胶原及其促创面修复作用的研究吴志谷,耿淼,黎君友(解放军304医院烧伤研究所基础部,北京100037)摘要:本文介绍了牛胶原和猪真皮胶原制备方法、生物学特点以及动物移植的初步效果。结果表明胶原制备简便易行,氨基酸含量丰富,动物移植胶原材料效果肯定。提示胶原是创伤修复材料的理想天然生物资源。关键词:胶原;氨基酸;移植;创伤修复材料;生物资源中图分类号:R622文献标识码:A文章编号:1006-8376(2002)02-0049-04真皮是皮肤组织修复工程中不可缺少的最重要的材料之一,真皮的主要成分是胶原,而胶原中含有大量的氨基酸,在大面积创伤及烧伤治疗中越来越引起人们的关注。大面积烧伤移植刃厚皮能及时封闭创面、减少感染、防止大量体液丢失,为创面康复提供了良好的条件。然而该皮缺乏足够的真皮,皮肤弹性、柔韧性和机械耐磨性明显降低,创面挛缩性瘢痕增生,严重影响愈后功能。为了克服这一难题,近20年人们对真皮替代物,特别是以胶原为基材的异种皮肤替代物进行了大量研究[1]。本研究仅报告牛腱胶原和猪皮胶原氨基酸以及几种胶原创伤材料的制作和动物移植应用效果。1材料和方法1.1胶原提取1.1.1牛胶原的提取新鲜成年冷冻牛腱切成0.5mm左右的薄片,放入0.05M乙酸中(pH3.2),使其最终浓度为1.5~2.5%(W/V)胶原-乙酸溶液,置4e冰箱48~72h。将膨胀的胶原倒入组织捣碎机中(1500r/min)开30秒停30秒,重复4~5次,用80~100#尼龙网过滤去除胶原溶液中残存有少许膨胀不佳的胶原颗粒。在捣碎和过滤胶原期间,空气会混入胶原液内形成大小不等的气泡,胶原液倒入抽滤瓶中直接抽气(真空泵)或倒入烧杯内置真空干燥箱内减压脱泡,即成均匀的胶原溶液[2]。1.1.2鼠尾胶原的提取按照鄂征5组织培养技术6鼠尾胶原的制备方法收稿日期:2001-09-05作者简介:吴志谷(1948-),男,副主任技师,主要从事创伤修复及其材料的研究提取[3]。1.2牛胶原海绵的制备在胶原溶液中入加硫酸软骨素(成都制药三厂),将硫酸软骨素溶于0.05M乙酸内,缓慢加入并以1000r/min速度不断的搅拌,使硫酸软骨素为胶原总量的8%。将胶原液倒入模具内,在-30e左右的冰箱内预冻4h以上。真空干燥12~24h,加热至105e,恒温24h即成为胶原海绵,放入0.25%戊二醛溶液内,置4e冰箱交联处理24h后,用滤过自来水漂洗2h,然后在双蒸水再置24h(4e),真空干燥保存或与聚氨酯粘附形成聚氨酯-胶原海绵复合膜[2]。1.3去细胞猪真皮的制备中国五指山小型猪(中国农业科学院畜牧研究所提供)。体重30kg,取胸背皮肤,用鼓式取皮机制成中厚皮片(0.6~0.8mm),在0.2%胰蛋...
