义
