第6章原生质体育种和原生质体融合育种第一节原生质体育种第二节原生质体融合育种第三节细菌原生质体融合育种第四节放线菌菌原生质体融合育种第五节酵母原生质体融合育种第六节霉菌原生质体融合育种第七节基因组改组育种第一节原生质体育种原生质体:脱去细胞壁的植物、真菌或细菌细胞。原生质体特性：1.对外界环境影响更敏感，对诱变剂的诱变效应更强烈；2.破壁后细胞表面受体和噬菌体结合部位不复存在，失去对噬菌体的敏感性；3.不受感受态的影响，可进行原生质体转化和融合等基因重组。一、微生物原生质体再生育种1.概念：微生物制备原生质体后直接再生，从再生菌落中分离筛选变异菌株，最终得到优良性状提高的正变菌株。2.原生质体再生育种的一般程序出发菌株的选择→菌种活化和预培养→原生质体制备→原生质体再生→高产菌株分离(初筛)→复筛→遗传稳定性鉴定→菌种特性及发酵特性研究。二、微生物原生质体诱变育种(一)原生质体诱变育种方法1.物理诱变剂诱变原生质体的一般程序2.化学诱变剂诱变原生质体的一般程序(二)原生质体诱变育种实例1.扩展青霉PF-868原生质体制备:纤维素酶2.原生质体再生3.原生质体诱变4.突变株鉴定三、微生物原生质体转化育种四、微生物原生质体融合育种五、其他微生物原生质体育种第二节原生质体融合育种原生质体融合（protoplastfusion）是20世纪70年代发展起来的基因重组技术。用水解酶除去遗传物质转移的最大障碍—细胞壁，制成由原生质膜包被的裸细胞，然后用物理、化学或生物学方法，诱导遗传特性不同的两亲本原生质体融合，经染色体交换、重组而达到杂交的目的，经筛选获得集双亲优良性状于一体的稳定融合子。MicrobeAMicrobeBADDENZYMEADDFUSIONPROMOTER原生质体融合后基因重组与常规杂交相比，原生质体融合具有多方面的优势大幅度提高亲本之间重组频率。扩大重组的亲本范围。原生质体融合时亲本整套染色体参与交换，遗传物质转移和重组性状较多，集中双亲本优良性状机会更大。不足之处原生质体融合后DNA交换和重组随机发生，增加重组体分离筛选的难度。细胞对异体遗传物质的降解和排斥作用，以及遗传物质非同源性等因素也会影响原生质体融合的重组频率，使远缘融合杂交存在较大困难。原生质体融合育种的步骤一、直接亲本及其遗传标记的选择二、原生质体制备与再生三、原生质体融合四、融合体再生与检出五、重组体检出鉴别与遗传特性分析一、直接亲本...
